Polinucleótido quinasa T4 (10 U/μl)

El polinucleótido cinasa T4 (PNK T4) Thermo Scientific™ cataliza la transferencia del fosfato gamma del adenosín trifosfato (ATP) al grupo 5'-OH de ARN o ADN monocatenario o bicatenario y a oligonucleótidos o nucleósidos 3'-monofosfatos (reacción de avance). La reacción es reversible. En presencia de adenosina-difosfato (ADP), el polinucleótido cinasa T4 exhibe actividad 5'-fosfatasa y cataliza el intercambio de los grupos fosfatos entre 5'-P-oligo-polinucleótidos y ATP (reacción de intercambio). La enzima también es 3'-fosfatasa.

Características destacadas
• Activo en tampones de enzimas de restricción, transcripción inversa (RT) y ligasa de ADN T4 Thermo Scientific

Aplicaciones
• Marcado del extremo 5' de los ácidos nucleicos que pueden usarse como:
    --Sondas para hibridación
    --Sondas para mapeo de transcripciones
    --Marcadores para electroforesis en gel
    --Cebadores para la secuenciación del ADN
    -- Cebadores para PCR
• Fosforilación del extremo 5' de oligonucleótidos, productos de PCR u otros ADN o ARN antes de la ligación
• Fosforilación de cebadores de PCR
• Detección de modificaciones del ADN mediante postmarcaja con ^32P
• Eliminación de grupos fosfato en el extremo 3'

Notas
• El extremo 5' de ácidos nucleicos puede etiquetarse mediante reacción directa o de intercambio.
• El polietilenglicol (PEG) y la espermidina mejoran la velocidad y la eficacia de la reacción de fosforilación. El PEG se utiliza en la mezcla para la reacción de intercambio.
• Como los iones de amonio inhiben el polinucleótido cinasa T4, utilice acetato sódico para precipitar el ADN antes de la fosforilación.