phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)

Name: phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)
SKU: EP0092
Price: 338.00 EUR

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Katalognummer	Menge
EP0092	10 μg (1000 U)
EP0091	2,5 μg (250 U)
EP0094	50 μg (5000 U)

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Katalognummer EP0092

Preis (EUR)

338,00

Each

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10 μg (1000 U)

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Preis (EUR)

338,00

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phi DNA-Polymerase ist eine äußerst prozessive Polymerase (bis zu mehr als kb) mit starker Strangverdrängungsaktivität, die eine hocheffiziente isothermische DNA-Amplifikation ermöglicht. phi DNA-Polymerase besitzt außerdem eine '→→' Exonuklease- (Proofreading-) Aktivität, die vorzugsweise auf einsträngiger DNA oder RNA wirkt. Daher werden 3'-modifizierte Primer dringend empfohlen.

Highlights

• Höchste Prozessivität und Strangverdrängungsaktivität unter bekannten DNA-Polymerasen – über 70 kb lange DNA-Strecken können synthetisiert
• werden Hochgenaue DNA-Synthese
• Extrem hohe Ausbeuten amplifizierter DNA selbst aus winzigen Mengen von Template
• Amplifikationsprodukten können direkt in nachgelagerten Anwendungen (PCR, Restriktionsverdau, SNP-Genotypisierung usw.)

Anwendungen

• Walzkreisamplifikation (RCA): Erzeugung periodischer DNA-Nanorotemplatten
• Mehrfachverdrängungsamplifikation (MDA)
• Unvoreingenommene Amplifikation des gesamten Genoms (WGA, siehe Abbildung 1 unter “Unterstützende Daten”):
• Amplifikation von DNA für SNP- und STR-Nachweiszellfreie
• Amplifikation von DNA aus Einzelzellen
• pathogene Organismen oder Metagenomen-Amplifikation
• von DNA aus Filterpapier Blutfleckproben
• DNA-Template-Vorbereitung für die Sequenzierung
• Protein-grundierte DNA-Amplifikation
• In-situ-Genotypisierung mit Vorhängeschlosssonden
Rekombinationsbasiertes Klonen
• Zellfreies Klonen von letalem DNA
• -RNA-primed DNA-Amplifikation

Hinweis

Die Zugabe von Pyrophosphatase in das Reaktionsgemisch mit Phi29 DNA-Polymerase kann die DNA-Synthese verbessern.

Die Verwendung dieses Enzyms in bestimmten Anwendungen kann durch Patente abgedeckt werden und erfordert möglicherweise eine Lizenz.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

Konzentration10 U/μL

Optimale Reaktionstemperatur30°C

Reaktionszeit4 hours

VersandbedingungTrockeneis

Zur Verwendung mit (Anwendung)MDA-WGA, RCA

Polymerasephi29 DNA Polymerase

ProdukttypStand-alone enzyme

Menge10 μg (1000 U)

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

• phi29 DNA Polymerase (1,000 units at 10 U/μL)
• 10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase
• Store at –15 to –25°C.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What is the error rate of phi29 DNA Polymerase?

The error rate of phi29 DNA Polymerase is 1 x 10^-5.
The error rate of phi29 DNA Polymerase was measured according to the method described in literature:
Mielinis, P., Sukackaitė, R., Serapinaitė, A., Samoilovas, F., Alzbutas, G., Matjošaitis, K., & Lubys, A. (2021). MUA-based molecular indexing for rare mutation detection by Next-Generation sequencing. Journal of Molecular Biology, 433(19), 167209. https://doi.org/10.1016/j.jmb.2021.167209

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Can I use phi29 DNA Polymerase to incorporate 5-methyl-dCTP?

phi29 DNA Polymerase should be able to incorporate 5-methyl-dCTP nucleotides and other modified nucleotides.
The incorporation of modified nucleotides by phi29 DNA Polymerase can be reviewed in the literature:
Jakubovska, J., Tauraitė, D., Birštonas, L., & Meškys, R. (2018). N 4-acyl-2′-deoxycytidine-5′-triphosphates for the enzymatic synthesis of modified DNA. Nucleic Acids Research, 46(12), 5911–5923. https://doi.org/10.1093/nar/gky435

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What is the minimal recommended time for amplification with phi29 DNA Polymerase?

The optimal reaction time for DNA amplification with phi29 DNA Polymerase is 4 hours. For samples with ≥1 pg of DNA input, DNA amplification time can be shortened to 2 hours if maximizing product yield is not essential.

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Can phi29 DNA Polymerase be used with liquid media culture or colonies?

Yes. phi29 DNA Polymerase can work with different types of sample input such as purified DNA, liquid media culture, agar plate colonies, etc.

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Can phi29 DNA Polymerase be heat-inactivated?

Yes, we recommend heat-inactivating phi29 DNA Polymerase at 65 degrees C for 10 min.

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