Coprecipitante GlycoBlue™ (15 mg/ml)

El coprecipitante GlycoBlue consta de un colorante azul unido covalentemente a glucógeno, un carbohidrato de cadena ramificada, que es útil como coprecipitante de ácido nucleico. El colorante fijado aumenta la visibilidad del sedimento. Este producto es un coprecipitante ideal en ensayos de protección de nucleasas con una dilución de 1/100 de la solución madre.

Características del coprecipitante GlycoBlue:
• Ideal para RT-PCR
• Aumenta la masa y visibilidad de sedimentos
• Recuperación cuantitativa de concentraciones bajas (ng/ml) de ácido nucleico
• Evita la pérdida de sedimentos en ensayos de protección de nucleasas

¿Qué es un coprecipitante?
Los coprecipitantes son sustancias inertes que se utilizan como ayuda en la recuperación de ácidos nucleicos durante las precipitaciones de alcohol. Si bien pueden utilizarse para precipitar grandes cantidades de ácidos nucleicos, resultan esenciales para la recuperación cuantitativa de pequeñas cantidades de ácidos nucleicos en soluciones diluidas. A menudo, se prefiere la utilización de estas moléculas simplemente por la visualización del precipitado sedimentado tras la centrifugación.

Se puede añadir un coprecipitante GlycoBlue a soluciones de ácidos nucleicos a una concentración final de 50 a 150 µg/ml. Cuando se realice una precipitación típica de alcohol/acetato, el coprecipitante GlycoBlue precipitará con los ácidos nucleicos, lo que facilitará una buena recuperación de ADN o ARN, al mismo tiempo que se aumentará el tamaño y la visibilidad de los sedimentos. Dado que el glucógeno no contiene cantidades apreciables de ácidos nucleicos, a menudo es preferible al ARN de levadura como coprecipitante, especialmente en aplicaciones en las que se está evaluando la masa de ácido nucleico o en las que el ácido nucleico añadido podría interferir o competir con posteriores reacciones enzimáticas.

El glucógeno utilizado se aísla del hígado de conejo, una fuente biológica, como se hace con la mayoría del resto de preparaciones de este coprecipitante. El glucógeno se trata con proteinasa K y SDS para eliminar cualquier nucleasa contaminante y, a continuación, se aplica una extracción de fenol/cloroformo, se precipita con etanol y se resuspende en agua libre de nucleasas. El glucógeno incluye una garantía de ausencia de ARNasa y ADNasa.