Kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488
Kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488
Invitrogen™

Kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488

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El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 proporciona un método rápido, sensible yMás información
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Número de catálogoCantidad
C104561 kit
Número de catálogo C10456
Precio (MXN)
21,502.13
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Cantidad:
1 kit
Precio (MXN)
21,502.13
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El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 proporciona un método rápido, sensible y no radiactivo para la detección de síntesis de proteínas mediante microscopía de fluorescencia u obtención de imágenes de alto contenido. En este ensayo, la puromicina o-propargil (OPP) se incorpora de forma eficaz a las proteínas recién traducidas en medios completos que contienen metionina y se etiqueta con fluorescencia con un tinte Alexa Fluor™ brillante y fotoestable en una reacción de clic rápida, altamente específica y leve.

Las características del kit incluyen:

• No requiere ningún cambio de medios: funciona en medios completos que contienen metionina, no es necesario eliminar medios celulares
• Compatible con multiplex: la tecnología Click-iT™ Plus retiene la señal de GFP y la unión de faloidinas conjugadas con fluorescencia
• No radiactivo: una alternativa a los métodos tradicionales de 35S-metionina
• Funciona in vivo: los resultados publicados demuestran la utilidad in vivo para la determinación de la traducción de proteínas

El kit contiene o-propargil-puromicina (OPP), un alquino análogo de puromicina (también disponible por separado), así como azida picolil Alexa Fluor™ 488 y todos los reactivos necesarios para realizar la reacción clic. La OPP se usar para alimentar a células cultivadas y se incorpora a proteínas durante la síntesis de proteínas activas. Al añadir azida picolil Alexa Fluor™ 488 y los reactivos de reacción clic se genera un vínculo quimioselectivo, o reacción «clic», entre el colorante azida picolil y el alquino OPP, lo que permite que las proteínas modificadas se detecten mediante el análisis basado en imágenes.

La reacción clic utiliza porciones biortogonales (biológicamente únicas) para etiquetar de manera fluorescente las células proliferantes, lo que ayuda a que los niveles de fondo sean bajos y la sensibilidad de detección muy alta. Debido a las condiciones de reacción leves, los ensayos Click-iT™ Plus detectan los eventos de traducción de proteínas al tiempo que permiten la preservación de la morfología celular, la unión de la flaloidina etiquetada con fluorescencia y la señal fluorescente de GFP.

A diferencia de la 35S-metionina, utilizada en métodos tradicionales, la OPP no es un aminoácido análogo, por lo que puede añadirse directamente a las células en medios completos o utilizarse para determinar la síntesis de proteínas in vivo.

El kit contiene todos los componentes necesarios para etiquetar y detectar la OPP incorporada en proteínas recién traducidas en muestras de células adherentes. El kit incluye reactivos suficientes para etiquetar 25 cubreobjetos 18 mm × 18 mm usando 1 ml de tampón de reacción por prueba.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Características ecológicasMenos peligroso
Línea de productosClick-iT
Tipo de productoKit de ensayo de síntesis de proteínas
Cantidad1 kit
Tipo de reactivoReactivo de etiquetado de proteínas nacientes
Etiqueta o tinteAlexa Fluor 488
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Este kit contiene: Reactivo Click-iT™ OPP, colorante de ácido pinacólico Alexa Fluor™, tampón de reacción Click-iT™ OPP, protector de cobre, aditivo de tampón de reacción Click-iT™, tampón de aumento de reacción Click-iT™ y tinción NuclearMask™ Blue.

Preguntas frecuentes

I will be performing a cell proliferation assay using Click-iT EdU kit. At what point can I stop overnight, or do I have to perform all the steps continuously?

One may store the sample after fixation overnight in PBS at 4oC. For longer storage (<1 week) , store in buffer with 1-2% formaldehyde or in formalin to limit microbial growth. If you use sodium azide as a microbial inhibitor, it must be completely removed prior to the Click-iT reaction.

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Citations & References (8)

Citations & References
Abstract
Transcriptome analysis of a CHO cell line expressing a recombinant therapeutic protein treated with inducers of protein expression.
Authors:Fomina-Yadlin D, Mujacic M, Maggiora K, Quesnell G, Saleem R, McGrew JT,
Journal:
PubMed ID:26325199
'The search for specific productivity (qP) determinants in Chinese hamster ovary (CHO) cells has been the focus of the biopharmaceutical cell line engineering efforts aimed at creating ' ... More
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Journal:
PubMed ID:26319900
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Journal:Mol Cell Proteomics
PubMed ID:27053602
'To study nucleolar involvement in brain development, the nuclear and nucleolar proteomes from the rat cerebral cortex at postnatal day 7 were analyzed using LC-MS/iTRAQ methodology. Data of the analysis are available via ProteomeXchange with identifier PXD002188. Among 504 candidate nucleolar proteins, the overrepresented gene ontology terms included such cellular ... More
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Journal:Gene
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Journal:J Biol Chem
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