Rhod-2, AM, permeable a las células
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Rhod-2, AM, permeable a las células

Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Tienen usosMás información
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Número de catálogoCantidad
R12441mg
R1245MP20 x 50 μg
Número de catálogo R1244
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1mg
Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Tienen usos en muchas investigaciones de señalización de calcio, incluyendo la medición de Ca2+ en células y tejidos que tienen altos niveles de autofluorescencia y también para detectar la liberación de Ca2+ generada por fotorreceptores y quelantes fotoactivables. Las células se pueden cargar como éster AM de estos indicadores calcio mediante la adición del indicador disuelto directamente a las placas que contienen las células cultivadas. La señal de fluorescencia de estas células se mide generalmente mediante microscopía de fluorescencia.

Especificaciones del indicador de calcio (éster AM):
• Etiqueta (Ex/Em de forma unida a Ca2+): Rhod-2 (552/581 nm)
• Aumento de la intensidad de fluorescencia al unirse con Ca2+: >100 veces
• Kd para Ca2+ en ausencia de Mg2+, en tampón: ∼570 nM
• Presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+ con poco cambio en la longitud de onda


Uso de TPEN para controlar cationes de metales pesados
Además, los indicadores basados en BAPTA, como estos, se unen a varios cationes de metales pesados (por ejemplo, Mn2+, Zn2+, Pb2+) con mucha mayor afinidad que a Ca2+. Las perturbaciones en las mediciones de calcio causadas por la presencia de estos iones pueden controlarse usando el quelante seleccionador de metales pesados TPEN.

Más opciones para indicadores de calcio fluorescentes
Ofrecemos una amplia selección de indicadores de calcio Molecular Probes™ para su uso en diversos escenarios experimentales, por ejemplo, versiones de dextrano para reducir las fugas y la compartimentación, y conjugados BAPTA para detectar perturbaciones transitorias de calcio de gran amplitud. Para obtener más información, consulte Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light—Section 19.3 (Indicadores de Ca2+ fluorescentes excitados mediante luz visible, sección 19.3) en el manual de Molecular Probes™.

Para obtener información sobre indicadores de Ca2+ excitables mediante UV, indicadores de Ca2+ basados en proteínas, conjugados de indicadores de Ca2+ e indicadores basados en fluorescencia de otros iones metálicos (es decir, Mg2+, Zn2+) consulte Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and Other Metal Ions—Chapter 19 (Indicadores para Ca2+, Mg2+, Zn2+ y otros iones metálicos, capítulo 19) en el manual de Molecular Probes™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteA base de colorantes fluorescentes
Cantidad1mg
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Viabilidad y proliferación celulares
Para utilizar con (equipo)Microscopio de fluorescencia
Tipo de productoTinción
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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What are the excitation/emission maxima for Rhod-2, AM, cell permeant (Cat. No. R1244, R1245MP)?

Rhod-2, AM, cell permeant (Cat. No. R1244, R1245MP) exhibits >100-fold increase in fluorescence intensity upon binding Ca2+. The excitation/emission maxima for Rhod-2, AM, cell permeant when bound to Ca2+ are 552/581 nm.

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Citations & References (140)

Citations & References
Abstract
Functional implications of calcium permeability of the channel formed by pannexin 1.
Authors:Vanden Abeele F,Bidaux G,Gordienko D,Beck B,Panchin YV,Baranova AV,Ivanov DV,Skryma R,Prevarskaya N
Journal:The Journal of cell biology
PubMed ID:16908669
Although human pannexins (PanX) are homologous to gap junction molecules, their physiological function in vertebrates remains poorly understood. Our results demonstrate that overexpression of PanX1 results in the formation of Ca(2+)-permeable gap junction channels between adjacent cells, thus, allowing direct intercellular Ca(2+) diffusion and facilitating intercellular Ca(2+) wave propagation. More ... More
Spatially organised mitochondrial calcium uptake through a novel pathway in chick neurones.
Authors:Coatesworth W, Bolsover S
Journal:Cell Calcium
PubMed ID:16338004
'A brief depolarisation of chick sensory neurones evokes a calcium increase in mitochondria that peaks 1-2s after the depolarisation event and then decays over tens of seconds. Peripheral mitochondria take up more calcium than do central ones, even when the cytosolic calcium increase is spatially homogeneous. The calcium influx into ... More
Feedback inhibition of sodium/calcium exchange by mitochondrial calcium accumulation.
Authors:Opuni K, Reeves JP
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:10801871
'Chinese hamster ovary cells expressing the bovine cardiac Na(+)/Ca(2+) exchanger were subjected to two periods of 5 and 3 min, respectively, during which the extracellular Na(+) concentration ([Na(+)](o)) was reduced to 20 mm; these intervals were separated by a 5-min recovery period at 140 mm Na(+)(o). The cytosolic Ca(2+) concentration ... More
Hydrolysis of Ca2+-sensitive fluorescent probes by perfused rat heart.
Authors:Scaduto RC, Grotyohann LW
Journal:Am J Physiol Heart Circ Physiol
PubMed ID:14561682
'Rat hearts were loaded with the fluorescent calcium indicators fura 2, indo 1, rhod 2, or fluo 3 to determine cytosolic calcium levels in the perfused rat heart. With fura 2, however, basal tissue fluorescence increased above anticipated levels, suggesting accumulation of intermediates of fura 2-AM deesterification. To examine this ... More
Nitric oxide-dependent mitochondrial biogenesis generates Ca2+ signaling profile of lupus T cells.
Authors:Nagy G, Barcza M, Gonchoroff N, Phillips PE, Perl A
Journal:J Immunol
PubMed ID:15356113
'Abnormal T cell activation and cell death underlie the pathology of systemic lupus erythematosus. Although mitochondrial hyperpolarization (MHP) represents an early and reversible checkpoint of T cell activation and apoptosis, lupus T cells exhibit persistent MHP. NO has recently been recognized as a key signal of mitochondrial biogenesis and mediator ... More