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Invitrogen™
Alexa Fluor™ 555 C2 Maleimide
Alexa Fluor™ 555 ist ein heller, orangefarbener Farbstoff. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 555 wird für die Erzeugung stabiler Signale inWeitere Informationen
| Katalognummer | Menge |
|---|---|
| A20346 | 1 mg |
Katalognummer A20346
Preis (EUR)
602,00
Each
Menge:
1 mg
Preis (EUR)
602,00
Each
Alexa Fluor™ 555 ist ein heller, orangefarbener Farbstoff. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 555 wird für die Erzeugung stabiler Signale in der Bildgebung und Durchflusszytometrie verwendet und ist wasserlöslich sowie pH-unempfindlich im Bereich von pH 4 bis pH 10. Zusätzlich zu reaktiven Farbstoffformulierungen bieten wir Alexa Fluor™ 555-Farbstoff an, der mit einer Vielzahl von Antikörpern, Peptiden, Proteinen, Tracern und Amplifikationssubstraten konjugiert und für die Zellmarkierung und den Nachweis optimiert ist (mehr erfahren).
Das Alexa Fluor™ 555-Maleimidderivat ist das beliebteste Hilfsmittel zur Konjugation dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. Die daraus resultierenden Alexa Fluor™ 555 Konjugate weisen eine hellere Fluoreszenz und eine größere Photostabilität auf als die Konjugate anderer spektral ähnlicher Fluorophore.
Ausführliche Informationen zu diesem AlexaFluor™ Maleimid:
Fluorophormarkierung: Alexa Fluor™ 555 Farbstoff
Reaktive Gruppe: Maleimid
Reaktivität: Thiolgruppen an Proteinen und Liganden, Oligonukleotid-Thiophosphaten
Errregungs-/Emissionsmaxima (Ex/Em) des Konjugats: 556/572 nm
Extinktionskoeffizient: 158.000 cm-1M-1
Farbstoffe mit ähnlichem Spektrum: Tetramethylrhodamin
Molekulargewicht: ∼1250
Typische Konjugationsreaktion
Das Protein sollte bei einer Konzentration von 50 bis -100 µM in einem geeigneten Puffer (10 bis 100 mM Phosphat, Tris oder HEPES) bei pH-Wert 7,0 bis 7,5 aufgelöst werden. In diesem pH-Bereich sind die Thiolgruppen des Proteins so nukleophil, dass sie trotz zahlreich vorhandener Proteinamingruppen, die protoniert und relativ unreaktiv sind, fast ausschließlich mit dem Reagenz reagieren. Wir empfehlen, an diesem Punkt jegliche Disulfidbrücken mit einem Reduktionsmittel 10-fachen molaren Überschusses, wie DTT oder TCEP, zu reduzieren. Überschüssiges DTT muss durch Dialyse entfernt werden. Nachfolgende Thiol-Modifikationen sollten unter sauerstofffreien Bedingungen durchgeführt werden, um eine Neubildung der Disulfid-Verbindungen zu verhindern. Diese Vorsichtsmaßnahmen sind bei der Verwendung von TCEP vor der Maleimid-Konjugation nicht erforderlich.
Das Alexa Fluor™-Maleimid wird in der Regel unmittelbar vor der Verwendung in hochwertigem, wasserfreiem Dimethylsulfoxid (DMSO) mit einer Konzentration von 1 bis 10 mM aufgelöst, und Stammlösungen sollten möglichst vor Licht geschützt werden. Im Allgemeinen wird diese Stammlösung der Proteinlösung tropfenweise unter Rühren hinzugefügt, um rund 10 bis 20 Mol Reagenz pro Mol Protein zu erzielen. Die Reaktion kann bei Raumtemperatur für 2 Stunden oder bei 4 °C über Nacht und vor Licht geschützt erfolgen. Alle unreagierten Thiol-reaktiven Reagenzien können durch Hinzufügen von überschüssigem Glutathion, Mercaptoethanol oder von anderem löslichen niedermolekularen Thiol verbraucht werden.
Konjugataufreinigung
Markierte Antikörper werden normalerweise vom freien Alexa Fluor™-Farbstoff in einer Gel-Filtrationssäule, z. B. Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o.ä., getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Aufreinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 – 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 – 50 µg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 – 100 µg (A33088)
Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine breite Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits, passend zu Ihrem Ausgangsmaterial und Ihrer Experimentanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™ Handbuch.
’
’’’Wenn Sie in unserem Online-Katalog das Gesuchte nicht finden, erstellen wir gern für Sie ein Antikörper- oder Proteinkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für die Qualität unserer Arbeit. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Das Alexa Fluor™ 555-Maleimidderivat ist das beliebteste Hilfsmittel zur Konjugation dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. Die daraus resultierenden Alexa Fluor™ 555 Konjugate weisen eine hellere Fluoreszenz und eine größere Photostabilität auf als die Konjugate anderer spektral ähnlicher Fluorophore.
Ausführliche Informationen zu diesem AlexaFluor™ Maleimid:
Fluorophormarkierung: Alexa Fluor™ 555 Farbstoff
Reaktive Gruppe: Maleimid
Reaktivität: Thiolgruppen an Proteinen und Liganden, Oligonukleotid-Thiophosphaten
Errregungs-/Emissionsmaxima (Ex/Em) des Konjugats: 556/572 nm
Extinktionskoeffizient: 158.000 cm-1M-1
Farbstoffe mit ähnlichem Spektrum: Tetramethylrhodamin
Molekulargewicht: ∼1250
Typische Konjugationsreaktion
Das Protein sollte bei einer Konzentration von 50 bis -100 µM in einem geeigneten Puffer (10 bis 100 mM Phosphat, Tris oder HEPES) bei pH-Wert 7,0 bis 7,5 aufgelöst werden. In diesem pH-Bereich sind die Thiolgruppen des Proteins so nukleophil, dass sie trotz zahlreich vorhandener Proteinamingruppen, die protoniert und relativ unreaktiv sind, fast ausschließlich mit dem Reagenz reagieren. Wir empfehlen, an diesem Punkt jegliche Disulfidbrücken mit einem Reduktionsmittel 10-fachen molaren Überschusses, wie DTT oder TCEP, zu reduzieren. Überschüssiges DTT muss durch Dialyse entfernt werden. Nachfolgende Thiol-Modifikationen sollten unter sauerstofffreien Bedingungen durchgeführt werden, um eine Neubildung der Disulfid-Verbindungen zu verhindern. Diese Vorsichtsmaßnahmen sind bei der Verwendung von TCEP vor der Maleimid-Konjugation nicht erforderlich.
Das Alexa Fluor™-Maleimid wird in der Regel unmittelbar vor der Verwendung in hochwertigem, wasserfreiem Dimethylsulfoxid (DMSO) mit einer Konzentration von 1 bis 10 mM aufgelöst, und Stammlösungen sollten möglichst vor Licht geschützt werden. Im Allgemeinen wird diese Stammlösung der Proteinlösung tropfenweise unter Rühren hinzugefügt, um rund 10 bis 20 Mol Reagenz pro Mol Protein zu erzielen. Die Reaktion kann bei Raumtemperatur für 2 Stunden oder bei 4 °C über Nacht und vor Licht geschützt erfolgen. Alle unreagierten Thiol-reaktiven Reagenzien können durch Hinzufügen von überschüssigem Glutathion, Mercaptoethanol oder von anderem löslichen niedermolekularen Thiol verbraucht werden.
Konjugataufreinigung
Markierte Antikörper werden normalerweise vom freien Alexa Fluor™-Farbstoff in einer Gel-Filtrationssäule, z. B. Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o.ä., getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Aufreinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 – 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 – 50 µg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 – 100 µg (A33088)
Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine breite Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits, passend zu Ihrem Ausgangsmaterial und Ihrer Experimentanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™ Handbuch.
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’’’Wenn Sie in unserem Online-Katalog das Gesuchte nicht finden, erstellen wir gern für Sie ein Antikörper- oder Proteinkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für die Qualität unserer Arbeit. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Chemische ReaktivitätThiol
Emission572 nm
Anregung556 nm
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor™ 555
ProdukttypFarbstoff
Menge1 mg
Reaktiver TeilMaleimid
VersandbedingungRaumtemperatur
MarkertypAlexa Fluor Farbstoffe
ProduktlinieAlexa Fluor
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.
Zitierungen und Referenzen (10)
Zitierungen und Referenzen
Abstract
Single-molecule investigation of the T4 bacteriophage DNA polymerase holoenzyme: multiple pathways of holoenzyme formation.
Journal:Biochemistry
PubMed ID:16800624
'In T4 bacteriophage, the DNA polymerase holoenzyme is responsible for accurate and processive DNA synthesis. The holoenzyme consists of DNA polymerase gp43 and clamp protein gp45. To form a productive holoenzyme complex, clamp loader protein gp44/62 is required for the loading of gp45, along with MgATP, and also for the
Assembly of the bacteriophage T4 primosome: single-molecule and ensemble studies.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:15728347
'Within replisomes for DNA replication, the primosome is responsible for unwinding double-stranded DNA and synthesizing RNA primers. Assembly of the bacteriophage T4 primosome on individual molecules of ssDNA or forked DNA (fDNA) has been studied by using FRET microscopy. On either DNA substrate, an ordered process of assembly begins with
Conformation coupled enzyme catalysis: single-molecule and transient kinetics investigation of dihydrofolate reductase.
Journal:Biochemistry
PubMed ID:16363797
'Ensemble kinetics and single-molecule fluorescence microscopy were used to study conformational transitions associated with enzyme catalysis by dihydrofolate reductase (DHFR). The active site loop of DHFR was labeled with a fluorescence quencher, QSY35, at amino acid position 17, and the fluorescent probe, Alexa555, at amino acid 37, by introducing cysteines
Four-color single-molecule fluorescence with noncovalent dye labeling to monitor dynamic multimolecular complexes.
Journal:Biotechniques
PubMed ID:21091445
To enable studies of conformational changes within multimolecular complexes, we present a simultaneous, four-color single molecule fluorescence methodology implemented with total internal reflection illumination and camera-based, wide-field detection. We further demonstrate labeling histidine-tagged proteins noncovalently with Tris-nitrilotriacetic acid (Tris-NTA)-conjugated dyes to achieve single molecule detection. We combine these methods to
Organization of the archaeal MCM complex on DNA and implications for the helicase mechanism.
Journal:Nat Struct Mol Biol
PubMed ID:16116441
The homomultimeric archaeal mini-chromosome maintenance (MCM) complex serves as a simple model for the analogous heterohexameric eukaryotic complex. Here we investigate the organization and orientation of the MCM complex of the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus solfataricus (Sso) on model DNA substrates. Sso MCM binds as a hexamer and slides on the