Kits de preparación de muestras para MS EasyPep™

Name: Kits de preparación de muestras para MS EasyPep™
SKU: A45735

Genere muestras proteómicas de alta calidad para el análisis mediante MS en menos de cuatro horas gracias a los kits optimizados de preparación de muestras para MS EasyPep.

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Número de catálogo	Descripción
A45735	Tampón de lisis
A40006	Kit de preparación de muestras Mini para MS
A57864	Kit de preparación de muestras Micro MS
A45733	Kit de preparación de muestras MS
A45734	Kit de preparación de muestras Maxi
A57865	Placa de limpieza de péptidos

6 opciones

Número de catálogo A45735

Precio (CLP)

Descripción:

Tampón de lisis

Los kits de preparación de muestras para MS EasyPep Mini permiten el procesamiento eficaz y reproducible de células y tejidos cultivados de mamíferos para el análisis proteómico de MS. El kit contiene tampones preformulados, mezcla de enzimas de grado MS, columnas de limpieza de péptidos y un protocolo optimizado para generar muestras de péptidos compatibles con MS en menos de tres horas. Los kits están optimizados para procesar muestras de proteínas de 10 a 100 μg con un alto rendimiento de péptidos preparados para MS.

• Completo: incluye reactivos preformulados para la lisis mediante digestión con columnas de limpieza de péptidos y un protocolo optimizado para hasta 20 muestras
• Optimizado: el protocolo y los reactivos optimizados minimizan el número de pasos y el tiempo necesario para procesar las muestras
• Flexible: los reactivos y el protocolo se han verificado utilizando muestras de células y tejidos para muestras entre 10 y 100 µg
• Ahorro de tiempo: tiempo de procesamiento de muestras reducido de más de un día a menos de tres horas
• Compatible: la preparación final está lista para el análisis directo de MS y otras aplicaciones posteriores, incluido el etiquetado TMT

La preparación de muestras de péptidos para el análisis de MS es compleja, con numerosos pasos y protocolos variados, lo que resulta en variabilidad de la muestra tanto de calidad como de cantidad. Este kit se ha diseñado para mejorar la reproducibilidad y, al mismo tiempo, ahorrar tiempo de manipulación y procesamiento. El número de pasos y el tiempo de procesamiento se han reducido mediante la adición de nucleasas universales para reducir la viscosidad de los ácidos nucleicos (sustitución de la administración de ultrasonidos), una rápida solución de reducción/alquilación de «un pocillo» para la modificación de la cisteína (carbamidometilación, + 57,02) y una mezcla de tripsina/proteasa Lys-C para una digestión más completa. Además, el kit incluye columnas de limpieza de péptidos y tampones para preparar muestras de péptidos sin detergente para el análisis de MS. Los reactivos y protocolos optimizados producen péptidos de alta calidad que son compatibles con el etiquetado TMT y otras aplicaciones posteriores, o que están listos para el análisis de MS.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Especificaciones

DescripciónTampón de lisis

Tipo de producto finalproteína

Para utilizar con (equipo)Espectrómetro de masas

Etiqueta o tinteSin marcar

Cantidad100 mL

Condiciones de envíoHielo húmedo

Paso del flujo de trabajoLisis celular

Método de detecciónEspectrometría de masas

FormularioMediciones

Línea de productosEasyPep

Tipo de productoTampón de lisis

Material de partidaMuestras de proteínas

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Almacenar a una temperatura de entre 2 y 8 °C

Preguntas frecuentes

After cell lysis, my mass spectrometry sample is very viscous and difficult to pipette. How do I reduce the sample viscosity?

High sample viscosity after lysis is due to release of DNA from the nucleus. Sonication or addition of a nuclease such as the Pierce Universal Nuclease (Cat. No. 88700, 88701, or 88702) can be used to degrade DNA and reduce sample viscosity.

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How do I process yeast samples with EasyPep Mini MS Sample prep Kit?

Add 0.5 mm diameter glass beads to the sample pelleted in Easy Pep Lysis Solution and proceed as recommended in the Easy Pep sample prep protocol. Vortex vigorously for few minutes, spin at 16,000 x g for 5 mins, and extract the supernatant for protein assay and further downstream sample preparation.

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How do I process bacterial samples with EasyPep MS Sample Prep kits?

Add 1-2 µL of 50 mg/mL Lysozyme Solution (Cat. No. 90082) to 200 µL of the EasyPep lysis buffer provided in the kit and proceed with the sample prep. Add 200 µL of the prepared lysis solution to 5 X 10E8 bacterial cells (E. coli cells) (OD600 equal to 1, corresponding to 1 X 10E8 CFUs). Lyse by pipetting the sample repeatedly and centrifuge at 16,000 x g for 5 mins. Alternatively, E. coli cells can be lysed in lysis buffer using bead beating or sonication instead of lysozyme. After lysis, dilute samples to 1 mg/mL using lysis buffer, proceed with the EasyPep protocol for reduction, alkylation, digestion, and clean up as described in the product manual.

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Do you offer a mass spec sample prep method for low abundant proteins in samples?

High Select Top14 Abundant Protein Depletion Mini Spin columns (Cat. Nos. A36369, A36370) can be used to deplete top 14 abundant plasma/serum proteins. The depletion of highly abundant proteins from the sample enables the detection and identification of low abundant proteins. The depleted samples can be processed with EasyPep MS sample prep kit to generate digested plasma/serum samples. The clean digested samples can be processed by nanoLC-MS/MS analysis for discovery experiments or nanoLC-PRM/MS analysis for targeted experiments.

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At which step should I label my mass spec samples with TMT reagents?

TMT labeling can be performed after reduction, alkylation, digestion, or prior to cleanup, if the sample is buffered at appropriate pH (8-8.5) in a suitable buffer without primary amines (e.g., Tris, glycine). TMT labeling can also be performed after peptide clean-up. Labeling of peptides after clean-up enables measuring and normalizing of the peptide samples for equal mixing.

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