Second Strand cDNA Synthesis Kit

Name: Second Strand cDNA Synthesis Kit
SKU: A48571

El kit de síntesis de segunda cadena del ADNc Invitrogen está diseñado para producir ADNc bicatenario a partir de laMás información

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Número de catálogo	N.º de reacciones	Vector
A48571	200 reacciones
A48570	50 reacciones

2 opciones

Número de catálogo A48571

Precio (MXN)

N.º de reacciones:

200 reacciones

El kit de síntesis de segunda cadena del ADNc Invitrogen está diseñado para producir ADNc bicatenario a partir de la reacción de la primera cadena sin necesidad de realizar pasos intermedios de extracción orgánica ni de precipitación de etanol.El cómodo formato de un solo tubo acelera el procedimiento de síntesis y maximiza la recuperación del ADNc.El kit contiene componentes mezclados previamente para reducir el número de pasos de pipeteo necesarios para completar el procedimiento.

Entre las características del kit de síntesis de segunda cadena del ADNc se incluyen:
•Síntesis eficaz de ADNc bicatenario completo
• Rápido: el proceso se completa en menos de 1 hora
• Práctico: componentes mezclados previamente
• Completo: incluye todos los reactivos de eliminación de ARN residual

Aplicaciones
• Síntesis de ADNc para clonación de extremo romo, bicatenario y de longitud completa
• Construcción de bibliotecas de ADNc bicatenario

Especificaciones

Tipo de producto finalADNc bicatenario

FormatoKit

N.º de reacciones200 reacciones

Tipo de productoKit de síntesis de ADNc

Cantidad200 reactions

Formato de reacciónComponentes separados

Para utilizar con (aplicación)Clonación

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Contenido:
• Mezcla de enzimas de doble cadena, 4 x 1 ml
• Mezcla de reacción de doble cadena 5X, 4 x 250 µl
• 0,5 M EDTA, pH 8,0, 4 x 1 ml
• ARNasa I, 10 U/µl, 4 x 500 µl
• Agua, sin nucleasas, 12 x 1,25 ml

Almacenamiento: De -15 a -25 °C

Preguntas frecuentes

What is the correct reaction temperature that I should use for second strand cDNA synthesis using the Second Strand cDNA Synthesis Kit?

The second strand reaction must be incubated at 16 degrees C to prevent spurious synthesis by DNA polymerase I. At higher temperatures, DNA polymerase I tends to strand-displace rather than nick translate.

When using the Second Strand cDNA Synthesis Kit, what steps do I need to take to properly prepare the second strand reaction mixture?

Dilute the first-strand reaction as outlined in the manual (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0019413_SecondStrandcDNASynthesisKit_UG.pdf) on page 2 under Second Strand cDNA Synthesis step. Failure to properly dilute the first-strand reaction changes the pH of the second strand reaction and influences the activity of the 3'-5' and 5'-3' exonuclease activities of DNA polymerase I.

When using the Second Strand cDNA Synthesis Kit, how can I avoid incomplete RT inactivation?

Always perform the RT inactivation step after first-strand cDNA synthesis.

I am getting low yield of second strand cDNA product using the Second Strand cDNA Synthesis Kit. What is the reason?

The main reasons are incomplete RT inactivation, improper preparation of the second strand reaction mixture, and incorrect reaction temperature.