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Invitrogen™
Kit de proliferación celular Click-iT™ EdU para adquisición de imágenes, colorante Alexa Fluor™ 647
El kit de proliferación celular Click-iT EdU para adquisición de imágenes es una excelente alternativa a los tradicionales ensayos deMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| C10340 | 1 kit |
Número de catálogo C10340
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 kit
El kit de proliferación celular Click-iT EdU para adquisición de imágenes es una excelente alternativa a los tradicionales ensayos de proliferación que se ha optimizado para aplicaciones de microscopía de fluorescencia. En este ensayo, el análogo a la timidina modificado EdU se incorpora de forma eficaz al ADN recién sintetizado y etiquetado con fluorescencia mediante un colorante brillante y fotoestable Alexa Fluor™ en una reacción clic rápida y muy específica. Este etiquetado fluorescente de las células proliferantes es preciso y compatible con métodos de anticuerpos gracias al protocolo clic leve.
• Simple: funciona la primera vez, cada vez, en menos tiempo
• Eficaz: no es necesario realizar pasos de desnaturalización o tratamientos intensos
• Resultados ricos en contenido: mejor preservación de la morfología celular, la estructura del antígeno y la integridad del ADN
• Coherente: no depende de lotes de anticuerpos variables para la detección
Los métodos de detección de proliferación más exactos se basan en la incorporación y la medición de los análogos nucleósidos en ADN recién sintetizado con bromodesoxiuridina (BrdU), un análogo utilizado con frecuencia. El ADN etiquetado mediante BrdU se cuantifica mediante anticuerpos anti-BrdU tras la desnaturalización del ADN a través de métodos intensos (HCl, calor o enzimas) para exponer las moléculas de BrdU. Este paso tiene una larga duración y resulta difícil de llevar a cabo de manera uniforme. El tratamiento intenso también puede afectar negativamente a la calidad y la integridad de la muestra, lo que hace que la cotinción con otros anticuerpos resulte complicada.
Metodología de proliferación mejorada
El kit de proliferación celular Click-iT EdU para adquisición de imágenes ofrece una alternativa mejor a los ensayos de BrdU para medir la proliferación celular. EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina) es un nucleósido análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. Gracias a Click-iT™ EdU, basta con una permeabilización con detergente y una fijación suave para que el reactivo de detección Click-iT™ EdU basado en moléculas pequeñas obtenga acceso al ADN. Como consecuencia, el kit de adquisición de imágenes Click-iT™ EdU no solo es fácil de usar, sino que también es más exacto y compatible con el análisis del ciclo celular y otros objetivos extracelulares o intracelulares verdaderamente ricos en contenido y resultados.
Este kit está optimizado para aplicaciones de microscopía de fluorescencia; visite el área de tecnología de Click-iT™ de nuestro sitio web para acceder a kits diseñados para adquisición de imágenes de alto contenido, microplacas de fluorescencia o plataformas de citometría de flujo.
Obtenga más información sobre la tecnología Click-iT >
Busque más herramientas para la detección basada en imágenes de células proliferantes >
Notas:
El ensayo Click-iT™ puede emplearse en células en cultivo o in vivo siguiendo la administración de EdU a través de métodos de alimentación o inyección.
El ensayo Click-iT™ puede emplearse con BrdU en experimentos de pulso doble mediante el anticuerpo anti-BrdU (clon MoBu-1), que no presenta una reacción cruzada con EdU.
La tecnología Click-iT™ es compatible con inmunohistoquímica, inmunocitoquímica y colorantes fluorescentes que presentan tolerancia ante la fijación o se han diseñado para el etiquetado celular fijo.
• Simple: funciona la primera vez, cada vez, en menos tiempo
• Eficaz: no es necesario realizar pasos de desnaturalización o tratamientos intensos
• Resultados ricos en contenido: mejor preservación de la morfología celular, la estructura del antígeno y la integridad del ADN
• Coherente: no depende de lotes de anticuerpos variables para la detección
Los métodos de detección de proliferación más exactos se basan en la incorporación y la medición de los análogos nucleósidos en ADN recién sintetizado con bromodesoxiuridina (BrdU), un análogo utilizado con frecuencia. El ADN etiquetado mediante BrdU se cuantifica mediante anticuerpos anti-BrdU tras la desnaturalización del ADN a través de métodos intensos (HCl, calor o enzimas) para exponer las moléculas de BrdU. Este paso tiene una larga duración y resulta difícil de llevar a cabo de manera uniforme. El tratamiento intenso también puede afectar negativamente a la calidad y la integridad de la muestra, lo que hace que la cotinción con otros anticuerpos resulte complicada.
Metodología de proliferación mejorada
El kit de proliferación celular Click-iT EdU para adquisición de imágenes ofrece una alternativa mejor a los ensayos de BrdU para medir la proliferación celular. EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina) es un nucleósido análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. Gracias a Click-iT™ EdU, basta con una permeabilización con detergente y una fijación suave para que el reactivo de detección Click-iT™ EdU basado en moléculas pequeñas obtenga acceso al ADN. Como consecuencia, el kit de adquisición de imágenes Click-iT™ EdU no solo es fácil de usar, sino que también es más exacto y compatible con el análisis del ciclo celular y otros objetivos extracelulares o intracelulares verdaderamente ricos en contenido y resultados.
Este kit está optimizado para aplicaciones de microscopía de fluorescencia; visite el área de tecnología de Click-iT™ de nuestro sitio web para acceder a kits diseñados para adquisición de imágenes de alto contenido, microplacas de fluorescencia o plataformas de citometría de flujo.
Obtenga más información sobre la tecnología Click-iT >
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Notas:
El ensayo Click-iT™ puede emplearse en células en cultivo o in vivo siguiendo la administración de EdU a través de métodos de alimentación o inyección.
El ensayo Click-iT™ puede emplearse con BrdU en experimentos de pulso doble mediante el anticuerpo anti-BrdU (clon MoBu-1), que no presenta una reacción cruzada con EdU.
La tecnología Click-iT™ es compatible con inmunohistoquímica, inmunocitoquímica y colorantes fluorescentes que presentan tolerancia ante la fijación o se han diseñado para el etiquetado celular fijo.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteAlexa Fluor™ 647
FormatoPortaobjetos
Características ecológicasMenos peligroso
Cantidad1 kit
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
ColorRojo lejano
EmissionIR cercano
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de proliferación
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, Microscopio de fluorescencia
Línea de productosAlexa Fluor, Click-iT, Molecular Probes
Tipo de productoKit de proliferación celular
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit contiene material suficiente para 50 cubreobjetos de 18 x 18. Almacenar entre 2 °C y 6 °C, desecar y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
I will be performing a cell proliferation assay using Click-iT EdU kit. At what point can I stop overnight, or do I have to perform all the steps continuously?
A control for a Click-iT EdU labeling experiment uses no EdU and the Click-iT reaction using Alexa Fluor 594 azide. The mouse heart tissue sections are showing non-specific labeling in red, seen in particular clusters of cells. They don't overlap with DAPI. What is the problem?
I have run out of the Alexa Fluor 647 Azide from the Click-iT EdU Cell Proliferation Kit for Imaging, Alexa Fluor 647 dye (Cat. No. C10340). Is it possible to purchase it separately? How would I combine the standalone reagent with the kit?
Can I combine Click-iT or Click-iT Plus reactions with phalloidin conjugates used for actin staining?
Are the Alexa Fluor azides from Click-iT EdU kits available separately?
Citations & References (20)
Citations & References
Abstract
The tumor suppressor Apc controls planar cell polarities central to gut homeostasis.
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:22851318
'The stem cells (SCs) at the bottom of intestinal crypts tightly contact niche-supporting cells and fuel the extraordinary tissue renewal of intestinal epithelia. Their fate is regulated stochastically by populational asymmetry, yet whether asymmetrical fate as a mode of SC division is relevant and whether the SC niche contains committed
APC/C-CCS52A complexes control meristem maintenance in the Arabidopsis root.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:19553203
'Plant organs originate from meristems where stem cells are maintained to produce continuously daughter cells that are the source of different cell types. The cell cycle switch gene CCS52A, a substrate specific activator of the anaphase promoting complex/cyclosome (APC/C), controls the mitotic arrest and the transition of mitotic cycles to
Dynamic temporal requirement of Wnt1 in midbrain dopamine neuron development.
Journal:Development
PubMed ID:23444360
'Wnt1-expressing progenitors generate midbrain dopamine (MbDA) and cerebellum (Cb) neurons in distinct temporal windows and from spatially discrete progenitor domains. It has been shown that Wnt1 and Lmx1a participate in a cross-regulatory loop that is utilized during MbDA neuron development. However, Wnt1 expression dynamically changes over time and precedes that
The human GINS complex associates with Cdc45 and MCM and is essential for DNA replication.
Journal:Nucleic Acids Res
PubMed ID:19223333
'The GINS complex, originally discovered in Saccharomyces cerevisiae and Xenopus laevis, binds to DNA replication origins shortly before the onset of S phase and travels with the replication forks after initiation. In this study we present a detailed characterization of the human GINS (hGINS) homolog. Using new antibodies that allow
Paper-supported 3D cell culture for tissue-based bioassays.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:19846768
Fundamental investigations of human biology, and the development of therapeutics, commonly rely on 2D cell-culture systems that do not accurately recapitulate the structure, function, or physiology of living tissues. Systems for 3D cultures exist but do not replicate the spatial distributions of oxygen, metabolites, and signaling molecules found in tissues.