DAF-FM Diacetate (4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate)

Le réactif DAF-FM est utilisé pour détecter et quantifier l’oxyde nitrique (NO) en faibles concentrations. Il est essentiellement non fluorescent jusqu’à ce qu’il réagisse avec le NO pour former un benzotriazole fluorescent. La fluorescence du DAF-FM peut être détectée par tous les instruments capables de détecter la fluorescéine, notamment les cytomètres en flux, les microscopes, les lecteurs de microplaques fluorescentes et les fluoromètres.

Spécifications du DAF-FM :
• Ex / Em du DAF-FM : ∼ 495 / 515 nm
• Le produit lyophilisé doit être dissous à l’aide de DMSO, puis ajouté à un tampon aqueux pour créer une solution de travail
•, le diacétate DAF-FM est une solution cellulaire prédestinée et diffuse passivement à travers les membranes cellulaires ; Une fois à l’intérieur de la cellule, elle est convertie en
• Les tampons à la forme imperméable à la cellule contenant de l’albumine sérique bovine (BSA) et du rouge de phénol peuvent affecter la fluorescence et doit être utilisée avec précaution
• Le rendement quantique de la fluorescence de DAF-FM est de ∼ 0,005, mais augmente d’environ 160 fois, à ∼ 0,81, après réaction avec NO

Applications de DAF-FM :
• Évaluation de la production de NO dans les lymphoblastes déficients en transaldolase par cytométrie en flux
• Détection de l’accumulation de NO dans les neurones corticaux embryonnaires suite à la stimulation par les neurotrophines
•Imagerie in vivo du NO dans le pouisson zèbre
• Détection microscopique intravitale de génération de NO associée à l’angiogenèse chez les souris
• Quantitation de la libération de NO induite par l’ATP dans les plaquettes de lapin

Avantages importants de DAF-FM sur DAF-2
Les spectres de l’adduit NO de DAF-FM sont indépendants du pH supérieur à 5,5. En outre, l’adduit de NO du DAF-FM est considérablement plus photostable que celui du DAF-2, ce qui signifie davantage de temps pour la capture des images. Enfin, le DAF-FM est un réactif plus sensible pour le NO que le DAF-2 (limite de détection NO pour le DAF-FM de ∼ 3 nM contre ∼ 5 nM pour le DAF-2).

Sondes pour la recherche sur l’oxyde nitrique
Nous proposons plusieurs produits pour la détection d’espèces réactives d’oxygène (ROS) et d’oxyde nitrique (NO). Consultez ces produits dans le chapitre Sondes pour la recherche à l’oxyde nitrique — Section 18.3 dans le manuel Sondes moléculaires™.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.