La ADNasa I Thermo Scientific elimina el ADN no deseado de los lisados celulares para mejorar la eficacia de la extracción de proteínas.
Características de la ADNasa I libre de ARNasa:
• Degrada y elimina el ADN no deseado de las muestras
• Escinde tanto el ADN monocatenario como el bicatenario
• Compatible con los reactivos para lisis celular Thermo Scientific Pierce
• Reduce la viscosidad de los lisados bacterianos (extractos de proteínas) para facilitar el pipeteo
La desoxirribonucleasa I (ADNasa I) es un polipéptido único y glicosilado que degrada el ADN monocatenario y bicatenario no deseado. Las enzimas trabajan para dividir el ADN en fragmentos de fosfodinucleótido de 5' y fragmentos pequeños de oligonucleótido. La ADNasa se agrega con frecuencia a los reactivos de lisis celulares para eliminar la viscosidad que genera el contenido del ADN en los lisados de células bacterianas o para eliminar las plantillas de ADN de los ARN producidos por la transcripción
in vitro. Utilice la ADNasa sin ARNasa para cualquier aplicación que requiera la digestión de ADN en la que sea crucial evitar daños al ARN.
Información general sobre el uso de la ADNasa I:
• Se necesitan iones de calcio para la actividad de la ADNasa I. Puede haber presencia de trazas de Ca++ en cantidad de concentración lo bastante alta como para activar la ADNasa I; no obstante, el uso de tampones libres de EGTA o calcio puede reducir la actividad de la ADNasa I a niveles indetectables.
• Niveles altos (es decir, 100 mM) de iones monovalentes como Na+ y K+ disminuirán la actividad de la ADNasa I
• La ADNasa I se desactiva calentándola a 65 °C durante 10 minutos
• Unidad Kunitz: 1 unidad Kunitz es la cantidad de enzima necesaria para causar un incremento de 0,001 A260 nm/min/ml a 25 °C en 0,1 M de NaOAc, pH 5,0 debido a la degradación de ADN altamente polimerizado
• Unidades de ensayo de degradación: 1 unidad se define como la cantidad de enzimas necesarias para degradar completamente 1 µg de ADN plasmídico en 10 minutos a 37 °C en 10 mM de Tris·HCl, pH 7,5, 50 mM de MgCl
2, 13 mM de CaCl
2.
Especificaciones:
• Cantidad: 1000 unidades (1 ml)
• Concentración: 1 unidad/µl±20 %
• Definición de unidad: 1 unidad degrada completamente 1 µg de ADN plasmídico en 10 minutos a 37 °C. Una unidad DNase I equivale a 0,3 unidades Kunitz.
• Contaminación de ARNasa: No se detecta actividad de ribonucleasa basada en la incubación con transcripción de ARN.
• Fuente:
E. coli que contiene gen clonado que codifica la DNasa I bovina
• Peso molecular: Aproximadamente 29.000
• Formulación: DNasa I bovina en Tris-HCl 50 mm (pH 7.5), 10 mm de CaCl
2, glicerol 50 %
• Suministrado con: 1 ml de tampón de reacción 10X 100 mm Tris-HCl (pH 7.5), 25 mm MgCl
2, 1 mm CaCl
2, 50 mm EDTA
Productos relacionadossolución DNasa I (2500 u/ml)Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.