Thermo Scientific DNase Iは、細胞溶解液から不要なDNAを除去し、タンパク質抽出効率を向上させます。
RNaseフリーDNase Iの特長:
•サンプルから不要なDNAを分解および除去
• 一本鎖および二本鎖DNAの両方を切断
• Thermo Scientific Pierce細胞溶解試薬と互換
• ピペッティングを促進するために細菌ライセート(タンパク質抽出物)の粘性を除去
デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I)はグリコシル化シングルポリペプチドで、不要な一本鎖および二本鎖DNAの両方を分解します。酵素はDNAを5'リン酸ジヌクレオチドと小さいオリゴヌクレオチド断片に切断する働きをします。DNase Iは細菌細胞ライセート中のDNA量に由来する粘性を除去するため、または
in vitro転写で生じたRNAから鋳型DNAを除去するために一般的に細胞溶解試薬に添加されます。RNaseフリーDNaseは、RNAの損傷を避けることが重要なDNAの消化を必要とするあらゆるアプリケーションに有用です。
DNase Iの使用に関する一般的な情報:
•カルシウムイオンはDNase Iの活性にとって不可欠です。微量のCa++がDNase Iを活性化するのに十分に高い濃度で存在すると思われていますが、EGTAまたはカルシウムフリーバッファーを使用するとDNase I活性を検出不可能なレベルまで減少させることが可能です。
•Na+およびK+などの高レベル(すなわち、100 mM)の一価イオンはDNase I活性を減少させます。
• DNase Iは65℃で10分間加熱すると不活性化します
• クニッツユニット:1クニッツユニットは、高度に重合したDNAの分解により0.1 M NaOAcにおいて、pH 5.0、25℃の条件下で0.001 A260nm/min/mL増加させるのに必要な酵素の量です
• 分解アッセイユニット:1ユニットは、10 mM Tris·HCl、pH 7.5、50 mMMgCl
2、13 mM CaCl
2、37℃において、10分間に1 µgのプラスミドDNAを完全に分解するために必要な酵素量として定義されます。
仕様:
• 数量 : 1,000ユニット(1 mL)
•濃度:1ユニット/µL±20 %
•ユニット定義:1ユニットは、37°Cで10分で1µ gのプラスミドDNAを完全に分解します。1DNase I ユニットは、0.3クニッツユニットに相当します。
•RNase汚染:RNA転写体とのインキュベーションに基づいて検出可能なリボヌクレアーゼ活性はありません。
•ソース:ウシDNase Iをコード化するクローン化遺伝子を含む大腸菌
• 分子量:約29,000
•製剤:50 mM Tris-HCl(pH 7.5)、10 mM CaCl
2、50%グリセロール内のウシDNase I
•以下が付属しています:1 mLの10X反応性バッファー 100 mM Tris-HCl(pH 7.5)、25 mM MgCl
2、1 mM CaCl
2、50 mM EDTA
関連製品DNase I溶液(2500 U/mL)