Lipofectamine™ Reagenz zur Stammtransfektion
Pair with TrueCut Cas9 Protein v2 to help achieve higher editing efficiency.
Lipofectamine™ Reagenz zur Stammtransfektion
Invitrogen™

Lipofectamine™ Reagenz zur Stammtransfektion

Das Lipofectamine Transfektionsreagenz für Stammzellen wurde dahingehend optimiert, dass es maximale Effizienz bei minimaler frühzeitiger Differenzierung in einer Vielzahl vonWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
STEM000080,75 mL
STEM000151,5 ml
STEM000030,3 ml
STEM000010,1 mL
Katalognummer STEM00008
Preis (EUR)
610,00
0.75 mL
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0,75 mL
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Das Lipofectamine Transfektionsreagenz für Stammzellen wurde dahingehend optimiert, dass es maximale Effizienz bei minimaler frühzeitiger Differenzierung in einer Vielzahl von Stammzellen aufweist. Es kann DNA-, RNA- und Cas9-Ribonukleoprotein-Komplexe (RNP) gemeinsam freigeben. Das Lipofectamine Stem Reagenz ist mit einer Vielzahl von Mediensystemen kompatibel, einschließlich nährbodenfreier Medien, und erleichtert und vereinfacht so den Arbeitsablauf für Stammzellkulturen. Forscher können eine Transfektionseffizienz von 80 % oder mehr in pluripotenten Stammzellen (PSCs) und neuronalen Stammzellen (NSCs) und von bis zu 45 % in meschenchymalen Stammzellen (MSCs) erzielen.

Die Transfektion von Stammzellen ohne Hemmung der Zellviabilität und des Zellwachstums kann aufgrund der Empfindlichkeit dieser Zellen eine Herausforderung darstellen. Das Lipofectamine Stammreagenz weist geringe Toxizität auf und benötigt nur geringe Mengen an Nukleinsäure. Die Stammzellen bleiben gesund und können sich weiter vermehren, ohne Differenzierung auszulösen. Das Lipofectamine Stammreagenz zeigt folgende Eigenschaften:

Überragende Leistung – Eine um bis zu das 3-Fache höhere Effizienz bei iPSCs, hESCs, NSCs und MSCs im Vergleich zu anderen Reagenzien
Vielseitig – Ein Reagenz für DNA, RNA, Cas9-protein und Co-Transfektion
Zellschonend – Hält Zellproliferation aufrecht, ohne eine Differenzierung zu induzieren
Flexibel – Transfiziert Zellen in Adhäsion oder Suspension – Alternative zur Elektroporation

Hocheffizientes Gen-Editing in Stammzellen
Gen-Editing-Anwendungen erfordern in der Regel die Fähigkeit, DNA, RNA und/oder Proteine gemeinsam in die Zellen freizugeben. Das Lipofectamine Transfektions-Stammreagenz wurde entwickelt, um CRISPR/Cas9-Komplexe gemeinsam in menschliche Stammzellen für ein hocheffizientes Gen-Editing freizugeben. Mit diesem Reagenz können große DNA-Plasmide wie All-in-One-CRISPR/Cas9-Vektoren transfiziert und eine Reihe von RNAs, z. B. große Cas9-mRNA mit tracr/crRNA-Komplexen oder Single Guide RNA (sgRNA), und Proteine wie Cas9-Protein in Kombination mit tracr/crRNA oder sgRNA freigegeben werden.

Eine Alternative zur Elektroporation mit geringer Toxizität
Die Transfektion von Stammzellen mithilfe von Elektroporationsverfahren kann schwierig und umständlich sein. Elektroporationsprotokolle empfehlen eine Zellsuspensionskultur, um maximale Effizienz und minimale Toxizität zu gewährleisten. Mit dem Reverse Transfection Protocol erweist sich das Lipofectamine Transfektions-Stammreagenz als effektive und weniger toxische Alternative zur Elektroporation für Stammzellen. Es erfordert eine nur geringe Menge an Nukleinsäure für maximale Transfektionseffizienz, die mit der Elektroporation vergleichbar ist, und unterstützt gleichzeitig die kontinuierliche Proliferation ohne Differenzierung.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
KlassifikationOhne Stoffe tierischen Ursprungs
Zur Verwendung mit (Anwendung)Transfektion
ProduktlinieLipofectamine
ProdukttypTransfektionsreagenz
Menge0,75 mL
Serum-kompatibelNein
VersandbedingungWet Ice
ZelltypStammzelle
ProbentypZellen
Transfection TechniqueLipid-basierte Transfektion
Unit Size0.75 mL
Inhalt und Lagerung
Gekühlt (2 bis 8°C) und lichtgeschützt lagern

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

With Lipofectamine Stem Transfection Reagent, how can I improve the transfection efficiency in my stem cells?

To obtain the highest percent of stem cells transfected with Lipofectamine Stem Transfection Reagent, we highly recommend that you follow cell culture conditions that promote formation of a monolayer versus clumps of cells. If the density of your stem cells is greater than 50% or they are being grown as colonies in other media, more Lipofectamine Stem Transfection Reagent may improve transfection efficiency. For additional details, please refer to the Lipofectamine Stem Transfection Reagent protocol pertinent to your cell type and media on the product page (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/STEM00008?ICID=search-product), under Documents, Product Literature.

Can I co-transfect plasmid and Cas9 protein (RNP) with Lipofectamine Stem Transfection Reagent?

Yes. Lipofectamine Stem Transfection Reagent can be used to co-deliver multiple payloads, including DNA, mRNA, and Cas9 protein (RNP) into stem cells.

At what density should I plate my stem cells before transfecting them using Lipofectamine Stem Transfection Reagent?

Cell confluency can impact the amount of Lipofectamine Stem Transfection Reagent that is needed for efficient transfection. Stem cells that are near confluency do not transfect well. Plating density should be such that cells are not overgrown 24 hours after transfection. To obtain the highest percent of stem cells transfected, we highly recommend that you dissociate both colony type and monolayer cultures into small clumps of 3-5 cells. If you are growing human pluripotent stem cells in a 24-well plate in Essential 8 Medium on Vitronectin, plate the cells to achieve 30-60% confluency on the day of transfection. For additional details, please refer to the Lipofectamine Stem Transfection Reagent protocol pertinent to your cell type and media on the product page (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/STEM00008?ICID=search-product), under Documents, Product Literature.

Can I use Lipofectamine Stem Transfection Reagent to transfect neural stem cells (NSCs)?

Yes. Lipofectamine Stem Transfection Reagent can be used to transfect a wide range of stem cell types, while supporting continued proliferation without inducing differentiation. It is our recommended solution for transfecting neural stem cells.

I used Lipofectamine Stem Transfection Reagent. Why are only the outer cells of my stem cell colonies transfected ?

For cells that have aggregated into large colonies, transfection attempts may result in ONLY the outer cells of the colonies being successfully transfected. Transfection in suspension at the time of passaging and re-plating can maximize access of the reagent to all the cells and increase transfection efficiency. We recommend cell culture conditions that promote formation of a monolayer versus clumps of cells. To avoid cell aggregates that form large colonies, gently dissociate colonies to small clumps of 3-5 cells to promote efficient transfection. Follow recommended seeding densities for the cell culture medium and passaging reagents used so that cells are at the recommended starting confluency of 30-60% at the time of transfection and have room to grow for 24-48 hours during transfection.