Jump-In™ CHO-K1 Kit

Le kit Jump-In™ CHO-K1 permet l’intégration ciblée du matériel génétique dans un site R4 préconçu spécifique dans la lignée cellulaireAfficher plus

Référence	Quantité
A14148	1 kit

Référence A14148

Prix (EUR)

11 050,00

Quantité:

1 kit

Prix (EUR)

11 050,00

Le kit Jump-In™ CHO-K1 permet l’intégration ciblée du matériel génétique dans un site R4 préconçu spécifique dans la lignée cellulaire Jump-In™ CHO-K1, pour créer une lignée cellulaire stable isogénique avec moins d’efforts et en moins de temps par rapport aux méthodes traditionnelles d’ingénierie cellulaire.

L’efficacité de reciblage élevée, rendue possible par les sites R4 de la lignée cellulaire CHO-K1, permet l’utilisation du pool isogénique pour des expériences supplémentaires sans sélection clonale. Sinon, l’efficacité de reciblage élevée permet une sélection facile d’un clone stable positif exprimant le gène qui vous intéresse.

Le kit Jump-In™ CHO-K1 vous permet de :

• Développer rapidement et efficacement des pools de cellules isogéniques modifiées de façon stable en environ la moitié du temps nécessaire aux méthodes traditionnelles d’ingénierie cellulaire
• Utiliser l’expression isogénique d’un locus génomique défini comme solution idéale pour l’analyse comparative des familles de gènes, des isoformes ou des orthologues
• Générer plusieurs lignées cellulaires en parallèle à l’aide du flux de travail simplifié
• Accéder facilement à la technologie sans licences ou restrictions compliquées à interpréter

Gagnez du temps grâce à la génération rapide et efficace de lignées cellulaires modifiées
Grâce au kit Jump-In™ CHO-K1, vous pouvez générer des pools cellulaires fonctionnels en 2 semaines sans isolement et analyse laborieuses de clones et le protocole rationalisé facilite la génération simultanée de plusieurs lignées cellulaires. Même la génération de lignées cellulaires clonales peut se faire avec moins de temps et d’efforts en raison du pourcentage élevé de clones positifs. En outre, la technologie Jump-In™ vous donne la liberté de générer un nombre illimité de lignées cellulaires sans exigences de licence restrictives.

Développez vos capacités expérimentales
Le kit Jump-In™ CHO-K1 est la solution idéale pour les cellules et les dosages où les technologies d’ingénierie transitoire sont problématiques, ainsi que pour les difficiles à utiliser. Le kit offre également un moyen pratique de créer des panels cibles de familles de gènes, d’isoformes ou d’orthologues. Les gènes codant pour des protéines de grande taille ou des protéines multi-unités ne posent pas de problème car les vecteurs de destination Gateway™ acceptent des inserts de grande taille.

Le kit comprend :
• vecteur pJTI™ R4 Dest CMV pA (100 µg)
• vecteur pJTI™ R4 Int (100 µg)
• Cellules Jump-In™ CHO-K1 (2 flacons de 1 ml chacun)

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications

Lignée cellulaireJump-In™ CHO-K1

Système d’expressionMammifère

FormatKit

Principales fonctionsDéveloppement de lignées cellulaires stables, intégration ciblée

Type de produitKit CHO-K1

AccélérateurCMV

Quantité1 kit

Agent de sélection (eucaryotique)Hygromycine

Type de systèmeJump-In™

Gamme de produitsJump-In

Unit SizeEach

Contenu et stockage

The kit includes:
Jump-In™ CHO-K1 cells
pJTI™ R4 Int (integrase vector)
pJTI™ R4 DEST CMV pA (destination vector)

Upon receipt, immediately store the cells in liquid nitrogen and the vectors at -20 °C. Cells stored at -80°C can quickly lose viability.

Foire aux questions (FAQ)

I am planning to generate a Jump-In platform cell line. Do you recommend mapping the site of integration and checking against the database to pick a clone where integration has occurred in a "good" hot spot?

We would recommend engineering an expression marker/reporter in the plasmid used to create the platform line, and then screening the platform line for expression of this marker to identify a high-expressing locus. Otherwise, the process can get quite labor-intensive, as multiple lines would have to be screened after retargeting.

Does the pJTI PhiC31 Int vector contain a nuclear localization signal (NLS), and would adding an NLS increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites?

The pJTI Phic31 Int vector does not contain an NLS. Adding an NLS could increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites, but there are no data to support it. There is one paper describing the use of an NLS on a PhiC31 integrase vector, but the authors didn't measure integration into pseudo attP sites.

In the Jump-In system, how much DNA or what controls do I need to include in order to get one integration event?

The amount of DNA to be used to obtain single copies should be determined by control experiments done in the absence of integrase. The same amount of DNA that yields less than 5 colonies in the absence of integrase should be used in the presence of integrase. Typically, the integrase expression plasmid makes up most of the amount of DNA used for transfection.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

When should I use the Jump-In Fast system versus the Jump-InTI system?

We recommend using the Jump-In Fast system if you need stable mammalian expression and want to quickly generate well-expressing clones. You can have well-expressing clones with one or more integrations at the PhiC31 pseudo-att P sites. A Southern blot is necessary to confirm the number of integrated events. Use the Jump-InTI system if you need isogenic expression, where every cloned gene would be expressed from the same locus in the same background, with no chromosomal position effects.

What is the difference between the Jump-In and Flp-In systems?

The Jump-In system is PhiC31-integrase mediated and is a stable, targeted, and irreversible mammalian expression system. It consists of the Jump-In Fast system that involves a single integration step and the Jump-InTI (targeted integration) system that needs two integration steps, both of which are targeted and irreversible. In contrast, the Flp-In system is a stable, targeted mammalian expression system that is reversible. The first integration is random (integration of pFRT/lacZeo), and the second integration (integration of the Flp-In expression vector) is targeted but reversible.

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