Pierce™ GPCR-Extraktions- und Stabilisierungsreagenz

Thermo Scientific GPCR-Extraktions- und Stabilisierungsreagenz ermöglicht die effiziente Extraktion und Stabilisierung von G-gekoppelten Proteinrezeptoren (GPCRs) und anderen membranassoziierten Proteinen aus kultivierten Säugetierzellen oder Gewebe unter Wahrung einer längerfristigen Rezeptorintegrität.

Merkmale des GPCR-Extraktions- und Stabilisierungsreagenzes:
• Anwenderfreundlich – All-in-one-Formulierung für die Extraktion und Stabilisierung von GPCRs innerhalb einer Stunde
• GPCR-Konservierung – Stabilisiert den Rezeptor in einer Detergentmizelle zur Sicherstellung der Rezeptorfunktion
• Optimiert – Formulierung und optimiertes Verfahren bieten eine schonende, aber effiziente Extraktion von GPCRs aus der Plasmamembran
• Kompatibel – Lysat ist direkt mit nachgeschalteten Anwendungen kompatibel, einschließlich Western-Blotting, Immunpräzipitation und Rezeptor-Ligand-Bindungsassays

GPCR-Extraktions- und Stabilisierungsreagenz ist einfach in der Anwendung. Die Probe wird zuerst geerntet, gewaschen und pelletiert. Dann wird der Rezeptor mit dem Reagenz extrahiert und anschließend zentrifugiert. Das resultierende Gesamtzelllysat enthält solubilisierte und stabilisierte Rezeptoren. Das Reagenz wurde für die Verwendung mit endogenen und überexprimierten GPCRs getestet und die Rezeptorfunktion wurde durch Rezeptorligand-Bindungsassays verifiziert.

GPCRs stellen eine große Familie von Rezeptoren mit sieben transmembranen Domänen dar, die eine Schlüsselrolle bei der Übertragung von Signalen durch die Zellmembran spielen. Sie sind wirksame Ziele von Arzneimitteln bei der Behandlung von genetischen Erkrankungen sowie Störungen des Immunsystems und dienen als potenzielle Biomarker und therapeutische Ziele für die Krebsbehandlung. Eine der größten Herausforderungen in der GPCR-Forschung ist die Möglichkeit, den Rezeptor effizient aus der Membran zu extrahieren, ohne die strukturelle und funktionelle Integrität des Proteins zu beeinträchtigen. Das GPCR-Extraktions- und Stabilisierungsreagenz kapselt den Rezeptor in einer Detergentmizelle ein, die für die Sicherstellung der Rezeptorfunktion für einen Zeitraum von einer Woche bei einer Lagerung bei 4 °C und für einen Zeitraum von einem Monat bei einer Lagerung bei -20 °C nach der Extraktion optimiert ist. Dies bietet mehr Flexibilität für die Rezeptoranalyse.

Literatur
1. Nieto Gutierrez A, McDonald PH. GPCRs: Emerging anti-cancer drug targets. Cell Signal. 2018 Jan;41:65-74.
2. Zhang S, Togo S, Minakata K, Gu T, Ohashi R, Tajima K, Murakami A, Iwakami S, Zhang J, Xie C, Takahashi K. Distinct roles of cholinergic receptors in small cell lung cancer cells. Anticancer Res. 2010 Jan;30(1):97-106.