CellTrace™ Zellproliferationskit mit Violettfärbung für die Durchflusszytometrie

Das CellTrace™ Violet Cell Proliferation Kit dient zur In-vitro- und In-vivo-Markierung von Zellen, damit mehrere Generationen mithilfe von Farbstoffverdünnung in der Durchflusszytometrie rückverfolgt werden können.

• Überlegene Performance — Helle Single-Peak-Färbung ermöglicht die Darstellung mehrerer Generationen
• Langfristige Signalstabilität — Hält sich gut in den Zellen für mehrere Tage nach der Färbung
• Vielseitig — Mehrere verfügbare Farben für problemlose Kombinationen mit Antikörpern oder Markern für Zellfunktionen wie GFP
• Einfaches, robustes Färbeprotokoll

Eine Auswahlhilfe für alle CellTrace™ Zellproliferations-Kits für die Durchflusszytometrieanzeigen.

Hervorragende Fluoreszenzfärbung
Eine erfolgreiche Proliferationsanalyse durch Farbstoffverdünnung (siehe Abbildung unten) erfordert einen intensiven Farbstoff, damit durch Fluoreszenzfarbstoff markierte Zellen nach mehreren Zellteilungen von der Eigenfluoreszenz unterschieden werden können. Die durch den CellTrace™ Violet Farbstoff erzielte intensive fluoreszierende Färbung ermöglicht die Darstellung von zehn oder mehr Generationen proliferierender Zellen, bevor das Signal durch intrinsische zelluläre Eigenfluoreszenz ausgelöscht wird. Eine gleichmäßige und homogene Färbung führt unter den Zellen einer Population zu lediglich geringfügigen Fluoreszenzsabweichungen, sodass unterschiedliche Generationen ohne die Notwendigkeit komplexer Modellierungssoftware zu sehen sind.

Langfristige Signalretention
Im Gegensatz zu Farbstoffen, die die Lipidmembran von Zellen markieren, durchdringt der CellTrace™ Violet Farbstoff einfach die Plasmamembran und lagert sich kovalent im Inneren der Zelle an, wo der stabile, gut haltende Fluoreszenzfarbstoff auch noch nach mehreren Tagen in einem Zellkulturumfeld ein einheitliches Signal liefert. Der CellTrace™ Violet Farbstoff lagert sich kovalent an alle freien Amine auf der Oberfläche und im Inneren von Zellen an, zeigt nur wenig Zytotoxizität und hat nur minimale beobachtete Auswirkungen auf die Proliferationsfähigkeit bzw. Biologie von Zellen.

Einfaches Multiplexing mit anderen Fluorophoren
Die violette Anregung und der schmale Emissionsbereich von CellTrace™ Violet Farbstoff machen ihn aufgrund der beschränkten spektralen Überlappung mit anderen häufig eingesetzten Farbstoffen (Alexa Fluor™ 488, FITC und RPE) und fluoreszierenden Proteinen (grün fluoreszierendes Protein [GFP] und mCherry) ideal für das Multiplexing (siehe die nachfolgend aufgeführten Fluoreszenzspektren für CellTrace™ Violet).

Einfaches, robustes Färbeprotokoll
Das CellTrace™ Violet Cell Proliferation Kit enthält praktische Einmal-Fläschchen mit Trockenfarbstoff, die kleinvolumige Experimente erlauben, ohne einen Überschuss an Farbstoff herstellen zu müssen. Durch Auflösen eines Fläschcheninhaltes in wasserfreiem DMSO wird vor Gebrauch eine Stammlösung zubereitet. Zum Färben von 1 ml Zellen in proteinfreiem Medium wird in der Regel 1 µl dieser Stammlösung verwendet. Zellen sollten 20 Minuten lang bei Raumtemperatur unter leichtem Schütteln angefärbt werden. Ein kurzes Waschen mit Komplettmedium löscht den gesamten in der Lösung verbleibenden Farbstoff aus.