LIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem Nahinfrarot-Totzellen-Farbstoff zur Anregung mit 633 oder 635 nm
LIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem Nahinfrarot-Totzellen-Farbstoff zur Anregung mit 633 oder 635 nm
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LIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem Nahinfrarot-Totzellen-Farbstoff zur Anregung mit 633 oder 635 nm

Das LIVE/DEAD™ Fixable Near-IR Dead Cell Stain Kit dient zur Bestimmung der Viabilität von Zellen vor der Fixierung und Permeabilisierung,Weitere Informationen
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KatalognummerMenge
L3497580 Assays
L10119200 Assays
L34976400 Assays
Katalognummer L34975
Preis (EUR)
211,00
Each
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Menge:
80 Assays
Preis (EUR)
211,00
Each
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Das LIVE/DEAD™ Fixable Near-IR Dead Cell Stain Kit dient zur Bestimmung der Viabilität von Zellen vor der Fixierung und Permeabilisierung, die für die Färbung intrazellulärer Antikörper oder vor der Beseitigung biogefährlicher Materialien mittels Formaldehyd-Fixierung erforderlich ist. Dieses Kit wurde für die Verwendung mit einem Durchflusszytometer mit rotem Laser optimiert und validiert.

• Stabil — Farbstoffe werden in separaten Fläschchen gefriergetrocknet, um Stabilität zu erhalten

• Robust — Färbemuster ist vor und nach der Fixierung gleich

• Helles Signal — Ermöglicht eine einfache Unterscheidung zwischen lebenden/toten Zellen in einem Kanal

Sehen Sie sich eine Auswahlanleitung für alle fixierbaren Viabilitätfarbstoffe für die Durchflusszytometrie an.

Stabil
Im Gegensatz zu Produkten, die als Lösung verkauft werden, wurden die LIVE/DEAD™Fixable Near-IR Stain praktisch in 40 Testfläschchen verpackt, um eine langanhaltende Stabilität und Leistung des Farbstoffs zu gewährleisten. Amin-reaktive Farbstoffe in Lösung verlieren ihre Wirksamkeit nach kurzer Zeit. Es ist daher empfehlenswert, das Röhrchen nach der Rehydrierung komplett aufzubrauchen. Falls dies nicht möglich ist, aliquotieren Sie die Röhrchen in kleinere Volumen, und bewahren Sie diese bei -80 °C unter Vermeidung von wiederholtem Einfrieren und Auftauen auf.

Robust
Farbstoffe, die zur Kenntlichmachung toter Zellen eingesetzt werden, können nach bestimmten Behandlungsverfahren an Empfindlichkeit verlieren. Dazu gehören die Behandlung mit Fixiermitteln wie Formaldehyd oder Fixiermethoden, die auf Ethanol basieren und die für intrazelluläre Phosphorylierungsstudien benötigt werden. Der LIVE/DEAD™ Fixable Near-IR Stain ist ein Amin-reaktiver Farbstoff, der kovalent an intrazelluläre und extrazelluläre Amine bindet. Das Färbungsmuster bleibt nach der Formaldehyd-Fixierung erhalten.

Optimale Helligkeit
Der LIVE/DEAD™Fixable Near-IR Stain wurde wegen seiner fluoreszierenden Eigenschaften ausgewählt und erzeugt nach Anregung durch einen rot-Laser ein helles Signal. Der Nah-Infrarot-fluoreszierende reaktive Farbstoff hat ein Erregungsmaximum von ∼633 nm und eignet sich ideal für den Einsatz mit dem roten oder HeNe-Laser mit einer Emission von ∼750 nm. Da lebende und tote Zellen mit einem einzigen Farbstoff und einem einzigen Kanal eines Durchflusszytometers diskriminiert werden können, ist er ideal für mehrfarbige Experimente.

Funktionsweise
In Zellen mit beeinträchtigten Membranen reagiert der Farbstoff mit freien Aminen sowohl im Zellinneren als auch auf der Zelloberfläche, was zu einer intensiven fluoreszierenden Färbung führt. Bei lebensfähigen Zellen ist die Reaktivität des Farbstoffs auf die Amine der Zelloberfläche beschränkt und die Fluoreszenz weniger intensiv. Der Unterschied zwischen den Intensitäten beträgt in der Regel mehr als das 50-Fache zwischen lebenden und toten Zellen, sodass eine Unterscheidung problemlos möglich ist.

Erhältliche Farben
LIVE/DEAD™ Fixable Dead Cell Stains sind in unterschiedlichen Farben erhältlich, um eine flexible Kombination mit anderen Farbstoffen zu ermöglichen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
ZellpermeabilitätNicht zellgängig
ZelltypEukaryotische Zellen
BeschreibungLIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem Nahinfrarot-Totzellenfärbemittel zur Anregung mit 633 oder 635 nm
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypLive/DEAD™ FixableNear-IR Totzellenfarbstoff
FormFest
FormatRöhrchen
Menge80 Assays
VersandbedingungRaumtemperatur
LöslichkeitDMSO (Dimethylsulfoxid)
FarbeNahes IR
Emission750 nm
Excitation Wavelength Range633 nm
Zur Verwendung mit (Anwendung)Viabilitätsassay
Zur Verwendung mit (Geräte)Durchflusszytometer
ProduktlinieLIVE/DEAD
ProdukttypFärben
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Enthält 5 Fläschchen LIVE/DEAD™ Fixierbares Totzellenfärbemittel und 500 μl DMSO.

Bei -20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How do I prepare dead cell controls for LIVE/DEAD cell viability assays?

There are two easy options. One is to heat-inactivate the cells by placing at 60 degrees C for 20 minutes. The second is to subject the cells to 70% ethanol. Alcohol-fixed cells can be stored indefinitely in the freezer until use, potentially up to several years.

Centrifuge cells, pellet, and remove supernatant.
Fix cells: Add 10 mL ice cold 70% ETOH to a 15 mL tube containing the cell pellet, adding dropwise at first while vortexing, mix well.
Store in freezer until use.
When ready to use, wash twice and resuspend in buffer of choice.

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Which cell viability kits are compatible with fixation?

The LIVE/DEAD Fixable kits for flow cytometry analysis are compatible with fixation. These kits use amine-reactive cell-impermeant dyes that stain the cell surface of live cells and also the cytosol of dead cells-live cells are dim and dead cells are bright. Since the dye is covalently bound to the cells, it will be retained after fixation. Unfortunately, this method does not work well for imaging-based assays, as all cells are stained and it is difficult to distinguish bright dead cells from dim live cells with a microscope. Ethidium monoazide (EMA; Cat No. E1374) is a cell impermeant nucleic acid stain that can be applied to live cultures and stains only dead cells. After incubation and washing away unbound dye, the cells can be exposed to light to photoactivate EMA to crosslink to dead cell DNA. After crosslinking to dead cell DNA, the samples may be fixed and permeabilized. Image-IT DEAD Green Viability Stain (Cat. No. I10291) for imaging and high-content screening (HCS) analysis is a live-cell impermeant DNA binding dye that is compatible with fixation and permeabilization with good retention up to 48 hours. We also have a LIVE/DEAD Reduced Biohazard Cell Viability Kit (Cat. No. L7013) for imaging and flow analysis that contains two DNA binding dyes, SYTO 10 and Dead Red, that are sufficiently retained to be analyzed soon after 4% glutaraldehyde fixation.
Note: In general, DNA-binding dyes and calcein AM are not compatible with fixation, as these dyes are not covalently bound to components of the cell and will thus slowly diffuse out of cells after fixation, gradually staining all cells as dead.

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