RiboPure™ RNA Purification Kit, blood

Numéro de catalogue:  AM1928

Invitrogen™  Applications liées: RNA Extraction

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Description

Le kit RiboPure™-Blood est destiné à l’isolement d’ARN de haute qualité directement à partir de sang total. Le kit combine deux méthodes de purification d’ARN pour éliminer efficacement les composants sanguins (protéines, hème, ADN génomique et RNases) qui peuvent compromettre les procédures en aval. Le kit inclut suffisamment de réactifs pour 40 purifications d’ARN à partir d’échantillons de sang total de 0,3 à 0,5 ml chacun. Avantages du kit RiboPure™-Blood :

• Purifie l’ARN total directement à partir de sang total, sans récupération préalable des globules blancs.
• Procédure simple et rapide : du sang à l’ARN en moins de 30 minutes
• Comprend la solution RNAlater® : stockez les échantillons sanguins pour 3 jours ou plus à température ambiante
• Comprend des réactifs d’ADN DNA-free™ pour préparer l’ARN pour la PCR en temps réel et pour l’analyse de grille

Applications
Le kit RiboPure™-Blood offre des rendements élevés d’ARN pur directement à partir de sang total, éliminant le besoin d’isoler les globules blancs avant la purification d’ARN. L’ARN récupéré à l’aide du kit RiboPure™-Blood peut être utilisé dans les applications les plus difficiles, notamment la PCR en temps réel et l’analyse de grille. Les rendements d’ARN moyens se situent entre 2 et 4 µg/0,5 ml de sang total (la variation est due aux différentes quantités de globules blancs d’un échantillon à l’autre).

Stabilisez l’ARN dans du sang total
Lorsque vous prélevez des échantillons de sang pour l’analyse d’ARN, il est souvent nécessaire de stocker les échantillons avant d’isoler l’ARN. Le kit RiboPure™-Blood contient la solution RNAlater® pour la stabilisation de l’ARN dans le sang total. Il permet également de “geler” le profil de l’expression génétique des cellules. Les échantillons traités peuvent être stockés en toute sécurité à température ambiante pour des périodes plus longues (jusqu’à trois jours ou plus). Les échantillons sanguins stockés dans la solution RNAlater® produisent de l’ARN dont la qualité est comparable à celle des échantillons sanguins traités directement (voir figure).

Procédure simple qui produit de l’ARN haute pureté
La procédure RiboPure™-Blood consiste en trois étapes : 1) ajout de solution de lyse directement au sang total soit traité à la solution RNAlater®, soit frais, 2) purification initiale de l’ARN par extraction de phénol /chloroforme, et 3) purification finale de l’ARN sur un filtre en fibre de verre. Un traitement complémentaire de la DNase peut ensuite être effectué avec les réactifs DNA-free™ inclus dans le kit. L’ensemble de la procédure, y compris le traitement de la DNase, peut être exécuté en moins d’une heure.

Produits accessoires
L’ARN peut ensuite être enrichi pour l’ARNm des globules blancs à l’aide de nos kits GLOBINclear™ afin d’éliminer de façon sélective les produits de la transcription de globine. Le kit d’isolement d’ARN de souris RiboPure™-Blood (No de catalogue AM0951) est également disponible pour la récupération d’ARN total, et éventuellement de micro-ARN, directement à partir de sang de souris ou de rat. RiboPure™-Blood souris inclut des tubes à échantillons pré-chargés de la solution RNAlater® afin d’empêcher la détérioration de l’ARN et de préserver les profils d’ARN.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Spécifications

Sample Type (General): Blood
High Throughput Compatibility: Not High Throughput-Compatible (Manual)
Downstream Application: Microarray Analysis, Northern Blotting, Real-Time Quantitative PCR (qPCR), Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR)
Final Product: Total RNA
Isolation Technology: Organic Extraction, Spin Column
Product Line: Ambion™, RiboPure™
Product Size: 40 preps
Starting Material (Amount): Up to 0.5 ml whole blood
Yield (up to): 4 µg

Contenu et stockage

• 25 ml Elution Solution (4°C)
• 40 ml Lysis Solution (4°C)
• 25 ml Acid-Phenol:Chloroform (4°C)
• 5 ml Sodium Acetate Solution (4°C)
• 35 ml Wash Solution 1 (room temperature/4°C)
• 70 ml Wash 2/3 Concentrate (room temperature/4°C)
• 100 ml RNAlater® Solution (room temperature)
• 40 Filter Cartridges (room temperature)
• 80 Collecion Tubes (room temperature)
• 100 µl DNase I, 8 U/µl (-20°C, frost-free)
• 850 µl 20X DNase Buffer (-20°C)
• 1.2 ml DNase Inactivation Reagent (-20°C)
• 1 ml Formaldehyde Load Dye (-20°C)

This kit contains enough reagents for 40 RNA isolation from 300–500 µl whole blood.

Documents

Manuels et protocoles

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