CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0 bietet eine einfache Methode zur Markierung später Endosome in lebenden Zellen mit rot fluoreszierendem ProteinWeitere Informationen
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CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0 bietet eine einfache Methode zur Markierung später Endosome in lebenden Zellen mit rot fluoreszierendem Protein (RFP). Geben Sie das Reagenz einfach zu Ihren Zellen, inkubieren Sie über Nacht, und am nächsten Morgen sind die Zellen bereit für die Analyse.

Sie möchten andere Zellstrukturen markieren? Erfahren Sie mehr über CellLight™ fluoreszierende Proteinmarkierungswerkzeuge

Dieses gebrauchsfertige Konstrukt wird mithilfe der BacMam 2.0-Technologie in Zellen transfiziert, wo es mit Rab7a fusioniertes RFP exprimiert. Sie können das Verhalten von RFP später Endosomen in lebenden Zellen unabhängig vom pH-Wert der Organelle beobachten und mit mehreren Tracking- oder Tracing-Farbstoffen beschriften, um dynamische zelluläre Prozesse abzubilden.

Zellen, die CellLight™ Konstrukte exprimieren, können auch mit Formaldehyd für die Multiplex-Bildgebung mit immunzytochemischen Verfahren fixiert werden.

CellLight™ Technologie ist:
Schnell und praktisch: Einfach CellLight™ Reagenz in Ihre Zellen geben, über Nacht inkubieren und bildgebendes Verfahren nutzen — oder gefrorene, assay-fähige Zellen für den späteren Gebrauch lagern
Hocheffizient: Bis zu 90 % Transduktion einer Vielzahl von Säugetierzelllinien, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und Neuronen
Flexibel: Ko-transduzieren Sie von mehr als einem BacMam Reagenz für Multiplex-Experimente oder Co-Lokalisationsstudien; strenge Kontrolle der Expressionsniveaus durch einfaches Variieren der Dosis
Weniger toxisch: CellLight Reagenzien™ sind nicht-replizierend in Säugetierzellen und eignen sich für die Handhabung auf Biosicherheitsstufe (BSL) 1

von BacMam Technology

CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0, ist ein Fusionskonstrukt aus Rab7a und TagRFP, das genaues und spezifisches Targeting für zelluläres RFP später Endosomer bietet. Dieses Verschmelzungskonstrukt ist im Insektenvirus Baculovirus verpackt, das in menschlichen Zellen nicht repliziert wird und in den meisten Labors als sicher für Bioschutzstufe (BSL) 1 ausgewiesen ist. Die BacMam Technologie sorgt dafür, dass die meisten Säugetierzelltypen mit hoher Effizienz und minimaler Toxizität transduziert, bzw. transfiziert werden. Diese transiente Transfektion kann nach einer über Nacht erfolgten Inkubation bis zu fünf Tage lang nachgewiesen werden – genügend Zeit für die meisten dynamischen Zellanalysen. Wie jede Transfektions-/Transduktionstechnik transfiziert/transduziert die BacMam Methode nicht alle Zellen mit der gleichen Effizienz, wodurch sie für Zellpopulationsuntersuchungen oder automatisierte Bildgebung/Zellzählung schlecht geeignet ist. CellLight™ Reagenzien sind ideal für Experimente geeignet, bei denen eine zelluläre oder subzelluläre Co-Lokalisierung erforderlich ist, oder für Zellfunktionsuntersuchungen, die eine spezielle Auflösung benötigen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
FarbeRot-Orange
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypRFP (TagRFP)
EmissionSichtbar
Zur Verwendung mit (Geräte)Fluoreszenzmikroskop, Durchflusszytometer
FormFlüssig
ProduktlinieCellLight, Molecular Probes
Menge1 Fläschchen
VersandbedingungNasseis
ZielfunktionEndozytose
VerfahrenFluoreszenzintensitätsmessung
MarkertypFluoreszenzprotein
ProdukttypEndosome
SubCellular LocalizationEndosome
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei 2-6 °C lagern, vor Licht schützen. Nicht einfrieren.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Zitierungen und Referenzen (11)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
A Rab11a-enriched subapical membrane compartment regulates a cytoskeleton-dependent transcytotic pathway in secretory epithelial cells of the lacrimal gland.
Authors:Xu S, Edman M, Kothawala MS, Sun G, Chiang L, Mircheff A, Zhu L, Okamoto C, Hamm-Alvarez S,
Journal:J Cell Sci
PubMed ID:21984810
'Despite observations that the lacrimal gland has been identified as the principal source of dimeric immunoglobulin A (dIgA) in tears, the mechanism used by lacrimal gland acinar cells (LGACs) to transcytose dIgA produced by interstitial plasma cells is not well-characterized. This study identifies a transcytotic pathway in LGACs regulated by ... More
Deletion of lipoprotein PG0717 in Porphyromonas gingivalis W83 reduces gingipain activity and alters trafficking in and response by host cells.
Authors:Reyes L, Eiler-McManis E, Rodrigues PH, Chadda AS, Wallet SM, Bélanger M, Barrett AG, Alvarez S, Akin D, Dunn WA, Progulske-Fox A,
Journal:
PubMed ID:24069284
'P. gingivalis (Pg), a causative agent of chronic generalized periodontitis, has been implicated in promoting cardiovascular disease. Expression of lipoprotein gene PG0717 of Pg strain W83 was found to be transiently upregulated during invasion of human coronary artery endothelial cells (HCAEC), suggesting this protein may be involved in virulence. We ... More
Improving drug potency and efficacy by nanocarrier-mediated subcellular targeting.
Authors:Murakami M, Cabral H, Matsumoto Y, Wu S, Kano MR, Yamori T, Nishiyama N, Kataoka K,
Journal:Sci Transl Med
PubMed ID:21209412
'Nanocarrier-mediated drug targeting is an emerging strategy for cancer therapy and is being used, for example, with chemotherapeutic agents for ovarian cancer. Nanocarriers are selectively accumulated in tumors as a result of their enhanced permeability and retention of macromolecules, thereby enhancing the antitumor activity of the nanocarrier-associated drugs. We investigated ... More
Baculovirus-mediated gene transfer into mammalian cells.
Authors:Boyce FM, Bucher NL,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:8637876
This paper describes the use of the baculovirus Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) as a vector for gene delivery into mammalian cells. A modified AcMNPV virus was prepared that carried the Escherichia coli lacZ reporter gene under control of the Rous sarcoma virus promoter and mammalian RNA processing ... More
BacMam technology and its application to drug discovery.
Authors:Ames RS, Kost TA, Condreay JP,
Journal:Expert Opin Drug Discov
PubMed ID:23488908
The recombinant baculovirus/insect cell system was firmly established as a leading method for recombinant protein production when a new potential use for these viruses was revealed in 1995. It was reported that engineered recombinant baculoviruses could deliver functional expression cassettes to mammalian cell types; a system which has come to ... More