CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0, bietet eine einfache Möglichkeit, Golgi in lebenden Zellen mit rot fluoreszierendem Protein (RFP) zu kennzeichnen. GebenWeitere Informationen
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C105931 Röhrchen
Katalognummer C10593
Preis (EUR)
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CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0, bietet eine einfache Möglichkeit, Golgi in lebenden Zellen mit rot fluoreszierendem Protein (RFP) zu kennzeichnen. Geben Sie das Reagenz einfach zu Ihren Zellen, inkubieren Sie über Nacht, und am nächsten Morgen sind die Zellen bereit für die Analyse.

Sie möchten andere Zellstrukturen markieren? Erfahren Sie mehr über CellLight™ fluoreszierende Proteinmarkierungswerkzeuge

Dieses gebrauchsfertige Konstrukt wird mithilfe der BacMam 2.0-Technologie in Zellen transfiziert, wo es RFP exprimiert, das mit menschlichem Golgi-residentem Enzym (N-Acetylgalactosaminylstransferase) fusioniert ist. Sie können das Verhalten von Golgi-RFP in lebenden Zellen mit Fluoreszenz-Bildgebung und Multiplexierung mit anderen fluoreszierenden Proteinen oder organischen Farbstoffen beobachten.

Zellen, die CellLight™ Konstrukte exprimieren, können auch mit Formaldehyd für die Multiplex-Bildgebung mit immunzytochemischen Verfahren fixiert werden.

CellLight™ Technologie ist:
Schnell und praktisch: Einfach CellLight™ Reagenz in Ihre Zellen geben, über Nacht inkubieren und bildgebendes Verfahren nutzen — oder gefrorene, assay-fähige Zellen für den späteren Gebrauch lagern
Hocheffizient: Bis zu 90 % Transduktion einer Vielzahl von Säugetierzelllinien, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und Neuronen
Flexibel: Ko-transduzieren Sie von mehr als einem BacMam Reagenz für Multiplex-Experimente oder Co-Lokalisationsstudien; strenge Kontrolle der Expressionsniveaus durch einfaches Variieren der Dosis
Weniger toxisch: CellLight Reagenzien™ sind nicht-replizierend in Säugetierzellen und eignen sich für die Handhabung auf Biosicherheitsstufe (BSL) 1

von BacMam Technology
CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0, ist ein Fusionskonstrukt aus menschlichem Gogli-residentem Enzym (N-Acetylgalactosaminyltransferase) und TagRFP, das genaues und spezifisches Targeting für zelluläres Golgi-RFP bietet. Dieses Verschmelzungskonstrukt ist im Insektenvirus Baculovirus verpackt, das in menschlichen Zellen nicht repliziert wird und in den meisten Labors als sicher für Bioschutzstufe (BSL) 1 ausgewiesen ist. Die BacMam Technologie sorgt dafür, dass die meisten Säugetierzelltypen mit hoher Effizienz und minimaler Toxizität transduziert, bzw. transfiziert werden. Diese transiente Transfektion kann nach einer über Nacht erfolgten Inkubation bis zu fünf Tage lang nachgewiesen werden – genügend Zeit für die meisten dynamischen Zellanalysen. Wie jede Transfektions-/Transduktionstechnik transfiziert/transduziert die BacMam Methode nicht alle Zellen mit der gleichen Effizienz, wodurch sie für Zellpopulationsuntersuchungen oder automatisierte Bildgebung/Zellzählung schlecht geeignet ist. CellLight™ Reagenzien sind ideal für Experimente geeignet, bei denen eine zelluläre oder subzelluläre Co-Lokalisierung erforderlich ist, oder für Zellfunktionsuntersuchungen, die eine spezielle Auflösung benötigen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
FarbeRot-Orange, Orange
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypRFP (TagRFP)
EmissionSichtbar
Anregungswellenlängenbereich555⁄584
Zur Verwendung mit (Geräte)Konfokalmikroskop, Fluoreszenzmikroskop
FormFlüssig
ProduktlinieCellLight
Menge1 Röhrchen
VersandbedingungNasseis
VerfahrenFluoreszenzintensitätsmessung
MarkertypFluoreszenzprotein
ProdukttypGolgi
SubCellular LocalizationGolgi
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei 2-6 °C lagern, vor Licht schützen. Nicht einfrieren.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Zitierungen und Referenzen (31)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Faecal excretion of ciprofloxacin after a single oral dose and its effect on faecal bacteria in healthy volunteers.
Authors:Pecquet S, Ravoire S, Andremont A,
Journal:J Antimicrob Chemother
PubMed ID:2211433
'High concentrations of ciprofloxacin have been shown to persist in the faeces of volunteers for several days after a week of oral treatment with this drug, which was also found to have a prolonged effect on aerobic Gram-negative intestinal bacteria. To determine whether a shorter course of ciprofloxacin would have ... More
Intracellular trafficking mechanism, from intracellular uptake to extracellular efflux, for phospholipid/cholesterol liposomes.
Authors:Un K, Sakai-Kato K, Oshima Y, Kawanishi T, Okuda H,
Journal:Biomaterials
PubMed ID:22858002
'Liposomes are widely used as drug delivery vehicles to transfer chemotherapeutic agents, proteins, and nucleic acids into target cells. To improve therapeutic effects and reduce unexpected toxic side-effects, it is necessary to understand the mechanism of liposomal uptake into cells, and the intracellular fate of internalized liposomes. The intracellular fate ... More
Utilization of fluorescent probes for the quantification and identification of subcellular proteomes and biological processes regulated by lipid peroxidation products.
Authors:Cummins TD, Higdon AN, Kramer PA, Chacko BK, Riggs DW, Salabei JK, Dell'italia LJ, Zhang J, Darley-Usmar VM, Hill BG,
Journal:Free Radic Biol Med
PubMed ID:22954622
Oxidative modifications to cellular proteins are critical in mediating redox-sensitive processes such as autophagy, the antioxidant response, and apoptosis. The proteins that become modified by reactive species are often compartmentalized to specific organelles or regions of the cell. Here, we detail protocols for identifying the subcellular protein targets of lipid ... More
Quadriwave lateral shearing interferometry for quantitative phase microscopy of living cells.
Authors:Bon P, Maucort G, Wattellier B, Monneret S,
Journal:Opt Express
PubMed ID:19654713
Phase imaging with a high-resolution wavefront sensor is considered. This is based on a quadriwave lateral shearing interferometer mounted on a non-modified transmission white-light microscope. The measurement technology is explained both in the scope of wave optics and geometrical optics in order to discuss its implementation on a conventional microscope. ... More
Combination of Cl-IB-MECA with paclitaxel is a highly effective cytotoxic therapy causing mTOR-dependent autophagy and mitotic catastrophe on human melanoma cells.
Authors:Soares AS, Costa VM, Diniz C, Fresco P,
Journal:
PubMed ID:24659394
Metastatic melanoma is the deadliest form of skin cancer. It is highly resistant to conventional therapies,particularly to drugs that cause apoptosis as the main anticancer mechanism. Recently, induction of autophagic cell death is emerging as a novel therapeutic target for apoptotic-resistant cancers. We aimed to investigate the underlying mechanisms elicited ... More