Invitrogen™

pGlow TOPO™ TA Expression Kit

Das pGlob TOPO® TA Expressionskit verwendet die GFP-Mutante (1) von Cycle 3 als Reporterprotein für die Transkriptionsaktivität. Cycle 3 GFPWeitere Informationen

Katalognummer	Menge
K483001	20 Reaktionen

Katalognummer K483001

Preis (EUR)

1.278,00

Menge:

20 Reaktionen

Preis (EUR)

1.278,00

Das pGlob TOPO® TA Expressionskit verwendet die GFP-Mutante (1) von Cycle 3 als Reporterprotein für die Transkriptionsaktivität. Cycle 3 GFP eignet sich hervorragend für die nichtinvasive Analyse von Promoter-Elementen in intakten, lebenden Zellen Dank der Fluoreszenzeigenschaften von Zyklus 3 GFP ist die In-vivo-Detektion in praktisch allen Zelltypen oder -arten mittels Mikroskopie mit Wildtyp-GFP-Filtersätzen oder mit fluoreszenzaktivierten Zellsortiermethoden möglich.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

LiefertypTransfektion

Zur Verwendung mit (Anwendung)Reporter-Assays, Klone deinen eigenen Promotor

ProdukttypTOPO TA Expressionskit

Menge20 Reaktionen

Reporter-GenGFP (Zyklus 3)

Selektionsmittel (eukaryotisch)Geneticin™ (G-418)

VektorGlow, TOPO-TA-Vektoren

KlonierungsmethodeTopo™-TA

ProduktlinieTOPO

PromoterKeine (ohne Promotor)

ProteinmarkierungNicht markiert

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

pGlow TOPO™ TA-Expressionskits enthalten zwei Boxen. Die TOPO™ TA-Klonierungsbox enthält linearisierte und Topoisomerase I-aktivierten pGlow-TOPO™-Vektoren, dNTPs, Primer für Sequenzierung, Salzlösung sowie Kontroll-PCR-Vorlage und Primer; bei -20°C lagern. Die One-Shot™ Box enthält One Shot™ TOP10 E. coli-Zellen, S.O.C.-Medium und ein superhelikales Kontrollplasmid; Lagerung bei -80 °C. Die Kits bleiben garantiert 6 Monate stabil, wenn sie sachgemäß gelagert werden.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Can I use pBlue- or pGlow-TOPO reporter vectors to evaluate promoter function in E. coli?

pBlue-TOPO contains a cryptic prokaryotic promoter upstream of the lacZ reporter gene, due to which E. coli transformants may appear to be light blue when screened on plates containing X-Gal. Hence, we do not recommend using pBlue-TOPO to evaluate promoter function in E. coli. However, pGlow-TOPO can be used for these studies. Note that background expression of beta-galactosidase from pBlue-TOPO does not occur in mammalian cells.

Do you offer a vector that I could use to do some promoter analysis studies?

Yes, we do offer the pBlue-TOPO and pGlow-TOPO vectors that facilitate cloning of the DNA sequence of interest directly upstream of either the b-galactosidase or Cycle 3 GFP gene, respectively.
pBlue-TOPO is ideal for functional analysis of promoters with low transcriptional activity, since assays for beta-galactosidase are easy to perform and are quantitative at very low levels of expression. pGlow-TOPO is ideal for non-invasive analysis of promoter elements within intact, living cells. The fluorescent property of Cycle 3 GFP allows in vivo detection in virtually any cell type or species using microscopy with wild-type GFP filter sets or by fluorescence-activated cell sorting methods.

Can GFP fluorescence be detected in cells that have been stained for beta-galactosidase?

We recommend looking for GFP fluorescence before staining for beta-galactosidase. This is because the beta-galactosidase staining process produces a very high autofluorescence that will interfere with detection of GFP fluorescence.

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