Thermo Scientific™

Células competentes DH5α

Las células competentes DH5α Thermo Scientific son células de E. coli de alta eficiencia y competencia química ideales para laMás información

Número de catálogo	Cantidad
EC0112	10 × 100 μl

Número de catálogo EC0112

Precio (MXN)

Cantidad:

10 × 100 μl

Pedido a granel o personalizado

Las células competentes DH5α Thermo Scientific son células de E. coli de alta eficiencia y competencia química ideales para la construcción de bancos de genes o la generación de bibliotecas de ADNc mediante vectores derivados del plásmido. El marcador φ80dlacZΔM15proporciona la α-complementación del gen β-galactosidasa de pUC o vectores similares para permitir la detección de colonias azules/blancas en placas de agar bacterianas que contienen Bluo-Gal o X-Gal. Las mutaciones RecA1 y endA1 en las células DH5 αmejoran la estabilidad y la calidad de las inserciones del ADN plasmídico extraído.

• Alta eficacia de transformación: > 1 x 10⁹ cfu/µg de ADN pUC19
• Adecuado para aplicaciones de clonación rutinarias y de alto rendimiento
• Marcadores genéticos que permiten la detección de colonias azules/blancas
• Dos prácticas reacciones por envase de vial
• SOC Medio de crecimiento incluido

Aplicaciones
Las células competentes DH5α son adecuadas para una variedad de aplicaciones que requieren una alta eficiencia de transformación:
• Clonación eficiente de ADN derivada de reacciones de PCR, generación de ADNc
• El marcador recA1 facilita el trabajo con ADN difícil de transformar
• Ideal para la generación de bibliotecas de ADNc utilizando vectores derivados del plásmidos
• Mutagénesis dirigida a sitio

Genotipo
F– φ80lacZΔ M15 Δ (lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17 (rK– mK+) phoA supE44 λ- thi–1 gyrA96 relA1

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Cepa bacteriana o de levaduraDH5α

Tramado azul/blancoSí

Tipo de célulaQuímicamente competente

Clonación de ADN metiladoNo

Contiene el episoma F'Carece de episoma F'

EficaciaAlta eficacia (> 1 x 10^9 cfu/µg de ADN pUC19)

Para utilizar con (aplicación)Clonación

Compatibilidad de alto rendimientoNo compatible con alto rendimiento

BibliotecasADNc

Línea de productosThermo Scientific

Tipo de productoCélula competente

Propagación de vectores ccdBNo para propagación vectorial ccdB

Cantidad10 × 100 μl

Condiciones de envíoHielo seco

FormatoTubo

EspecieE. coli

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

• 10 x células competentes DH5α (100 µl)
• ADN pUC19 (50 µl) (10 pg/µl)
• S.O.C. Medio (5 ml)

Almacenar a -80 °C.

Preguntas frecuentes

What is the storage media for the competent cells?

Preparation procedures and formulations for all of our competent cells are proprietary. All chemically competent cells are delivered in an aqueous solution that contains a mixture of salts, along with a freezing stabilizer such as glycerol or DMSO.

I need a competent cell line that will generate as much DNA as possible from my vector of interest. What do you recommend?

The three most important things in this case are: endA- genotype, a high copy number origin of replication, and the culture scale. In addition, make sure (a) the culture is grown at 37 degrees C (if lower, the copy number can be lower), (b) try a super-rich media, like Terrific broth, (c) aerate the culture well (the volume of media should be no more than 10% of the volume of the flask), and (d) shake at 200-250 rpm.

What is the formulation of the SOC medium that is provided with competent cells?

SOC (Super Optimal Catabolite) Medium Preparation (for 1 Liter):

1) To a 2 Liter flask with stir bar add the following:
- Bacto Tryptone 20 g
- Yeast Extract 5 g
- Sodium Chloride (NaCl) 0.58 g
- Potassium Chloride (KCl) 0.186 g
2) Add sterile water to a final volume of 1 Liter.
3) Mix well on magnetic stir plate for 5-10 minutes or until all of the ingredients are well mixed and completely dissolved.
4) Autoclave 30 minutes.
5) Allow to cool to room temperature.
6) Add 10 ml of sterile 2M Magnesium Solution (1M Magnesium sulfate, 1M Magnesium chloride)and mix well.
7) Add 10 ml of sterile 2M Glucose and mix well. (Final Glucose concentration is 20 mM).

How can I obtain the highest possible transformation efficiency with Thermo Scientific DH5α and DH10B competent cells?

To achieve the highest possible transformation efficiency with Thermo Scientific DH5α (Cat. No. EC0112) and DH10B (Cat. No. EC0113) competent cells, please follow the transformation protocol provided with the product and pay attention to the following details:

- Make sure to use wet well-pressed ice to maximize cold surface volume in all the transformation steps.
- Perform the steps quickly and accurately.
- Use chilled microcentrifuge tubes and bury the whole tube up to the cap in the wet ice.
- Do not exceed the recommended heat shock time and transfer the tube with cells back to the wet ice immediately.