Das Thermo Scientific A549 (+hIGF-1) Kontrolllysat ist ein stimuliertes Zelllysat, das für die Expressionsstufen und die Phosphorylation wichtiger Ziele im Signalweg validiert wurde.
Merkmale des A549 (+hIGF-1) Kontrolllysats:
• Validiert für die Expression von AKT-, PTEN-, IRS1-, IGF1-R-, GSK3a-, GSK3b-, PRAS40-, mTOR-, p70S6K- und TSC2-Proteinen durch Western Blotting- und Massenspektrometrie-Analyse
• Optimiert – optimierte Stimulations- und Lysebedingungen zum Nachweis von AKT-Signalzielen
•Praktisch – gebrauchsfertiges Lysat zur Immunpräzipitation, Immunpräzipitation für Massenspektrometrie und Western Blotting-Anwendungen
• Zwei Jahre lang stabil bei -80 °C
Der AKT-Signalweg dient als regulatorischer Hauptweg für Zellwachstum und -proliferation, und die Phosphorylierung spielt eine wichtige Rolle bei der Modulation. Die aberrante Aktivierung dieses Signalweges fördert das Überleben von Tumorzellen bei vielen Krebsarten. Dieses Lysat wurde für die Expression von zehn Schlüsselproteinen im AKT-Signalweg (AKT, PTEN, IRS1, IGF1-R, GSK3a, GSK3b, PRAS40, mTOR, p70S6K und TSC2) validiert.
Die A549-Zelllinie ist eine humane Lungenkarzinom-Zelllinie und wird als Modell für nicht-kleinzellige Lungenkarzinome verwendet. Das A549-Zelllysat (+hIGF-1) wird als gefriergetrocknetes Lysat mit einer Standardkonzentration von 1 mg/ml (500 mg pro Fläschchen) geliefert. Lysate werden in nicht denaturierenden Puffern ohne Ladefarbstoffe oder Dissoziationsmittel hergestellt (d. h. es wurde kein 2-Mercaptoethanol oder Dithiothreitol hinzugefügt). Für Western Blot-Analyse Lysat 5 Minuten lang auf 95°°C erhitzen. Bei Bedarf vor dem Erhitzen Reduktionsmittel hinzufügen. Das empfohlene Ladevolumen pro Signalweg beträgt 10–20 μl (10–20 µg).
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