Kohle-Agar-Basis (dehydratisiert)

Mit der Thermo Scientific™ Oxoid™ Kohle-Agar-Basis (dehydratisiert) können Sie Bordetella pertussis und Haemophilus influenzae kultivieren und isolieren. Das Medium ist so konzipiert, dass es ein nicht bluthaltiges Medium für die Kultivierung von Bordetella pertussis und Haemophilus influenzae zur Verfügung stellt. Nicotinsäure im Medium wirkt als wesentlicher Wachstumsfaktor für Bordetella¹.

Haemophilus und Bordetella sind kleine, gramnegative Stäbe, die dazu neigen, eine coccobacilläre Form anzunehmen. Mitglieder beider Gattungen enthalten Arten, die ausschließlich beim Menschen vorkommen und Infektionen der Atemwege verursachen. Die Hauptarten sind Haemophilus influenzae, die Ursache für akute eitrige Meningitis, und Bordetella pertussis, die Ursache für Keuchhusten.

Kohle-Agar wurde von Oxoid entwickelt, um ein nicht-bluthaltiges Medium für die Kultivierung von Bordetella pertussis und Haemophilus influenzae zu liefern. Proom¹ zeigte, dass Nikotinsäure ein wesentlicher Wachstumsfaktor für die Bordetellae war. Ensminger et al.² verwendeten ein Kohlemedium für das Wachstum von Bordetella pertussis in der Impfstoffproduktion und stellten fest, dass das Medium Bordet-Genou ersetzen kann. Mishulow et al.³ verwendeten Kohleagar für die Kultivierung von  Bordetella pertussis .

Haemophilus influenzae wird auf einem Medium kultiviert, das 10 % Schokoladen-Blut, aber keine Antibiotika enthält. Die inokulierte Platte wird 2 bis 3 Tage lang bei 37 °C inkubiert Die Kolonien sind in der Regel klein, transparent und tröpfchenartig, aber es kann eine gewisse Transformation zu einer ‘Roughkolonie’ auftreten. Die Differenzierung der Arten erfolgt durch Untersuchung der Notwendigkeit von X- und V-Wachstumsfaktoren auf der Blut-Agar-Basis CM0055.
Das größte Problem bei der Isolierung von Bordetella -Art aus Naso-Pharyngealsekreten ist die Unterdrückung unerwünschter Flora während der langen Inkubationszeit auf sehr nährstoffreichen Medien.

Fleming’s erste in vitro -Demonstration sollte zeigen, dass es bei der Isolierung von  Bordetella pertussis  auf Medien helfen konnte⁴. Lacey⁵ bestätigte dies, stellte aber fest, dass die Penicillin-resistente Flora immer noch Probleme verursachte. Er ergänzte Penicillin mit 2µg/ml 4,4’ Dimidino-Diphenylamin Dihydrochlorid (M & B 938) und erhöhte damit die Selektivität dieses Mediums.

Broome et al.⁶ fanden heraus, dass Methicillin dem Penicillin bei der Unterdrückung unerwünschter nasopharyngealer Flora überlegen ist, aber die frühere Veröffentlichung von Sutcliffe und von Abbott⁷ , in der gezeigt wurde, dass Cephalexin (40µg/ml) dem Penicillin überlegen ist, hat sich als der wichtigste Fortschritt erwiesen.

Die Vorteile von Cephalexin als selektiver Wirkstoff für Bordetella pertussis  wurden bestätigt ^8,9,10,11. Die Fähigkeit, gestresste Zellen zurückzugewinnen, und die wesentlich längere Haltbarkeit (6-8 Wochen) tragen zu seiner Überlegenheit bei der Unterdrückung von unerwünschtem nasopharyngealem Wachstum bei.