Alexa Fluor™ 555 NHS-Ester (Succinimidylester)
Alexa Fluor™ 555 NHS-Ester (Succinimidylester)
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Alexa Fluor™ 555 NHS-Ester (Succinimidylester)

Alexa Fluor™ 555 ist ein heller, orangefarbener Farbstoff. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 555 wird für die Erzeugung stabiler Signale inWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A201095 mg
A200091 mg
A3756425 mg
A375713 x 100 μg
Katalognummer A20109
Preis (EUR)
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Menge:
5 mg
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Alexa Fluor™ 555 ist ein heller, orangefarbener Farbstoff. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 555 wird für die Erzeugung stabiler Signale in der Bildgebung und Durchflusszytometrie verwendet und ist wasserlöslich sowie pH-unempfindlich im Bereich von pH 4 bis pH 10. Zusätzlich zu reaktiven Farbstoffformulierungen bieten wir Alexa Fluor™ 555 konjugiert mit einer Vielzahl von Antikörpern, Peptiden, Proteinen, Markierungssubstanzen und Amplifikationssubstraten, die für die Markierung und den Nachweis von Zellen optimiert wurden, an. Erfahren Sie mehr.

Der NHS-Ester (oder Succinimidylester) von Alexa Fluor™ 555 ist das beliebteste Hilfsmittel für die Konjugierung dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. NHS-Ester können zur Markierung der primären Amine (R-NH2) von Proteinen, Amin-modifizierten Oligonukleotiden und weiteren Amin-haltigen Molekülen verwendet werden. Das entstehende Konjugat mit Alexa Fluor™ weist eine hellere Fluoreszenz und höhere Fotostabilität als Konjugate mit anderen Fluorophoren mit ähnlichem Spektrum auf.

Ausführliche Informationen zu diesem Alexa Fluor™ NHS-Ester:

Fluorophor-Markierung: Alexa Fluor™ 555 Farbstoff
Reaktive Gruppe: NHS-Ester
Reaktivität: Primäre Amine auf Proteinen und Liganden, aminmodifizierte Oligonukleotide
Anregungs-/Emissionsmaxima (Ex/Em) des Konjugats: 555/572 nm
Extinktionskoeffizient: 155.000 cm-1M-1
Farbstoffe mit ähnlichem Spektrum: Tetramethylrhodamin
Molekulargewicht: ∼1250

Typische Konjugationsreaktion
Amin-reaktive Farbstoffe können mit praktisch jedem Protein oder Peptid konjugiert werden (das bereitgestellte Protokoll ist für IgG-Antikörper optimiert). Sie können die Reaktion auf beliebige Proteinmengen skalieren, optimale Ergebnisse erzielen Sie jedoch bei einer Proteinkonzentration von mindestens 2 mg/ml. Wir empfehlen Versuche mit drei verschiedenen Markierungsgraden, für die drei unterschiedliche molare Verhältnisse von reaktivem Reagenz zu Protein verwendet werden.

Der Alexa Fluor™ NHS-Ester ist in der Regel in hochwertigem wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) oder Dimethylsulfoxid (DMSO) (D12345) aufgelöst. Die Reaktion erfolgt in 0,1 – 0,2 M-Natriumbicarbonat-Puffer, pH 8,3, bei Raumtemperatur für 1 Stunde. Da der pKa-Wert des Amino-Terminus niedriger ist als der der epsilon-Aminogruppe des Lysins, erreichen Sie möglicherweise eine stärker selektive Markierung des Amino-Terminus mit einem Puffer, der näher am neutralen pH-Wert liegt.

Konjugat-Aufreinigung
Markierte Antikörper werden in der Regel von freiem Alexa Fluor™ Farbstoff durch Einsatz einer Gel-Filtrationssäule wie Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 oder Ähnlichem getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Aufreinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 – 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 – 50 μg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 – 100 μg (A33088)

Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine breite Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits, passend zu Ihrem Ausgangsmaterial und Ihrer Experimentanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™ Handbuch.


’’’Wenn Sie in unserem Online-Katalog das Gesuchte nicht finden, erstellen wir gern für Sie ein Antikörper- oder Proteinkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für die Qualität unserer Arbeit. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Chemische ReaktivitätAmin
Emission572 nm
Anregung555 nm
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor™ 555
ProdukttypFarbstoff
Menge5 mg
Reaktiver TeilAktiv-Ester, Succinimidylester
VersandbedingungRaumtemperatur
MarkertypAlexa Fluor Farbstoffe
ProduktlinieAlexa Fluor
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?

Yes. The important thing is to use a buffered solution with a pH between 8.0 and 8.5. Do not use Tris buffer, which has amine groups. Most other buffers will work fine in that pH range. This is also true for other amine-reactive dyes, such as succinimidyl (NHS) esters or TFP esters.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?

This is not recommended. Any trace amounts of water in the DMSO can promote spontaneous hydrolysis over time. Even if using anhydrous DMSO, DMSO is hygroscopic; it readily absorbs moisture from the atmosphere over time. A better alternative is to dissolve the reactive dye in a volatile solvent, make smaller aliquots and then evaporate off the solvent using a vacuum pump. The smaller aliquots of solid reactive dye should then be stored frozen, desiccated and protected from light. Contact Technical Support by sending an email to techsupport@thermofisher.com for the recommended volatile solvent.

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Zitierungen und Referenzen (27)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Niemann-Pick C1 functions in regulating lysosomal amine content.
Authors:Kaufmann AM, Krise JP,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:18591242
'Mutations in the late endosomal/lysosomal membrane protein Niemann-Pick C1 (NPC1) are known to cause a generalized block in retrograde vesicle-mediated transport, resulting in the hyper-accumulation of multiple lysosomal cargos. An important, yet often overlooked, category of lysosomal cargo includes the vast array of small molecular weight amine-containing molecules that are ... More
Differential localization of the centromere-specific proteins in the major centromeric satellite of Arabidopsis thaliana.
Authors:Shibata F, Murata M
Journal:J Cell Sci
PubMed ID:15161939
'The 180 bp family of tandem repetitive sequences, which constitutes the major centromeric satellite in Arabidopsis thaliana, is thought to play important roles in kinetochore assembly. To assess the centromere activities of the 180 bp repeats, we performed indirect fluorescence immunolabeling with antibodies against phosphorylated histone H3 at Ser10, HTR12 ... More
Viral nanoparticles as tools for intravital vascular imaging.
Authors:Lewis JD, Destito G, Zijlstra A, Gonzalez MJ, Quigley JP, Manchester M, Stuhlmann H
Journal:Nat Med
PubMed ID:16501571
'A significant impediment to the widespread use of noninvasive in vivo vascular imaging techniques is the current lack of suitable intravital imaging probes. We describe here a new strategy to use viral nanoparticles as a platform for the multivalent display of fluorescent dyes to image tissues deep inside living organisms. ... More
Quantitative comparison of long-wavelength Alexa Fluor dyes to Cy dyes: fluorescence of the dyes and their bioconjugates.
Authors:Berlier JE, Rothe A, Buller G, Bradford J, Gray DR, Filanoski BJ, Telford WG, Yue S, Liu J, Cheung CY, Chang W, Hirsch JD, Beechem JM, Haugland RP, Haugland RP
Journal:J Histochem Cytochem
PubMed ID:14623938
'Amine-reactive N-hydroxysuccinimidyl esters of Alexa Fluor fluorescent dyes with principal absorption maxima at about 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm, and 750 nm were conjugated to antibodies and other selected proteins. These conjugates were compared with spectrally similar protein conjugates of the Cy3, Cy5, ... More
Subdiffraction-resolution fluorescence microscopy reveals a domain of the centrosome critical for pericentriolar material organization.
Authors:Mennella V, Keszthelyi B, McDonald KL, Chhun B, Kan F, Rogers GC, Huang B, Agard DA,
Journal:Nat Cell Biol
PubMed ID:23086239
'As the main microtubule-organizing centre in animal cells, the centrosome has a fundamental role in cell function. Surrounding the centrioles, the pericentriolar material (PCM) provides a dynamic platform for nucleating microtubules. Although the importance of the PCM is established, its amorphous electron-dense nature has made it refractory to structural investigation. ... More