TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli

Das TA Cloning™ Kit mit pCR™2.1 Vektor ermöglicht eine schnelle und einfache Klonierungsstrategie für direktes Einfügen eines Taq-amplifizierten PCR-Produkts in einen Plasmid-Vektor. Das TA Cloning™ Kit verwendet den pCR™2.1 Klonierungsvektor und ExpressLink™ T4 DNA Ligase, um ein Ligationsprodukt in einem Ligationsschritt von fünfzehn Minuten bei Raumtemperatur zu erzeugen. Reaktionen erbringen in der Regel über 80 % Rekombinationen mit Inserts.

Merkmale des TA Cloning™ Kit mit pCR™2.1 Vektor:
• Schnell und praktisch – Ligation bei Raumtemperatur in 15 Minuten
• Effizient – Blau/Weiß-Screening und über 80 % Klone mit korrektem Insert
• Flexibel – Wahl von Kanamycin- oder Ampicillin-Resistenz für eine flexible Antibiotika-Auswahl
• Sorgenfrei – Eliminiert jegliche enzymatischen Modifikationen des PCR-Produkts
• Optimiert – Erfordert keine Verwendung von PCR-Primern, die Restriktionsstellen enthalten

Der pCR™2.1 Vektor bietet:
• 3'-T-Überhänge für die direkte Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten
• T7 Promoter zur In-vitro-RNA-Transkription und -Sequenzierung
• Ein vielseitiger Polylinker mit flankierenden EcoR I-Stellen für eine einfache Exzision von Inserts
• M13 Vorwärts- und Rückwärts-Primerstellen für die Sequenzierung

Funktionsweise von TA Cloning™
Taq-Polymerase hat eine nicht Template-abhängige Aktivität, die ein Einzel-Desoxyadenosin (A) an den 3'-Enden von PCR-Produkten einfügt. Der linearisierte Vektor in diesem Kit weist am 3‘-Ende Desoxythymidin (T)-Überhänge auf. Auf diese Weise können PCR-Inserts effizient mit dem Vektor ligiert werden.

Kit-Konfigurationen
Das TA Cloning™ Kit bietet eine Vielzahl von Konfigurationen: ohne kompetente Zellen (K2020-20 und K2020-40), mit One Shot™ INVF' chemisch kompetentem E. coli (K2000-01 und K2000-40), mit One Shot™ TOP10F' chemisch kompetentem E. coli (K2030-01 und K2030-40) und mit One Shot™ TOP10 chemisch kompetentem E. coli (K2040-01 und K2040-40) in Kit-Größen mit 20 und 40 Reaktionen.