Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie
Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie
Invitrogen™

Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie

Beurteilen Sie die Zellviabilität mit Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V und konjugierten Fluoreszenzfarbstoffen wie Alexa Fluor 488, FITC, PI, PE, APC und SYTOX Green.
Have Questions?
Ansicht ändernbuttonViewtableView
KatalognummerMengeMarker oder Farbstoff
V1324150 AssaysAlexa Fluor 488, Propidiumiodid
V132421 KitFITC, Propidiumiodid
V351121 KitSYTOX Green, R-PE
V351131 KitSYTOX Green, APC
V13245250 AssaysAlexa Fluor 488, Propidiumiodid
Katalognummer V13241
Preis (EUR)
576,00
50 assays
Zum Warenkorb hinzufügen
Menge:
50 Assays
Marker oder Farbstoff:
Alexa Fluor 488, Propidiumiodid
Preis (EUR)
576,00
50 assays
Zum Warenkorb hinzufügen
Unterscheiden Sie ganz einfach zwischen lebenden, toten und apoptotischen Zellen während der Durchfluss-Zytometrie mit unseren Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V-Konjugaten, einschließlich Alexa Fluor 488, FITC, Propidium-Iodid, PE, APC und SYTOX Green. Diese Konjugate unterscheiden lebende, tote oder apoptotische Zellen durch verschiedene Färbemittel, was für die Bestätigung der Zellviabilität und Apoptose durch multiparametrische Studien unerlässlich ist.
Die Verwendung von Totzellen-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie bietet mehrere Vorteile bei Tests für Zellviabilität:

Hervorragende Helligkeit
Im Gegensatz zu anderen Annexin V-Kits mit niedrigeren Protein-Konzentrationen oder Reinheitsgraden ist das Alexa Fluor 488 Annexin V-Konjugat für die Durchflusszytometrie optimiert und bietet die stärkste Trennung zwischen apoptotischen und lebenden Zellen. Der Alexa Fluor 488 Farbstoff ist ein überragender, grün fluoreszierender Farbstoff mit einem Spektrum, das dem von Fluorescein (FITC) ähnelt.

Hohe Bindungseffizienz
Annexin V-Konjugate werden aus hochreinem Cys-Annexin hergestellt, was zu einer höheren Bindungseffizienz führt und so wiederum zu einer sehr genauen Charakterisierung des Apoptose-Vorgangs.

Multiparametrisch
Viele Publikationen verlangen mindestens zwei verschiedene Verfahren, um Zellen als apoptotisch zu identifizieren. Dieses Multiparameter-Kit erkennt Phosphatidylserin (PS) an der zytoplasmatischen Oberfläche der Zellmembran und die Membranintegrität mittels Propidiumiodid.

Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V Alexa Fluor 488 &PI
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V Alexa Fluor 488 & Propidiumiodid (PI) (V13241, V13245) wird in der Durchfluss-Zytometrie zur Messung der frühen Apoptose verwendet, indem die Expression von Phosphatidylserin (PS) und die Membrandurchlässigkeit erkannt wird. Wenn Zellen mit Annexin V und Propidiumiodid angefärbt werden, fluoreszieren apoptotische Zellen mit PS-Expression grün (was im FITC-Kanal erkannt werden kann) und hellrot. Tote oder nekrotische Zellen fluoreszieren leuchtend rot und nicht grün, während lebende Zellen weder grün noch rot fluoreszieren.

Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V PE und SYTOX Green
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V PE und SYTOX Green erkennt die PS-Externalisierung in apoptotischen Zellen während der Durchfluss-Zytometrie mittels rekombinantem Annexin V, das mit dem orangefarbenen fluoreszierenden Phycobiliprotein R-PE konjugiert ist, während abgestorbene Zellen mit dem Nukleinsäure-Farbstoff SYTOX Green nachgewiesen werden. Nach der Behandlung mit beiden Sonden fluoreszieren apoptotische Zellen orange, tote Zellen grün und lebende Zellen wenig oder gar nicht. Diese Populationen lassen sich mit einem 488 nm-Laser-Durchflusszytometer leicht in den 530/30 nm und 585/42 nm Bandpassfiltern unterscheiden.

Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V APC und SYTOX Green
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V APC und SYTOX Green erkennt die PS-Externalisierung in apoptotischen Zellen während der Durchfluss-Zytometrie mittels rekombinantem Annexin V, das mit durch roten Laserstrahl angeregtes Allophycocyanin konjugiert ist, während abgestorbene Zellen mit dem Nukleinsäure-Farbstoff SYTOX Green behandelt werden. Apoptotische Zellen werden durch Annexin V-Bindung an externalisierte PS nachgewiesen. Lebende Zellen zeigen wenig oder keine Fluoreszenz, apoptotische Zellen zeigen rote Fluoreszenz und sehr wenig grüne Fluoreszenz, und späte apoptotische Zellen zeigen eine höhere Fluoreszenz von Rot und Orange. Diese Populationen lassen sich problemlos mit Hilfe eines Durchflusszytometers unterscheiden, das sowohl über eine Anregungsquelle von 488 nm als auch über eine Anregungsquelle von 633 nm verfügt (ein Argon-Ionen-Laser und ein HeNe-Laser).

Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V FITC und PI
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V FITC und PI erkennt die PS-Externalisierung in apoptotischen Zellen mittels rekombinantem Annexin V, das mit mit grün-fluoreszierendem FITC-Färbemittel und toten Zellen mit PI konjugiert ist. Nekrotische Zellen, die sich mit PI färben, zeigen eine rote Fluoreszenz. Nach der Behandlung mit beiden Sonden fluoreszieren apoptotische Zellen grün, tote Zellen rot und grün sowie lebende Zellen wenig oder gar nicht.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
BeschreibungTotzell-Apoptose-Kit mit Annexin V Alexa Fluor 488 und Propidiumiodid (PI)
Anregung/Emission499, 535/521, 617
Durchflusszytometer-Laserlinien488
Zur Verwendung mit (Geräte)Fluoreszenzmikroskop, Durchflusszytometer
KitinhaltEnthält 1 Fläschchen Annexin V, Alexa Fluor 488 Konjugat (250 µl), 1 Fläschchen Propidiumiodid (PI, 100 µl) und 1 Flasche Annexin-Bindungspuffer (5x Lösung, 15 ml).
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor 488, Propidiumiodid
ProdukttypApoptose-Nachweiskit
Menge50 Assays
VersandbedingungNasseis
Unit Size50 assays
Inhalt und Lagerung
Im Kühlschrank (2  bis 8 °C) aufbewahren und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

When using Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry, what does a PI+ only population (hence Annexin V negative) correspond to?

These products are cells that died without undergoing apoptosis. A PI+ only population could be either a result of experimental condition or sample preparation.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.

Zitierungen und Referenzen (22)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
H2AX phosphorylation within the G1 phase after UV irradiation depends on nucleotide excision repair and not DNA double-strand breaks.
Authors:Marti TM, Hefner E, Feeney L, Natale V, Cleaver JE
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16788066
'The variant histone H2AX is phosphorylated in response to UV irradiation of primary human fibroblasts in a complex fashion that is radically different from that commonly reported after DNA double-strand breaks. H2AX phosphorylation after exposure to ionizing radiation produces foci, which are detectable by immunofluorescence microscopy and have been adopted ... More
Aberrant T cell differentiation in the absence of Dicer.
Authors:Muljo SA, Ansel KM, Kanellopoulou C, Livingston DM, Rao A, Rajewsky K
Journal:J Exp Med
PubMed ID:16009718
'Dicer is an RNaseIII-like enzyme that is required for generating short interfering RNAs and microRNAs. The latter have been implicated in regulating cell fate determination in invertebrates and vertebrates. To test the requirement for Dicer in cell-lineage decisions in a mammalian organism, we have generated a conditional allele of dicer-1 ... More
Nuclear relocation of the nephrin and CD2AP-binding protein dendrin promotes apoptosis of podocytes.
Authors:Asanuma K, Campbell KN, Kim K, Faul C, Mundel P
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:17537921
'Kidney podocytes and their slit diaphragms (SDs) form the final barrier to urinary protein loss. There is mounting evidence that SD proteins also participate in intracellular signaling pathways. The SD protein nephrin serves as a component of a signaling complex that directly links podocyte junctional integrity to actin cytoskeletal dynamics. ... More
An anti-transferrin receptor-avidin fusion protein exhibits both strong proapoptotic activity and the ability to deliver various molecules into cancer cells.
Authors:Ng PP, Dela Cruz JS, Sorour DN, Stinebaugh JM, Shin SU, Shin DS, Morrison SL, Penichet ML
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:12149472
'We have developed an antibody fusion protein (anti-rat TfR IgG3-Av) with the ability to deliver different molecules into cancer cells. It consists of avidin genetically fused to the C(H)3 region of a human IgG3 specific for the rat transferrin receptor. It forms strong, noncovalent interactions with biotinylated molecules such as ... More
Protein kinase Cepsilon activates protein kinase B/Akt via DNA-PK to protect against tumor necrosis factor-alpha-induced cell death.
Authors:Lu D, Huang J, Basu A
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:16785234
'We have previously shown that protein kinase Cepsilon (PKCepsilon) protects breast cancer cells from tumor necrosis factor-alpha (TNF)-induced cell death. In the present study, we have investigated if the antiapoptotic function of PKCepsilon is mediated via Akt and the mechanism by which PKCepsilon regulates Akt activity. TNF caused a transient ... More