CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0, bietet eine einfache Möglichkeit, Lysosome in lebenden Zellen mit rot fluoreszierendem Protein (RFP) zu kennzeichnen. GebenWeitere Informationen
Have Questions?
KatalognummerMengeFarbe
C105971 RöhrchenRot-Orange, Orange
Katalognummer C10597
Preis (EUR)
688,00
Each
Zum Warenkorb hinzufügen
Menge:
1 Röhrchen
Farbe:
Rot-Orange, Orange
Preis (EUR)
688,00
Each
Zum Warenkorb hinzufügen
CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0, bietet eine einfache Möglichkeit, Lysosome in lebenden Zellen mit rot fluoreszierendem Protein (RFP) zu kennzeichnen. Geben Sie das Reagenz einfach zu Ihren Zellen, inkubieren Sie über Nacht, und am nächsten Morgen sind die Zellen bereit für die Analyse.

Sie möchten andere Zellstrukturen markieren? Erfahren Sie mehr über CellLight™ fluoreszierende Proteinmarkierungswerkzeuge

Dieses gebrauchsfertige Konstrukt wird mithilfe der BacMam 2.0-Technologie in Zellen transfiziert, wo es RFP exprimiert, das mit lamp1 (lysosomal assoziiertes Membranprotein 1) fusioniert ist. Sie können das Verhalten zwischen Lysosomen und RFP in lebenden Zellen unabhängig vom pH-Wert der Organelle beobachten und mit mehreren Tracking- oder Tracing-Farbstoffen beschriften, um dynamische zelluläre Prozesse abzubilden.

Zellen, die CellLight™ Konstrukte exprimieren, können auch mit Formaldehyd für die Multiplex-Bildgebung mit immunzytochemischen Verfahren fixiert werden.

CellLight™ Technologie ist:
Schnell und praktisch: Einfach CellLight™ Reagenz in Ihre Zellen geben, über Nacht inkubieren und bildgebendes Verfahren nutzen — oder gefrorene, assay-fähige Zellen für den späteren Gebrauch lagern
Hocheffizient: Bis zu 90 % Transduktion einer Vielzahl von Säugetierzelllinien, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und Neuronen
Flexibel: Ko-transduzieren Sie von mehr als einem BacMam Reagenz für Multiplex-Experimente oder Co-Lokalisationsstudien; strenge Kontrolle der Expressionsniveaus durch einfaches Variieren der Dosis
Weniger toxisch: CellLight Reagenzien™ sind nicht-replizierend in Säugetierzellen und eignen sich für die Handhabung auf Biosicherheitsstufe (BSL) 1

BacMam Technology
CellLight™ Lysosomen-RFP, BacMam 2.0, ist ein Fusionskonstrukt aus lamp1 (lysosomal assoziiertes Membranprotein 1) und TagRFP, das genaues und spezifisches Targeting auf zelluläres Lysosomen-RFP bietet. Dieses Verschmelzungskonstrukt ist im Insektenvirus Baculovirus verpackt, das in menschlichen Zellen nicht repliziert wird und in den meisten Labors als sicher für Bioschutzstufe (BSL) 1 ausgewiesen ist. Die BacMam Technologie sorgt dafür, dass die meisten Säugetierzelltypen mit hoher Effizienz und minimaler Toxizität transduziert, bzw. transfiziert werden. Diese transiente Transfektion kann nach einer über Nacht erfolgten Inkubation bis zu fünf Tage lang nachgewiesen werden – genügend Zeit für die meisten dynamischen Zellanalysen. Wie jede Transfektions-/Transduktionstechnik transfiziert/transduziert die BacMam Methode nicht alle Zellen mit der gleichen Effizienz, wodurch sie für Zellpopulationsuntersuchungen oder automatisierte Bildgebung/Zellzählung schlecht geeignet ist. CellLight™ Reagenzien sind ideal für Experimente geeignet, bei denen eine zelluläre oder subzelluläre Co-Lokalisierung erforderlich ist, oder für Zellfunktionsuntersuchungen, die eine spezielle Auflösung benötigen.
Nur für Forschungszwecke.Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
FarbeRot-Orange, Orange
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypRFP (TagRFP)
EmissionSichtbar
Anregungswellenlängenbereich555⁄584
Zur Verwendung mit (Geräte)Konfokalmikroskop, Fluoreszenzmikroskop
FormFlüssig
ProduktlinieCellLight
Menge1 Röhrchen
VersandbedingungNasseis
VerfahrenFluoreszenzintensitätsmessung
MarkertypFluoreszenzprotein
ProdukttypLysosomale Sonde
SubCellular LocalizationLysosome
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei 2-6 °C lagern, vor Licht schützen. Nicht einfrieren.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Zitierungen und Referenzen (22)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Cell entry and trafficking of human adenovirus bound to blood factor X is determined by the fiber serotype and not hexon:heparan sulfate interaction.
Authors:Corjon S, Gonzalez G, Henning P, Grichine A, Lindholm L, Boulanger P, Fender P, Hong SS,
Journal:PLoS One
PubMed ID:21637339
'Human adenovirus serotype 5 (HAdV5)-based vectors administered intravenously accumulate in the liver as the result of their direct binding to blood coagulation factor X (FX) and subsequent interaction of the FX-HAdV5 complex with heparan sulfate proteoglycan (HSPG) at the surface of liver cells. Intriguingly, the serotype 35 fiber-pseudotyped vector HAdV5F35 ... More
Particles on the move: intracellular trafficking and asymmetric mitotic partitioning of nanoporous polymer particles.
Authors:Yan Y, Lai ZW, Goode RJ, Cui J, Bacic T, Kamphuis MM, Nice EC, Caruso F,
Journal:
PubMed ID:23713907
'Nanoporous polymer particles (NPPs) prepared by mesoporous silica templating show promise as a new class of versatile drug/gene delivery vehicles owning to their high payload capacity, functionality, and responsiveness. Understanding the cellular dynamics of such particles, including uptake, intracellular trafficking, and distribution, is an important requirement for their development as ... More
GX15-070 (obatoclax) induces apoptosis and inhibits cathepsin D- and L-mediated autophagosomal lysis in antiestrogen-resistant breast cancer cells.
Authors:Schwartz-Roberts JL, Shajahan AN, Cook KL, Wärri A, Abu-Asab M, Clarke R,
Journal:Mol Cancer Ther
PubMed ID:23395885
'In estrogen receptor-positive (ER+) breast cancer cells, BCL2 overexpression contributes to antiestrogen resistance. Direct targeting of the antiapoptotic BCL2 members with GX15-070 (obatoclax), a BH3-mimetic currently in clinical development, is an attractive strategy to overcome antiestrogen resistance in some breast cancers. Recently, GX15-070 has been shown to induce both apoptosis ... More
The possible
Authors:Benjaminsen RV, Mattebjerg MA, Henriksen JR, Moghimi SM, Andresen TL,
Journal:Mol Ther
PubMed ID:23032976
Polycations such as polyethylenimine (PEI) are used in many novel nonviral vector designs and there are continuous efforts to increase our mechanistic understanding of their interactions with cells. Even so, the mechanism of polyplex escape from the endosomal/lysosomal pathway after internalization is still elusive. The  ... More
Inhibitors of intravesicular acidification protect against Shiga toxin in a pH-independent manner.
Authors:Dyve Lingelem AB, Bergan J, Sandvig K,
Journal:Traffic
PubMed ID:22132807
Shiga toxin inhibits protein synthesis after being transported from the cell surface to endosomes and retrogradely through the Golgi apparatus to the endoplasmic reticulum (ER) and into the cytosol. In this study, we have abolished proton gradients across internal membranes in different ways and investigated the effect on the various ... More