Template Generation System II Kit

製品番号（カタログ番号）	数量
F702	20 reactions

製品番号（カタログ番号） F702

価格（JPY）

55,000

キャンペーン価格

Ends: 27-Mar-2026

91,800

割引額 36,800 (40%)

お問い合わせください ›

20 reactions

一括またはカスタム形式をリクエストする

Thermo Scientificトランスポゾン技術は、構成された線形DNAフラグメントを、ランダムかつ非常に効率的に円形または直線状のDNAターゲットに挿入できる初めての技術です。Thermo Scientificテンプレート生成システムIIキット（TGS IIキット）は、バクテリオファージMuの転位反応に基づいています。このシステムはin vitroでの作業が簡素化され、エントランスポゾンとして指定された人工的なMuトランスポゾンが構築されています。この反応は、単一の酵素MuAトランススパーゼによって触媒されます。

TGS IIキットは、ランダムな位置でエントランスポゾンを外来DNAに挿入するためのツールを提供します。未知の標的DNAにエントランスポゾンを挿入することで、さまざまなアプリケーションにプライマー結合部位を提供します。単一の反応チューブ内で、シンプルかつ迅速なin vitro転位反応を行います。

特長：

•DNA シーケンシング用のテンプレートを、他のどの方法よりもシンプルかつ短いハンズオン時間で提供します。
•1回の転位反応で数千ものすぐにシーケンスできるテンプレートを生成します。断片化やサブクローニングなしで、大きなDNAクローン（BACクローンなど）をシーケンスするのにも十分です
•コロニーPCRまたは制限酵素消化によるエントランスポゾン挿入の単純なマッピングにより、ダイレクトシーケンスが可能になります。「ショットガン」アプローチよりも、シーケンスを完了するために必要なシーケンス反応が少なく済みます。
•ユニバーサルプライマー：シーケンシングおよびマッピング用プライマーはキットに含まれており、カスタムプライマーは不要です。
• 双方向シーケンシング：単一のテンプレートクローンを使用して、エントランスポゾン挿入の両側にある隣接DNAのシーケンスを行うことができます。
•各TGS IIキットには3つの異なる抗生物質耐性遺伝子があります
•キットには、必要なすべてのコンポーネントと、反応を実行するための詳細な取扱説明書が含まれています。TGS IIキットは、TGS Iキットのアップデート版です。

アプリケーション
テンプレート生成システム IIキットは、未知の標的DNAに人工的なMuトランスポゾンを挿入し、以下のプライマー結合部位を提供するように設計されています：

•プライマーウォーキングやカスタムプライマーを使用しないテンプレートの迅速なシーケンス
•時間のかかる断片化やライブラリへのサブクローニングなしで、大きなDNAクローンを直接ショットガンシーケンシング
•未知のシーケンスを持つ標的DNAへのPCRプライミング部位の挿入
•クローン化されたDNAのランダム挿入型遺伝子変異。挿入部位でプライマーを使用した直接増幅、マッピング、またはシーケンシング
•トランスポゾンによるシーケンシングと従来のシーケンシング
•特別なアプリケーション：
•BACシーケンシング
•線形標的DNAへの転位反応

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。

フォーマットキット

反応数20反応

製品タイプテンプレート生成システムIIキット

数量20 reactions

原料DNA

対応可能対象20反応

使用対象（アプリケーション）Pre-amplification, Pre-amplification

反応速度高速

Unit SizeEach

よくあるご質問（FAQ）

I performed colony-PCR mapping reactions to localize the Entranceposon insertions generated using the TGS Kit and analyzed the amplification products using agarose gel electrophoresis. The PCR product seemed to be a smear rather than an intact band. How do I avoid this problem?

Make sure not to use too much bacteria as a reaction template. Dilute the colony in 50-100 µL water or 0.9% saline and use 1 µL of the dilution per 20 µL PCR reaction. The excess of the E. coli genomic DNA in the PCR reaction typically results in a smeared amplification product. If you use a DNA polymerase from another manufacturer it is likely that the reaction conditions given in the TGS Kit Instruction Manual for the DyNAzyme EXT DNA Polymerase have to be modified.

Are there any stability problems arising from the fact that the whole Entranceposon is inserted into the target plasmid? Is the Entranceposon capable of further transposition inside host cells? How stable are the target plasmids that carry the Entranceposon?

The Entranceposonshave been designed so that the presence of the MuA Transposase enzyme is an absolute requirement for any transposition activity. The Entranceposons do not contain any genes from the bacteriophage Mu; only the DNA sequences from the right end of the Mu genome that are responsible for the transposase binding. However, the Entranceposons contain >50 bp inverted terminal repeats. To avoid instability resulting from homologous recombination between the repeats, the use of a recA mutant E. coli strain is recommended.

Is there any background problem in the bacteriophage Mu transposition system that is used in your Transposon Products?

No. The Entranceposons that come with the TGS and MGS Kits are non-replicating linear DNA molecules that are not maintained inside E. coli cells.

Is it possible to insert two copies of the Entranceposon in a single target plasmid when using TGS and MGS kits? How can I avoid such double insertions?

By using the optimized in vitro reaction conditions described in the system protocol, the frequency of double insertions is approximately 1% of all the insertion clones.

Is the insertion site selection of the Entranceposon in TGS and MGS kits based on consensus sequence recognition?

Under the optimized reaction conditions of the kits, the naturally occurring consensus sequence preference of the bacteriophage Mu transposition has been minimized. Therefore, the in vitro transposition reaction leads to essentially random insertions of the Entranceposon throughout the target DNA. The plasmid clones in which the Entranceposon insertion destroys either the marker gene conferring resistance to the selective agent or the DNA sequences responsible for the plasmid replication are incapable of amplifying under selective conditions and therefore cannot be isolated from bacterial colonies.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

View all Template Generation System II Kit FAQs