Kit Jump-In™ GripTite™ HEK293

El kit Jump-In™ GripTite™ HEK293 permite la integración selectiva de material genético en un lugar R4 específico prediseñado en laMás información

Número de catálogo	Cantidad
A14150	1 Kit

Número de catálogo A14150

Precio (MXN)

Cantidad:

1 Kit

El kit Jump-In™ GripTite™ HEK293 permite la integración selectiva de material genético en un lugar R4 específico prediseñado en la línea celular ump-In™ GripTite™ HEK293, para crear una estirpe celular estable isogénica con menos esfuerzo y en menos tiempo que los métodos tradicionales de ingeniería celular.

La alta eficiencia de retargeting, hecha posible gracias a los lugares R4 en la estirpe celular GripTite™ HEK293, permite el uso de la piscina isogénica para experimentos adicionales sin necesidad de selección clonal. De forma alternativa, la alta eficiencia de retargeting permite seleccionar fácilmente un clon positivo estable que expresa su gen de interés.

El kit Jump-In™ GripTite™ HEK293 le permite:

• Desarrollar de forma rápida y eficaz grupos celulares isogénicos diseñados de forma estable en aproximadamente la mitad del tiempo en comparación con los métodos tradicionales de ingeniería celular
• Utilizar la expresión isogénica de un locus genómico definido como la solución ideal para el análisis comparativo de familias de genes, isoformas u ortologos
• Generar varias líneas de células en paralelo utilizando el flujo de trabajo simplificado
• Acceder fácilmente a la tecnología sin licencias complicadas o restricciones para interpretar

Ahorrar tiempo con la generación rápida y eficiente de líneas de células manipuladas
Con el kit Jump-In™ GripTite™ HEK293 puede generar grupos celulares funcionales en tan solo dos semanas sin el laborioso aislamiento y análisis de clones, y el protocolo optimizado facilita la generación de varias líneas de células al mismo tiempo. Incluso la generación de líneas de células clonales se puede hacer con menos tiempo y esfuerzo debido al alto porcentaje de clones positivos. Además, la tecnología Jump-In™ le da la libertad de generar un número ilimitado de líneas celulares sin requisitos restrictivos de licencia.

Amplíe sus capacidades experimentales
El kit Jump-In™ GripTite™ HEK293 es la solución ideal para células y ensayos en los que las tecnologías de ingeniería transitoria son problemáticas, así como para líneas celulares difíciles de diseñar. El kit también proporciona una manera práctica de crear paneles objetivo de familias de genes, isoformas u ortólogos. Los genes que codifican para proteínas de gran tamaño o proteínas multiunidad no son un problema, ya que los vectores de destino Gateway™ aceptan inserciones grandes.

El kit incluye:
• Vector pA CMV Dest PJTI™ R4 (100 µg)
• Vector Int pJTI™ R4 (100 µg)
• Células Jump-In™ GripTite™ HEK293 (dos viales de 1 ml cada uno)

Solo para uso en investigación. No diseñado para uso terapéutico o de diagnóstico en animales o humanos.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Línea de célulasJump-In™ GripTite™ Hek293

Tipo de entregaTransfección

Sistema de expresiónMamífero

Para utilizar con (aplicación)Expresión de proteínas, desarrollo de ensayos

de control principalDesarrollo de línea celular estable, integración orientada

Línea de productosJump-In

Tipo de productoKit HEK293

Cantidad1 Kit

Agente de selección (eucariótico)Geneticin™ (G-418), higromicina

Tipo de sistemaJump-In™

FormatoKit

PromotorCMV

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

El kit incluye:
Células Jump-In™ GripTite™ HEK293
pJTI™ R4 Int (vector de integrasa)
pJTI™ R4 DEST CMV PA (vector de destino)

Una vez recibido, almacene inmediatamente las células en nitrógeno líquido y los vectores a - 20 °C. Las células almacenadas a -80 °C pueden perder rápidamente la viabilidad.

Preguntas frecuentes

I am planning to generate a Jump-In platform cell line. Do you recommend mapping the site of integration and checking against the database to pick a clone where integration has occurred in a "good" hot spot?

We would recommend engineering an expression marker/reporter in the plasmid used to create the platform line, and then screening the platform line for expression of this marker to identify a high-expressing locus. Otherwise, the process can get quite labor-intensive, as multiple lines would have to be screened after retargeting.

Does the pJTI PhiC31 Int vector contain a nuclear localization signal (NLS), and would adding an NLS increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites?

The pJTI Phic31 Int vector does not contain an NLS. Adding an NLS could increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites, but there are no data to support it. There is one paper describing the use of an NLS on a PhiC31 integrase vector, but the authors didn't measure integration into pseudo attP sites.

In the Jump-In system, how much DNA or what controls do I need to include in order to get one integration event?

The amount of DNA to be used to obtain single copies should be determined by control experiments done in the absence of integrase. The same amount of DNA that yields less than 5 colonies in the absence of integrase should be used in the presence of integrase. Typically, the integrase expression plasmid makes up most of the amount of DNA used for transfection.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

When should I use the Jump-In Fast system versus the Jump-InTI system?

We recommend using the Jump-In Fast system if you need stable mammalian expression and want to quickly generate well-expressing clones. You can have well-expressing clones with one or more integrations at the PhiC31 pseudo-att P sites. A Southern blot is necessary to confirm the number of integrated events. Use the Jump-InTI system if you need isogenic expression, where every cloned gene would be expressed from the same locus in the same background, with no chromosomal position effects.

What is the difference between the Jump-In and Flp-In systems?

The Jump-In system is PhiC31-integrase mediated and is a stable, targeted, and irreversible mammalian expression system. It consists of the Jump-In Fast system that involves a single integration step and the Jump-InTI (targeted integration) system that needs two integration steps, both of which are targeted and irreversible. In contrast, the Flp-In system is a stable, targeted mammalian expression system that is reversible. The first integration is random (integration of pFRT/lacZeo), and the second integration (integration of the Flp-In expression vector) is targeted but reversible.

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