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Invitrogen™
Alexa Fluor™ 405 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Alexa Fluor™ 405 es un tinte azul fluorescente óptimo para su uso con el láser violeta de 405 nm. ElMás información
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| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| A30000 | 1 mg |
| A30100 también denominado A-30100 | 5 mg |
Número de catálogo A30000
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 mg
Alexa Fluor™ 405 es un tinte azul fluorescente óptimo para su uso con el láser violeta de 405 nm. El tinte Alexa Fluor™ 405, empleado para la generación estable de señales para la obtención de imágenes en citometría de flujo, es soluble en agua e insensible al pH entre pH 4 y pH 10. Además de las formulaciones de colorante reactivo, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 405 conjugado con una serie de anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para la detección y el etiquetado celular (más información).
El éster de NHS (o éster de succinimidilo) de Alexa Fluor™ 405 es la herramienta más empleada para conjugar este colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS se pueden usar para etiquetar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. El conjugado Alexa Fluor™ obtenido mostrará una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:
Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 405
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 400/424 nm
Coeficiente de extinción: 35.000 cm-1 m-1
Colorantes similares espectrales: Pacific Blue
Peso molecular: 1028,3
Reacción de conjugación habitual
Puede conjugar agentes aminorreactivos con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
El éster de NHS (o éster de succinimidilo) de Alexa Fluor™ 405 es la herramienta más empleada para conjugar este colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS se pueden usar para etiquetar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. El conjugado Alexa Fluor™ obtenido mostrará una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:
Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 405
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 400/424 nm
Coeficiente de extinción: 35.000 cm-1 m-1
Colorantes similares espectrales: Pacific Blue
Peso molecular: 1028,3
Reacción de conjugación habitual
Puede conjugar agentes aminorreactivos con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaAmina
Método de detecciónFluorescente
Emisión421 nm
Excitación401 nm
Líneas láser del citómetro de flujo405 nm
Etiqueta o tinteAlexa Fluor™ 405
Tipo de productoTinte
Cantidad1 mg
Fracción reactivaEster activo, succinimidilo éster
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
SolubilidadDMSO (dimetilsulfóxido)
Tipo de etiquetaColorantes Alexa Fluor
Línea de productosAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene 1 vial (1 mg). Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?
I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?
Is Alexa Fluor 405 dye the best dye for imaging with a 405 nm laser?
Citations & References (16)
Citations & References
Abstract
3D multicolor super-resolution imaging offers improved accuracy in neuron tracing.
Journal:PLoS One
PubMed ID:22292051
'The connectivity among neurons holds the key to understanding brain function. Mapping neural connectivity in brain circuits requires imaging techniques with high spatial resolution to facilitate neuron tracing and high molecular specificity to mark different cellular and molecular populations. Here, we tested a three-dimensional (3D), multicolor super-resolution imaging method, stochastic
Preparation of photoswitchable labeled antibodies for STORM imaging.
Journal:
PubMed ID:23734027
'Stochastic optical reconstruction microscopy (STORM) is a method for superresolution fluorescence imaging based on the high accuracy localization of individual fluorophores. It uses optically switchable fluorophores: molecules that can be switched between a nonfluorescent and a fluorescent state by exposure to light. Many synthetic fluorescent dye molecules show photoswitchable fluorescence
CD8 T cell competition for dendritic cells in vivo is an early event in activation.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16880405
'T cell responses against an antigen are often focused on a small fraction of potentially immunogenic determinants, a phenomenon known as immunodominance. Immunodominance can be established at several stages of antigen presentation, including antigen processing, binding of peptides to MHC, and competition between T cells for dendritic cells (DCs). The
Fast, three-dimensional super-resolution imaging of live cells.
Journal:Nat Methods
PubMed ID:21552254
'We report super-resolution fluorescence imaging of live cells with high spatiotemporal resolution using stochastic optical reconstruction microscopy (STORM). By labeling proteins either directly or via SNAP tags with photoswitchable dyes, we obtained two-dimensional (2D) and 3D super-resolution images of living cells, using clathrin-coated pits and the transferrin cargo as model
Superresolution imaging of chemical synapses in the brain.
Journal:Neuron
PubMed ID:21144999
'Determination of the molecular architecture of synapses requires nanoscopic image resolution and specific molecular recognition, a task that has so far defied many conventional imaging approaches. Here, we present a superresolution fluorescence imaging method to visualize the molecular architecture of synapses in the brain. Using multicolor, three-dimensional stochastic optical reconstruction