TOPO™ TA Cloning™ Kit for Subcloning, with One Shot™ TOP10 chemically competent E. coli cells

Description

Les kits de sous-clonage TOPO® TA Cloning® offrent une stratégie de clonage en une seule étape, en 5 minutes et très efficace (“clonage TOPO®’’) pour l’insertion directe de produits PCR amplifiés par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique à des fins de sous-clonage. Chaque kit utilise le vecteur TA pCR™ 2.1-TOPO® avec des sites de restriction pratiques pour le sous-clonage. Les kits de clonage sont disponibles dans une vaste gamme de cellules compétentes, ou sans cellules compétentes, selon vos besoins et votre budget. Caractéristiques des kits TOPO® TA Cloning® pour le sous-clonage :

• Simples et rapides : passez de la PCR aux clones en 3 étapes et un temps de manipulation inférieur à 5 minutes
• Efficaces : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
• Éprouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
• Simples : aucune activité ligase, les procédures post-PCR ou amorces PCR contenant les séquences spécifiques sont requises

Kits TOPO® TA Cloning® pour le sous-clonage : présentation

• Vecteur : Vecteur TA pCR™ 2.1-TOPO® : vecteur de sous-clonage avec 15 sites de restriction pratiques qui flanquent votre insert pour un sous-clonage directionnel facile

• Méthode de clonage : TOPO® TA Cloning® : topoisomérase I, ligature en 5 minutes des produits PCR avec des saillies 3′-A (amplification avec des polymérases Taq) sur le vecteur TOPO® avec des saillies T

• Cellules compétentes : plusieurs options, faites votre choix parmi les kits qui proposent des cellules compétentes générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide ; ou utilisez les vôtres.

Vecteur TA pCR™ 2.1-TOPO® : simplicité du clonage et du sous-clonage
Le vecteur pCR™ 2.1-TOPO® TA est linéarisé avec des saillies de 3’-thymidine (T) pour une ligature directe des produits PCR amplifiés par polymérases Taq (clonage TA®). Il est “activé” par la topoisomérase I liée par covalence. Nul besoin d’ajouter la ligase ; le clonage est terminé en 5 minutes. Les sites EcoRI flanquant le site d’insertion du produit PCR permettent une excision aisée des inserts ou utilisent n’importe quelle combinaison de 15 sites de restriction pratiques qui flanquent votre insert PCR pour un sous-clonage directionnel en toute simplicité.

Sélection et manipulation du clone TA pCR™ 2.1-TOPO®
Le vecteur TA pCR™ 2.1-TOPO® contient des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et le gène LacZα pour l’analyse des bleus/blancs.

Clonage TOPO® simplifié
Grâce à la technologie de clonage TOPO®, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation d’ADN longues. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de transformer les cellules compétentes E. coli.

Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, il vous suffit d’analyser moins de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur pCR™ 2.1-TOPO® TA utilisé dans ce kit est doté de saillies 3’-T pour la ligature efficace de produits PCR amplifiés par polymérases Taq et dotés de saillies 3’-A.

La référence dans le domaine du clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO® est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple d’utilisation et efficace, le clonage TOPO® a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.

Kits TOPO® TA Cloning® pour le sous-clonage : options de kit
Le kit TOPO® TA Cloning® pour le séquençage peut être acheté avec une vaste gamme de cellules compétentes offrant différents avantages en fonction de vos besoins :

• Clonage général : Cellules TOP10 (No de catalogue K4500-01, K4500-40)
• Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K4560-01, K4560-40)
• Clonage général, résistance T1 aux bactériophages : Cellules DH5α-T1R (No de catalogue K4520-01, K4520-40)
• Croissance rapide : Mach1™ -T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K4510-20)
• Fournissez la vôtre : pour une souplesse et des économies accrues (No de catalogue 450641)

Nous proposons également deux versions du kit qui incluent un kit de minipréparation d’ADN plasmidique rapide PureLink™ (No de catalogue K4500-02 et K4510-02) à utiliser pour l’isolement de plasmide recombinant propre et prêt pour le séquençage.

Figures

Spécifications

Vector Type:	TOPO-TA Cloning Vectors
Cloning Method:	TOPO®-TA
Bacterial or Yeast Strain:	TOP10
Product Line:	One Shot®, TA Cloning®, TOPO®
Product Size:	25 reactions

Contenu et stockage