Mezcla maestra para PCR de alta fidelidad Phusion con tampón GC

Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un nuevo referente para PCR de alto rendimiento. Con una tasa de errores 50 veces menor que la de Taq y 6 veces inferior a la de Pfu, las polimerasas de ADN de alta fidelidad Phusion son una opción excelente para la clonación y otras aplicaciones que requieren alta fidelidad. Las ADN polimerasas Phusion ofrecen un rendimiento sólido con tiempos de protocolo cortos, incluso en presencia de inhibidores de PCR. Generan una mayor producción con menos cantidad de enzimas que otras ADN polimerasas.

La mezcla maestra de PCR de alta fidelidad Phusion es una conveniente mezcla 2X que contiene ADN polimerasa Phusion, nucleótidos y un tampón de reacción optimizado que incluye MgCl₂. Hay disponibles dos formulaciones de mezcla maestra: con tampón de ácido fluorhídrico (HF) (F-531S y F-531L) y con tampón de guanina y citosina (GC) (F-532S y F-532L). La tasa de errores de ADN polimerasa Phusion en el tampón HF (4,4 × 10^-7) es menor que la que presenta el tampón GC (9,5 × 10 ^-7). Por lo tanto, la mezcla maestra con el tampón HF se debe usar como mezcla maestra predeterminada para la amplificación de alta calidad. Sin embargo, el tampón GC puede mejorar el rendimiento de la ADN polimerasa Phusion en algunas plantillas difíciles o largas, como plantillas ricas en GC o aquellas con estructuras secundarias complejas.

Aspectos destacados

• Alta fidelidad (25X Taq)
• PCR rápida gracias a los breves tiempos de extensión (de 15 a 30 s/kb)
• Sólido rendimiento, mínima optimización necesaria

Aplicaciones

• Amplificación de moldes complejos (con gran contenido de GC)
• PCR de alta fidelidad
• Clonación
• Generación de moldes para secuenciación
• PCR de largo alcance (hasta 20 kb)
• Mutagénesis
• PCR de alto procesamiento

Uso de ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para las ADN polimerasas Phusion son diferentes a las de muchas ADN polimerasas comunes (como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.