Le mélange maître PowerUp™ SYBR® Green est un mélange préformulé, optimisé et universel 2X pour les flux de travaux PCR en temps réel. Associé aux ensembles d’amorces et aux modèles fournis par l’utilisateur, le Master Mix PowerUp™ SYBR® Green est conçu pour amplifier les cibles afin de permettre des analyses d’expression génétique de précision.
Les caractéristiques du Master Mix PowerUp™ SYBR® Green incluent :
• Mécanisme de double démarrage à chaud pour une spécificité excellente
• Des valeurs de CT hautement reproductibles sur une vaste échelle dynamique
• Inclusion d’UDG afin d’éviter toute contamination croisée
• Stabilité des réactions préassemblées jusqu’à 72 heures
• Compatible avec la plupart des appareils qPCR en temps réel
Spécificité exceptionnelle avec mécanisme de double démarrage à chaudLa spécificité est essentielle pour obtenir des données de haute qualité dans les réactions SYBR® Green et peut être améliorée en contrôlant l’ADN polymérase Taq à des températures plus basses avant la liaison rigoureuse des amorces. Le mélange maître PowerUp™ SYBR® Green utilise l’enzyme ADN polymérase Dual-Lock™ Taq qui associe deux mécanismes de démarrage à chaud uniques pour contrôler son activité et éviter une activité précoce indésirable des polymérases à basse température. Au cours d’une expérience évaluant 24 différents ensembles d’amorces, le Master Mix PowerUp™ SYBR® Green a généré des courbes de fusion unique dans 100 % des cas, et à chaque fois avec une amplification hautement spécifique.
Forte reproductibilité des valeurs CT sur une large échelle dynamique Le Master Mix PowerUp™ SYBR® Green fait preuve d’une reproductibilité excellente sur une large échelle dynamique pour une grande variété de cibles testées (voir la figure). De plus, ce mélange maître fournit une amplification efficace sur 6 échantillons d’entrée. Contrairement aux mélanges concurrents qui ne présentent une inhibition qu’avec des entrées d’ADNc élevées et des coefficients de corrélation faibles sur une échelle dynamique expérimentale, l’efficacité du Master Mix PowerUp™ SYBR® Green est maintenue sur l’ensemble de l’échelle dynamique et conforte ainsi une confiance maximale dans la qualité des données (voir la figure).
UDG inclus pour contrôler la contamination croiséeL’inclusion d’uracile ADN glycosylase (UDG) et de dUTP dans le Master Mix PowerUp™ SYBR® Green permet de dégrader tout produit PCR précédemment amplifié, évitant ainsi la contamination des réactions qPCR ultérieures et d’éventuels faux positifs
Stabilité des réactions préassembléesLe contrôle rigoureux de l’ADN polymérase Dual-Lock™ Taq dans le Master Mix PowerUp™ SYBR® Green permet aux réactions d’être assemblées jusqu’à 72 heures avant le cyclage sans que les données ne soient affectées (voir la figure). Cela rend les utilisateurs confiants et confère au Master Mix PowerUP™ SYBR® Green une utilisation flexible dans toutes sortes de flux de travail
1.
Compatibilité élevée avec les instrumentsLe Master Mix PowerUp™ SYBR® Green peut être utilisé en mode de cyclage standard ou rapide ; il est compatible avec tous les appareils de PCR en temps réel Applied Biosystems®2. Il est également compatible avec les systèmes Bio-Rad IQ™5, CFX96™ / CFX384™, Roche LightCycler® LC480 et Stratagene® MX3005P®. Pour des résultats optimaux, les concentrations d’amorce recommandées sont de 300 à 800 nM.
En savoir plus sur le Master Mix PowerUp™ SYBR® Green >1 La stabilité avant PCR est influencée non seulement par le Master Mix, mais également par la cible analysée. Pour un maximum de confiance, les chercheurs doivent confirmer le profil de stabilité de leurs cibles spécifiques.
2 Pour des performances optimales, un cyclage standard avec le système Applied Biosystems® 7900 est recommandé.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.