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Zero Blunt&trade; TOPO&trade; PCR Cloning Kit, with One Shot&trade; MAX Efficiency DH5&alpha;-T1<sup>R</sup> <i>E. coli</i>
Invitrogen™

Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit, with One Shot™ MAX Efficiency DH5α-T1R E. coli

Les kits de clonage par PCR Zero Blunt™ TOPO™ offrent la méthode la plus rapide et la plus simple pourAfficher plus
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RéférenceQuantité
K282020
également connu sous le numéro K2820-20
25 réactions
K282040
également connu sous le numéro K2820-40
50 réactions
Référence K282020
également connu sous le numéro K2820-20
Prix (EUR)
980,00
Each
Quantité:
25 réactions
Prix (EUR)
980,00
Each
Les kits de clonage par PCR Zero Blunt™ TOPO™ offrent la méthode la plus rapide et la plus simple pour un rendement élevé (clonage de produits PCR à extrémités franches amplifiés avec des polymérases thermostables à activité corrective) Les kits incluent le vecteur PCR™-Blunt II-TOPO™ linéarisé et activé par topoisomérase I pour des ligatures de paillasse de 5 minutes sans ligase (1). Le vecteur PCR™-Blunt II-TOPO™ offre également :

• Gène ccdB comme sélecteur positif (2)
• Sites EcoR I encadrant le site d’insertion du produit de PCR, pour une excision simple des inserts
• Gènes de résistance à la kanamycine et au Zeocin™ permettant de choisir la méthode de sélection dans E. coli
• Site promoteur / amorce SP6 pour la transcription et le séquençage de l’ARN in vitro
• Sites d’amorce sens et antisens M13 pour le séquençage ou l’analyse PCR

Les kits de clonage PCR Zero Blunt™ TOPO™ sélectionnés sont disponibles dans des kits mixtes combinés avec un kit de minipréparation Purelink™ Quick Plasmid (50 préparations) pour la purification rapide plasmidique de vos inserts clonés TOPO™pour l’analyse en aval.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Souche bactérienne ou de levuresDH5α
Méthode de clonageBlunt TOPO™
Gamme de produitsOne Shot
Type de produitKits de clonage PCR
AccélérateurSP6
Quantité25 réactions
VecteurVecteurs de clonage d’ADN Blunt
FormatKit
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Boîte 1 :
•Vecteur PCR™ Blunt II-TOPO™ linéarisé et activé par topoisomérase I
• Solution saline
• dNTP
• Modèle de contrôle
• Amorces directes et inverses M13
• Eau stérile

Stockez entre -5 et -30°C.
Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.

Boîte 2 :
• Cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™
• Milieu S.O.C.
• Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé

Stockez entre -68 et -85°C.

Foire aux questions (FAQ)

What is the difference between the pCR2.1-TOPO and pCR4-TOPO vectors?

The vector backbones for both of these vectors are very similar. The main difference is that the pCR4-TOPO vector has sequencing primer sites located as close as 33 base pairs from the PCR product insertion site. This minimizes the amount of vector DNA sequence that needs to be read before reaching the sequence of the insert, making the pCR4-TOPO vector very useful for sequencing applications.

What is the difference between the pCR2.1-TOPO and pCRII-TOPO vectors?

The vector backbones for both of these vectors are very similar. The main difference is that the pCRII-TOPO vector is a dual promoter vector, containing the SP6 and T7 promoters for in vitro transcription/sequencing, whereas the pCR2.1-TOPO vector contains only the T7 promoter for in vitro transcription/sequencing. Both vectors contain the M13 Forward and Reverse primer sites for sequencing or PCR screening.

Your TOPO cloning kits contain a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best molar ratio of PCR product:vector to use for TOPO TA cloning? Is there an equation to calculate the quantity to use?

We suggest starting with a molar ratio of 1:1 (insert:vector), with a range of 0.5:1 to 2:1. The quantity used in a TOPO cloning reaction is typically 5-10 ng of a 2 kb PCR product.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 (insert:vector ratio)

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

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