Second Strand cDNA Synthesis Kit
Second Strand cDNA Synthesis Kit
Invitrogen™

Second Strand cDNA Synthesis Kit

Das Invitrogen Zweitstrang-cDNA-Synthese-Kit wurde entwickelt, um doppelsträngige cDNA aus der Erststrang-Reaktion zu erzeugen, ohne dass Zwischenschritte mit organischer Extraktion oderWeitere Informationen
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KatalognummerAnzahl ReaktionenVector
A4857050 Reaktionen
A48571200 Reaktionen
Katalognummer A48570
Preis (EUR)
957,65
Exklusiv online
1.036,00
Ersparnis 78,35 (8%)
Each
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Anzahl Reaktionen:
50 Reaktionen
Preis (EUR)
957,65
Exklusiv online
1.036,00
Ersparnis 78,35 (8%)
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Das Invitrogen Zweitstrang-cDNA-Synthese-Kit wurde entwickelt, um doppelsträngige cDNA aus der Erststrang-Reaktion zu erzeugen, ohne dass Zwischenschritte mit organischer Extraktion oder Äthanolausfällung durchgeführt werden müssen.Das praktische Ein-Röhrchen-Format beschleunigt das Syntheseverfahren und maximiert die cDNA-Rückgewinnung.Das Kit enthält vorgemischte Komponenten, um die Anzahl der Pipettierschritte zu reduzieren, die für den Abschluss des Verfahrens erforderlich sind.

Merkmale des Zweitstrang-cDNA-Synthese Kits:
•Effiziente Synthese von doppelsträngigem cDNA in voller Länge
• Schnell — Verfahren in 1 Stunde abgeschlossen
• Praktisch — vorgemischte Komponenten
• Vollständig — enthält Abbaureagenzien für Rest-RNA

Anwendungen
• Zweisträngige cDNA-Synthese in voller Länge und mit stumpfem Ende für die Klonierung
• Doppelsträngige cDNA-Bibliothekskonstruktion

Specifications
EndprodukttypDoppelsträngige cDNA
Format50 Reaktionen
Anzahl Reaktionen50 Reaktionen
ProdukttypcDNA-Synthese-Kit
Menge50 reaction
ReaktionsformatSeparate Komponenten
Zur Verwendung mit (Anwendung)Klonierung
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Inhalt:
• Zweitstrang Enzymgemisch, 1 ml
• 5x Zweitstrang-Reaktionsgemisch, 250 µl
• 0,5 M EDTA, pH 8,0, 1 ml
• RNase I, 10 U/µl, 500 µl
• Wasser, Nuklease-frei, 3 x 1,25 ml

Lagerung: -15 bis -25 °C

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What is the correct reaction temperature that I should use for second strand cDNA synthesis using the Second Strand cDNA Synthesis Kit?

The second strand reaction must be incubated at 16 degrees C to prevent spurious synthesis by DNA polymerase I. At higher temperatures, DNA polymerase I tends to strand-displace rather than nick translate.

When using the Second Strand cDNA Synthesis Kit, what steps do I need to take to properly prepare the second strand reaction mixture?

Dilute the first-strand reaction as outlined in the manual (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0019413_SecondStrandcDNASynthesisKit_UG.pdf) on page 2 under Second Strand cDNA Synthesis step. Failure to properly dilute the first-strand reaction changes the pH of the second strand reaction and influences the activity of the 3'-5' and 5'-3' exonuclease activities of DNA polymerase I.

When using the Second Strand cDNA Synthesis Kit, how can I avoid incomplete RT inactivation?

Always perform the RT inactivation step after first-strand cDNA synthesis.

I am getting low yield of second strand cDNA product using the Second Strand cDNA Synthesis Kit. What is the reason?

The main reasons are incomplete RT inactivation, improper preparation of the second strand reaction mixture, and incorrect reaction temperature.