CellLight™ Actin-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Actin-GFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Actin-GFP, BacMam 2.0

CellLight™ Actin-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar actina con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidadObjetivo
C105821 vialActina, citoesqueleto
Número de catálogo C10582
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
Objetivo:
Actina, citoesqueleto
CellLight™ Actin-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar actina con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células mediante tecnología BacMam 2.0. y expresa la GFP fusionada a la actina humana casi sin citotoxicidad. Estudie la acción dinámica de los filamentos de actina en células vivas y multiplex mediante otras proteínas fluorescentes o tintes orgánicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Actin-GFP, BacMam 2.0, es una construcción fusionada de actina humana y emGFP que se dirige de forma precisa y específica a la actina celular-GFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteGFP (EmGFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación488⁄510
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
ObjetivoActina, citoesqueleto
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoActina
SubCellular LocalizationActina, citoesqueleto, Cytoskeleton
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (18)

Citations & References
Abstract
CapZ and actin capping dynamics increase in myocytes after a bout of exercise and abates in hours after stimulation ends.
Authors:Lin YH, Li J, Swanson ER, Russell B,
Journal:J Appl Physiol (1985)
PubMed ID:23493359
'The time course of the response and recovery after acute activity seen in exercise is not well understood. The goal of this work is to address how proteins of the thin filament (actin and its capping protein CapZ) are changed by 1 h of mechanical stimulation and return to baseline ... More
Stress fibers stabilize the position of intranuclear DNA through mechanical connection with the nucleus in vascular smooth muscle cells.
Authors:Nagayama K, Yahiro Y, Matsumoto T,
Journal:FEBS Lett
PubMed ID:22094165
Actin stress fibers (SFs) running across the top surface of the nucleus in vascular smooth muscle cells were dissected using laser nano-dissection technique to release its pretension, and the dynamic behavior of SFs, nucleus, and intranuclear DNA were investigated. SFs shortened across the top surface of the nuclei after their ... More
Human disease locus discovery and mapping to molecular pathways through phylogenetic profiling.
Authors:Tabach Y, Golan T, Hernández-Hernández A, Messer AR, Fukuda T, Kouznetsova A, Liu JG, Lilienthal I, Levy C, Ruvkun G,
Journal:
PubMed ID:24084807
Genes with common profiles of the presence and absence in disparate genomes tend to function in the same pathway. By mapping all human genes into about 1000 clusters of genes with similar patterns of conservation across eukaryotic phylogeny, we determined that sets of genes associated with particular diseases have similar ... More
Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate regulates CapZß1 and actin dynamics in response to mechanical strain.
Authors:Li J, Russell B,
Journal:
PubMed ID:24043251
Mechanical stress causes filament remodeling leading to myocyte hypertrophy and heart failure. The actin capping protein Z (CapZ) tightly binds to the barbed end of actin filaments, thus regulating actin assembly. The hypothesis is that the binding between CapZ and the actin filament is modulated through phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) and ... More
Evaluation of nanoparticle uptake in co-culture cancer models.
Authors:Costa EC, Gaspar VM, Marques JG, Coutinho P, Correia IJ,
Journal:
PubMed ID:23922909
Co-culture models are currently bridging the gap between classical cultures and in vivo animal models. Exploring this novel approach unlocks the possibility to mimic the tumor microenvironment in vitro, through the establishment of cancer-stroma synergistic interactions. Notably, these organotypic models offer a perfect platform for the development and pre-clinical evaluation ... More