Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format
Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format
Thermo Scientific™

Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format

El reactivo de transferencia de etiquetas de biotina Thermo Scientific Pierce Sulfo-SBED es un reactivo multifuncional para etiquetar una proteínaMás información
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El reactivo de transferencia de etiquetas de biotina Thermo Scientific Pierce Sulfo-SBED es un reactivo multifuncional para etiquetar una proteína purificada y, a continuación, transferir covalentemente la etiqueta de biotina adjunta a interactores específicos de esa proteína.

Sulfo-SBED es la abreviatura de Sulfo-N-hidroxisuccinidil-2-(6-[biotinamido]-2-(p-azido benzamido)-hexanoamido) etil-1,3'-ditiopropionato. Es un entrecruzador químico heterobifuncional capaz de acoplarse covalentemente a aminas primarias en un extremo y a casi cualquier grupo funcional de proteínas en el otro extremo A diferencia de los entrecruzadores típicos, el Sulfo-SBED también incluye un grupo de biotina y un agente separador de disulfuro separable. Estas características permiten entrecruzar secuencialmente proteínas que interactúan y transferir la etiqueta de afinidad de la biotina de una proteína (es decir, una proteína de «cebo» purificada) a otra (posiblemente proteína de «presa» desconocida). La transferencia de etiquetas es un poderoso método in vitro para descubrir la interacción de proteínas. Un número creciente de publicaciones incluyen el uso del reactivo de transferencia de etiquetas Sulfo-SBED Biotin para identificar elementos de unión de interacción de proteínas previamente desconocidos y para caracterizar más plenamente los dominios de unión de proteínas específicos de otras interacciones de proteínas.

Protocolo típico para el experimento de transferencia de etiquetas:

• Añada unos cuantos microlitros de reactivo Sulfo-SBED disuelto a 0,5-1 ml de proteína de cebo purificada en PBS.
• Incube la mezcla durante 30-120 minutos en hielo o a temperatura ambiente en la oscuridad.
• Desale o dialice (con luz tenue) para eliminar el exceso de Sulfo-SBED no reaccionado de la proteína de cebo etiquetada.
• Añada la proteína de cebo etiquetada al lisado celular o a otra solución que contenga los supuestos interactores de proteínas diana (presa).
• Cuando se hayan formado complejos de interacción, exponga la solución a la luz ultravioleta (365 nm) durante varios minutos.
• Analice los productos mediante uno de los siguientes métodos:
• Inmunotransferencia (Western Blotting): Separe entrecruzamientos en DTT, separe proteínas por SDS-PAGE y detectee bandas biotiniladas por Western blotting con estreptavidina-HRP.
• Purificación y espectrometría de masas o secuenciación: Purifique por afinidad proteínas biotiniladas o fragmentos de péptidos después de la digestión con tripsina y realice MS o secuenciación para caracterizar las proteínas involucradas.

Productos relacionados:
Kit de transferencia de etiquetas Sulfo-SBED Biotin - Aplicación de Western Blotting

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
Reactividad químicaAmina-a-amina
Método de etiquetadoEtiquetado químico, transferencia de etiquetas
Etiqueta o tinteBiotina
Tipo de productoReactivo de transferencia de etiquetas de biotina Sulfo-SBED
Cantidad10 x 1 mg
Fracción reactivaÉster NHS, alquino
Condiciones de envíoApto para hielo húmedo o temperatura ambiente
SolubilidadDMF (dimetilformamida), DMSO (dimetilsulfóxido), metanol, agua
Tipo de etiquetaBiotina y otros haptenos
Línea de productosPierce
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar a 4 °C.

Preguntas frecuentes

Can you provide the shelf-life for Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent?

Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended. Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf) for more details.

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How does a product with "No-Weigh" format reduce my concern over reagent stability?

The No-Weigh product format, where small amounts of reagent are pre-weighed and packaged separately, prevents the contamination and loss of reagent reactivity over time associated with repetitive opening and closing of a single vial. This format enables use of a fresh vial of reagent each time and eliminates the hassle of weighing out small amounts of reagent. Please view additional information and the video at: https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-labeling-crosslinking/no-weigh-packaging.html

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What crosslinkers do you recommend to study protein-protein interactions that are mass spectrometry - compatible?

We offer Sufo-SBED (Cat. Nos. 33033 and A39260).

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What are the options for crosslinking proteins to nucleic acids, and what are the differences between them?

We offer the following crosslinkers for protein to nucleic acids: formaldehyde (Cat. No. 28906), SPB (Cat. No. 23013), SDAD (Cat. No. 26169), sulfo-SDAD (Cat. No. 26175), and sulfo-SBED (Cat. No. A39260).
Formaldehyde can be used for DNA-DNA crosslinking as well as DNA-protein crosslinking. While it is good for crosslinking proteins that are in direct contact with DNA, formaldehyde cannot link proteins that may be bound in a complex with other proteins but are not in direct contact with DNA. EGS or DSG can crosslink proteins to other proteins that are in direct contact with DNA and crosslinked to DNA by formaldehyde.
SPB, Sulfo-SDAD, and Sulfo-SBED are all photoreactive crosslinkers. SPB is an NHS-ester and psoralen heterobifunctional crosslinker that conjugates primary amines on proteins to DNA via photo-activated intercalation of psoralen to pyrimidine bases. The psoralen tricyclic planar ring system intercalates into double-stranded, and to a lesser extent, single-stranded DNA and RNA. The photoreactive psoralen group provides more selective covalent binding to nucleic acids than either phenyl azide or diazerine linkers, which makes SPB the best choice. The diazerine on sulfo-SDAD and the phenyl azide on sulfo-SBED are not selective for nucleic acids and can crosslink other biomolecules in the same besides any protein-DNA interactions. Sulfo-SBED involves biotin transfer rather than actual linking.

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