Bei der CellSensor® ISRE-bla Jurkat-Zelllinie ist ein Beta-Lactamase-Reportergen unter Kontrolle des Interferon-stimulierten Response-Elements (ISRE) stabil in Jurkat-Zellen integriert. Zur Herstellung dieser Zelllinie wurde das ISRE-bla-Konstrukt mittels Lentiviren in Jurkat-Zellen transduziert. Auf IFNα reagierende Zellen wurden mittels Durchflusszytometrie isoliert. Diese Zelllinie wurde für DMSO-Toleranz, Zellzahl, Stimulationszeit, Substratladezeit sowie Z‘-Faktor und EC50-Konzentrationen von IFN-alpha validiert. Die CellSensor® ISRE-bla Jurkat Zelllinie reagiert auf Interferon alpha (IFN-alpha) und Interferon beta und kann zur Untersuchung der Typ-I-Interferon-induzierten JAK-STAT Signalwege verwendet werden. Diese Zelllinie kann für das Hochdurchsatz-Screening von Agonisten- oder Antagonisten-Compound-Bibliotheken angepasst werden. Kandidatenmedikamente können auch auf Dosisreaktionen gegen diese Zelllinie getestet werden. ISRE-bla Jurkat-Zellen wurden mit dem Agonisten IFN-alpha über den angegebenen Konzentrationsbereich in einem 384-well-Format behandelt. Die Zellen wurden für 5 Stunden mit dem Agonisten und 0,5 % DMSO inkubiert und anschließend für 2 Stunden mit LiveBLAzer™-FRET B/G Substrat (CCF4-AM) kombiniert. Die Fluoreszenz-Emissionswerte bei 460 nm und 530 nm wurden mit einem standardmäßigen Fluoreszenz-Plattenlesegerät ermittelt und das 460/530-Verhältnis wurde gegen die Konzentration des Agonisten aufgezeichnet. Kunden aus dem akademischen und gemeinnützigen Bereich fragen bitte nach Sonderpreisen.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spezifikationen
Assay-Eingabe
Zellbasiertes Beta-Lactamase-Reportergen
Zellenzustand
Teilende Zellen
Produktlinie
CellSensor™
Zieleintrag
JAK/STAT (Typ I-IFN)-Signalweg, TYK2, JAK1
System Type
CellSensor™
Druggable Target
Signalweg
Inhalt und Lagerung
CellSensor™ Zelllinien werden auf Trockeneis geliefert. Sofort nach Erhalt in Flüssigstickstoff lagern oder zur sofortigen Verwendung auftauen.