Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un nuevo referente para PCR de alto rendimiento. Con una tasa de errores 50 veces menor que la de Taq y 6 veces inferior a la de Pfu, las polimerasas de ADN de alta fidelidad Phusion son una opción excelente para la clonación y otras aplicaciones que requieren alta fidelidad. Las ADN polimerasas Phusion ofrecen un rendimiento sólido con tiempos de protocolo cortos, incluso en presencia de inhibidores de PCR, y generan una mayor producción con menos cantidad de enzimas que otras ADN polimerasas.

Mediante el uso de la ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion Hot Start II, la amplificación prosigue sin la producción de productos inespecíficos debido a la combinación de la ADN polimerasa Phusion y un ligando Affibody específico unido reversiblemente que inhibe la actividad de la ADN polimerasa a temperatura ambiente. El ligando Affibody también inhibe la actividad de exonucleasa 3´→5´ de la polimerasa, lo que evita la degradación de los primers y del ADN de la plantilla durante la preparación de la reacción. A temperaturas que potencian la actividad de la polimerasa, se libera el ligando, lo que activa completamente la polimerasa. La ADN polimerasa Phusion Hot Start II se reactiva inmediatamente a altas temperaturas, por lo que no requiere un paso de activación independiente en los protocolos de PCR.
La ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion Green Hot Start II es una combinación de la ADN polimerasa Phusion Hot Start II y los tampones Phusion Green 5X. Los tampones incluyen un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento que no interfieren con el sólido rendimiento de la ADN polimerasa Phusion Hot Start II. Los investigadores pueden cargar directamente productos de PCR en un gel, lo que hace que sea una opción versátil para su uso en aplicaciones posteriores, como la secuenciación de ADN, la unión y la digestión de restricción.

Aspectos destacados

• Preparación de la reacción a temperatura ambiente
• Ninguna amplificación inespecífica ni degradación del cebador durante la preparación de la reacción
• Tiempo de reactivación cero gracias a una exclusiva tecnología de inicio en caliente
• Alta fidelidad (52 veces más que Taq)
• PCR rápida gracias a los breves tiempos de extensión (de 15 a 30 s/kb)
• Reacciones sólidas, mínima optimización necesaria
• Mayor producción con cantidades mínimas de enzimas
• Carga directa en geles

Aplicaciones

• PCR de alta fidelidad
• Alto rendimiento
• Amplificación de moldes complejos (gran cantidad de GC)
• Generación de moldes para secuenciación
• PCR multiplex
• PCR de largo alcance
• Clonación
• Mutagénesis
• Micromatriz

Uso de la ADN polimerasa Phusion
Las normas de recocido para las ADN polimerasas Phusion son diferentes de muchas de las ADN polimerasas comunes (como la ADN polimerasa Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.