ADNasa I (sin ARNasa) Ambion™

ADNasa I Ambio (sin ARNasa) (E.C. 3.1.21.1) es una endonucleasa no específica que degrada el ADN mono y bicatenario y la cromatina. Hidroliza los enlaces de fosfodiéster, lo que produce mono y oligonucleóticos con un grupo 5'-fosfato y 3'-hidroxilo. Desoxirribonucleasa (ADNasa) I sin ribonucleasa (ARNasa) tiene la más alta pureza disponible y se recomienda para degradar el ADN en presencia de ARN cuando la ausencia de RNasa es fundamental para mantener la integridad del ARN. Por ejemplo, la ADNasa I se utiliza con frecuencia para eliminar ADN templado después de la transcripción in vitro, y para eliminar el ADN contaminante de preparaciones de ARN total (en especial las de células transfectadas que pueden contener ADN plasmídico). Además, se utiliza para ensayos de protección de ribonucleasas, contracción de bibliotecas de ADN copia (cADN) y RT-PCR. La ADNasa I requiere cationes bivalentes (Mg²⁺ y Ca²⁺ a aproximadamente 5 mM y 0,5 mM, respectivamente) para una capacidad máxima. Tiene un pH óptimo de 7,8.

ADNasa I sin ARNasa supera a la competencia
Un informe de investigación en BioTechniques (Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002) comparaba la contaminación por ARNasa en preparaciones de ADNasa I de Sigma, Roche, Applied Science, Qiagen y Ambion. Los resultados revelaron que “... a excepción de la ADNasa sin ARNasa de Ambion™, la integridad en ARNc en las reacciones de transcripción in vitro se veía comprometida y seguía contaminada con ADN. La ADNasa de Ambion™ se utilizaba para el resto de experimentos que requerían la digestión de ADN...”. La ADNasa de Ambion™ se utiliza para buscar ARNasa contaminante y actividad de proteasas. La funcionalidad se determina por la digestión del ADN genómico humano seguida de PCR cuantitativa en tiempo real para detectar ADN sin digerir.

Definición de unidad
Una unidad es la cantidad de enzima necesaria para degradar completamente 1 µg de ADN en 10 min a 37 °C. Equivalente a 0,04 unidades Kunitz.

Productos adicionales
Si busca una alternativa a la ADNasa I bovina, puede utilizar la ADNasa recombinante (n.º N.º AM2235). Si busca una ADNasa más activa y tolerante a la sal, consulte los productos de ADNasa TURBO™ (n.º de cat. AM2239 y AM2238).