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pLenti6.2-GW/EmGFP Expression Control Vector
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Invitrogen™

pLenti6.2-GW/EmGFP Expression Control Vector

Der Vivy Colors™ pLentiV6.2-GW⁄EmGFP-Expressions-Kontrollvektor ist ein ViraPower™ lentiviraler Vektor für die Positivkontrolle, der smaragdgrün fluoreszierendes Protein (EmGFP) enthält. Er wurdeWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
V36920
auch als V369-20 bezeichnet
Je 1
Katalognummer V36920
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Preis (EUR)
1.614,00
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Der Vivy Colors™ pLentiV6.2-GW⁄EmGFP-Expressions-Kontrollvektor ist ein ViraPower™ lentiviraler Vektor für die Positivkontrolle, der smaragdgrün fluoreszierendes Protein (EmGFP) enthält. Er wurde zur Verwendung mit den ViraPower™ lentiviralen Expressionssystemen als Positivkontrolle entwickelt, um den Nachweis höherer EmGFP-Fluoreszenzwerte nach Transerinfektion in 293FT-Zellen zu ermöglichen, als Titerkontrolle zur Herstellung eines EmGFP-exprimierenden Lentivirus-Bestands und als Transduktionskontrolle nach Transduktion sowohl in teilenden als auch in nicht teilenden Säugetierzellen. Der Vektor verfügt über den CMV-Promotor zur Förderung der konstitutiven Expression des EmGFP und den PGK-Promotor zur Förderung der langfristigen, persistenten Expression des stabilen Blasticidin-Auswahlmarkers. Dies ist kein Klonierungsvektor.

Vorteile
• Optimierung der viralen Transduktionseffizienz
• Optimierung der 293FT-Transfektion
• 2-Tage-Titer des funktionellen Virus mit EmGFP

Hauptmerkmale
• Humaner Cytomegalievirus (CMV): sofortiger Frühpromotor zur Kontrolle der High-Level-Expression des EmGFP
• PKG-Promoter für die Expression von Blasticidin-Selektionsmarkierung

Das Kit enthält:
spLenti6.2-GW⁄EmGFP-Vektor

Passende SKUs
• 293FT-Zelllinie (R70007; R70007)
• ViraPower™ lentivirales Support-Kit (K4970-00)
• ViraPower™ lentivirale Verpackungsgemisch (K4975-00)
• Lipofectamin™ 2000 (11668-019; 11668-027)

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Konstitutives oder induktives SystemKonstitutiv
LiefertypLentiviral
Zur Verwendung mit (Anwendung)Reporter-Assays, virale Expression
ProdukttypLentivirus-Expressionsvektor
MengeJe 1
Reporter-GenGFP (EmGFP)
Selektionsmittel (eukaryotisch)Blasticidin
Selektionsmarker PromoterPGK-Promotor
VektorpLenti
KlonierungsmethodeGateway™
ProduktlinieGateway, ViraPower, Vivid Colors
PromoterCMV
ProteinmarkierungNicht markiert
Unit Size1 each
Inhalt und Lagerung
pLenti6.2-GW⁄EmGFP-Vektor: 20 µg Kontrollvektor werden in Lösung als 40 µl von 0,5 µg⁄µgl in 10 mM Tris–HCl, 1 mM EDTA, pH 8,0 geliefert. Bei –20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I used your pLenti6.2-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. What should I do?

This can happen due to excess blasticidin used during selection. Determine the antibiotic sensitivity of your cell line by performing a kill curve. Use the minimum antibiotic concentration required to kill your untransduced cell line.

I used your pLenti6.2-GW/EmGFP Control Vector and got no expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. Can you please help?

Promoter silencing or incorrect filter used/detection parameters for flow cytometer are incorrect could lead to no epxression of EmGFP after stable transduction. Screen for multiple antibiotic-resistant clones and select the one with the highest expression levels. Make sure the correct filter is used as well as the FITC detection parameters.

I used your pLenti6.2-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after transient transduction into my cell line. Can you please help?

Poor expression could result from low transduction efficiency, too low of a MOI, or cells harvested too soon after tranduction. Ensure that cells are tranduced in the presence of Polybrene reagent. Check the MOI and/or use a higher MOI, and do not harvest cells until 48-72 hrs post-tranduction.

I used your pLenti6.2-GW/EmGFP Control Vector and got no EmGFP-positive cells after titering. What could have happened?

Here are some possible causes and solutions:

- Incorrect filter or incorrect detection parameters for flow cytommetry; make sure you are using a FITC or Omega XF100 filter set on yoru inverted fluorescence microscope or the FITC detection parameters on your flow cytometer.
- Viral stock stored incorrectly; aliquot and store at -80 degrees C, do not freeze/thaw more than 3 times.
- Polybrene reagent not included during transduction; transduce pLenti6.2-GW/EmGFP into cells in the presence of Polybrene reagent
- Too soon to see EmGFP expression; wait 4 days post-tranduction

How large of a PCR product can I recombine with a pDONR vector via BP cloning? Does the same apply for TOPO-adapted Entry vectors?

There is no theoretical limit to insert size for a BP reaction with a pDONR vector. Maximum size tested in-house is 12 kb. TOPO vectors are more sensitive to insert size and 3-5 kb is the upper limit for decent cloning efficiency.

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