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Dynabeads™ Protein G - for oem / Industrial use only

Las partículas Dynabeads™ con proteína G acopladas a su superficie permiten la purificación a pequeña escala de la mayoría deMás información
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Número de catálogoCantidad
1000550 mL
Número de catálogo 10005
Precio (USD)
-
Cantidad:
50 mL
Las partículas Dynabeads™ con proteína G acopladas a su superficie permiten la purificación a pequeña escala de la mayoría de las inmunoglobulinas de mamíferos (Ig). La cantidad de Ig capturada depende de la concentración de Ig en la muestra inicial y del tipo y fuente de la Ig.

Las partículas Dynabeads™ con proteína G se utilizan ampliamente para la purificación de IgG a pequeña escala y el etiquetado de anticuerpos, la inmunoprecipitación (IP), la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y los aislamientos de proteínas. La tecnología de separación magnética es rápida y suave, por lo que causa un estrés físico mínimo a sus proteínas diana. Esto permite el aislamiento y la concentración de compuestos lábiles que, de otro modo, podrían disociarse o quedar dañados por las proteasas durante largos tiempos de incubación. Se preserva la conformación de proteínas nativas y los grandes complejos de proteínas intactos. El producto posee altos estándares de la prestigiosa Dynal en cuanto a la reproducibilidad y la capacidad de automatización, al tiempo que mejora la fiabilidad de los ensayos.

Ventajas y características:

  • La suave tecnología magnética basada en tubos le permite aislar complejos de proteínas y proteínas intactas
  • La proteína recombinante acoplada covalentemente a la superficie no contiene sitios de unión a albúmina, evitando así el fondo causado por la copurificación de proteínas contaminantes.
  • No requiere columnas, centrifugaciones ni largos pretratamientos de las muestras. Tecnología magnética escalable y fácil de automatizar.
Aplicaciones:
Purificación de IgG a pequeña escala, inmunoprecipitación (IP), inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y aislamientos de proteínas.

Capacidad de fijación:
La cantidad de Ig capturada depende de la concentración de Ig y Dynabeads™ con proteína G en la muestra inicial. Como guía, 50 µl de Dynabeads™ con proteína G suelen aislar 20 µg de IgG humana de una muestra de 100 µl (volumen total) que contenga 100 µg (1 mg⁄ml) de IgG humana. La unión de Fc predominante permite una óptima orientación de Ig

Información adicional:
Este formato de producto específico es para clientes de gran volumen, disponible para OEM. El producto también está disponible en volúmenes más pequeños para usuarios finales (n.º de cat. 100-03D y 100-04D). Para más información y precios, póngase en contacto con nosotros en:ivd@invitrogen.com

Para uso exclusivo en investigación.No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Concentración30 mg⁄ml, 30 mg/ml
FormatoMicroesferas en suspensión
Compatibilidad de alto rendimientoCompatible con alto rendimiento
Tipo de ligandoProteína G
Línea de productosDYNAL, Dynabeads
Cantidad50 mL
Diámetro (métrico)2,8 μm
Para utilizar con (aplicación)Inmunoprecipitación
Tipo de productoGránulo de proteína G
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
2 °C a 8 °C

Preguntas frecuentes

What should I do if I get low binding to Dynabeads Protein A or Protein G magnetic beads?

Here are a few suggestions to try if you are getting low binding to the Dynabeads protein A/G beads:

-Verify the binding/specificity of your antibody to your antigen, e.g., by ELISA
-Check the binding of your antibodies to the beads; if the antibodies are not captured and bound to the beads, the immunoprecipitation experiment will not work
-If you have used the indirect IP method, try the direct IP method; conversely, if you have used the direct IP method, try the indirect IP method
-Check the amount of beads and sample volume with respect to the capacity of the different beads provided in the package inserts, and increase the amount of beads or the concentration of your antibody during coupling
-Increase the incubation time
-If using a commercially sourced antibody, confirm it is validated for IP
-Try another antibody


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What should I do when the antibodies coupled to Dynabeads Protein A or Protein G magnetic beads have lost function after crosslinking?

Here are a few suggestions you can try:

-Perform the IP without crosslinking the antibody to the beads
-Reduce the amount of crosslinker used to covalently attach the antibody to the beads
-Try a different crosslinker
-To prevent co-elution of antibody, try one of our surface-activated Dynabeads magnetic beads; this allows you to conjugate the antibody to the beads directly, through covalent binding

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What should I do if Protein G is coming off the Dynabeads Protein G magnetic beads?

Here are some suggestions:

-Wash the beads prior to use in 100 mM glycine at a pH of 11.3 followed by a wash with 200 mM glycine at a pH of 2.8 for a very short period. Immediately transfer the beads to PBS with 0.01% Tween-20.
-Perform the elution in the low pH, glycine-based elution buffer recommended in the manual.
-Crosslinking of the antibody to the Protein G also crosslinks the Protein G to itself, which anchors it to the bead surface.

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How can I reduce background using Dynabeads Protein A or Protein G magnetic beads?

Protein G is coated onto hydrophilic beads. If your background is protein-mediated, then we normally suggest having a combination of blocking protein and non-ionic detergent both in the coupling and washing buffer to reduce nonspecific binding

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I was able to immunoprecipitate my protein using Dynabeads magnetic beads before, but after crosslinking the antibody to the beads I get no protein bands on my gel. What could be the problem?

The binding sites of your antibody have likely been altered by the crosslinking. When this occurs, your antibody will show reduced affinity or no affinity to its target antigen. Another consequence of crosslinking can also be increased affinity for unintended (nonspecific) targets. This is always a high risk with crosslinking, and it is a problem easily avoided by choosing another path to covalent antibody coupling. You can try using the Dynabeads Antibody Coupling Kit. This kit is a far superior solution for covalent antibody coupling to Dynabeads magnetic beads (compared to crosslinking with Dynabeads Protein A or G magnetic beads). The Dynabeads Antibody Coupling Kit is compatible with almost any antibody. It is designed specifically for covalent antibody coupling to Dynabeads magnetic beads. Unlike crosslinking, the Dynabeads Antibody Coupling Kit will not alter antibody specificity or affinity.

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