Mezcla maestra de PCR Platinum™ SuperFi II
Mezcla maestra de PCR Platinum™ SuperFi II
Invitrogen™

Mezcla maestra de PCR Platinum™ SuperFi II

La mezcla maestra para PCR Invitrogen Platinum SuperFi II Green (2X) contiene una mezcla de ADN lista para su usoMás información
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Número de catálogoColorN.º de reacciones
12369010Green100 reacciones
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Número de catálogo 12369010
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Color:
Green
N.º de reacciones:
100 reacciones
Pedido a granel o personalizado
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La mezcla maestra para PCR Invitrogen Platinum SuperFi II Green (2X) contiene una mezcla de ADN lista para su uso de ADN polimerasa Platinum SuperFi II, tampón Platinum SuperFi II y dNTP para una configuración de PCR cómoda, así como dos colorantes de seguimiento para la carga directa de productos de PCR en geles. La ADN polimerasa Platinum SuperFi II es una ADN polimerasa de corrección que combina una fidelidad superior con el innovador tampón SuperFi II, lo que permite el recocido de cebadores universal para obtener para obtener los mejores resultados con la PCR. Es ideal para clonación, mutagénesis y otras aplicaciones que se benefician de la precisión de secuencia suprema.

Las características de la mezcla maestra de PCR Platinum SuperFi II Green incluyen:
• Excepcional fidelidad > 300X Taq
• Hibridación del primer universal a 60 °C
• Especificidad, sensibilidad y rendimientos superiores
• Amplificación sólida de dianas difíciles de amplificar (por ejemplo, con pureza inferior a la óptima, contenido de GC ˃ 65 %, requisito de PCR grande)

Platinum SuperFi II DNA Polymerase es una enzima desarrollada con alta capacidad de procesos y mayor resistencia a los inhibidores de PCR. También permite protocolos de ciclo rápido y amplificación de dianas grandes (hasta 20 kb). La tecnología de inicio en caliente Platinum se basa en anticuerpos patentados que inhiben la actividad enzimática hasta el paso inicial de desnaturalización de PCR, evitando la amplificación no específica y la degradación de los cebadores. Esta tecnología también permite la configuración de la reacción a temperatura ambiente y proporciona una mayor sensibilidad y producción.

Debido a la composición única del tampón de PCR SuperFi II, la temperatura de recocido es de 60 °C para la mayoría de los pares de cebadores diseñados siguiendo las reglas generales de diseño. Las moléculas isoestabilizadoras del tampón aumentan la estabilidad dúplex del molde de cebadores durante el paso de recocido y contribuyen a mejorar la especificidad sin necesidad de optimizar la temperatura de recocido para cada par de cebadores. Con la ADN polimerasa Platinum SuperFi II, se pueden realizar ciclos de ensayos de PCR diferentes utilizando el mismo protocolo con una temperatura de recocido de cebadores universal y un paso de extensión seleccionado para el fragmento más largo que se va a amplificar.

Aplicaciones de la ADN polimerasa Platinum SuperFi II:
• PCR de alta fidelidad
• Clonación y subclonación
• Mutagénesis dirigida el sitio
• Amplificación de moldes con gran contenido en GC
• Generación de moldes para secuenciación
• PCR de alto rendimiento
• Amplificación de muestras con pureza subóptima
• PCR larga
• PCR rápida

La mezcla maestra para PCR Platinum SuperFi II también está disponible, que es la misma mezcla maestra sin los tintes de seguimiento.

Obtenga más información sobre los productos de ADN polimerasa Platinum SuperFi II ›
Especificaciones
ColorGreen
Fidelidad (frente a Taq)>300X
Inicio en calienteInicio en caliente integrado
N.º de reacciones100 reacciones
SobranteRomo
PolimerasaADN polimerasa Platinum SuperFi II
Tipo de productoMezcla maestra de PCR
Cantidad100 reactions
Formato de reacciónMezcla maestra o SuperMix
Condiciones de envíoHielo seco
Tamaño (producto final)20 kb o menos
Concentración2X
Para utilizar con (aplicación)Hot-start PCR, High-fidelity PCR
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Velocidad de reacciónFast
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 2 x 1,25 ml de mezcla máster de PCR Platinum SuperFi II Green
• 2 x 1,25 ml de agua, sin nucleasas

Suficiente para 100 reacciones de 50 µl

Preguntas frecuentes

How much volume of the Platinum SuperFi II PCR Master Mix (2X) or Platinum SuperFi II PCR Green Master Mix (2X) should I use per reaction?

Typically, for a 50 µL PCR reaction, we recommend using 25µµL of the 2X master mix so that its final concentration in the reaction is 1X.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What is the best way to quantify your PCR samples using the Platinum SuperFi II PCR Master Mix, Green (Cat, No. 12369250, 12369010, 12369050)? Is it possible to quantify using Tapestation or a Qubit fluorometer?

The dyes in the Platinum SuperFi II Green PCR Master Mix can interfere with the fluorescent readings on both Qubit fluorometer and Tapestation. To accurately quantify your samples, you should first use a PCR purification kit, such as the GeneJet PCR Purification Kit (Cat. No. K0701), to clean up your samples. Alternatively, you can use the Platinum SuperFi II PCR Master Mix (Cat. No. 12368010) which does not contain the interfering dyes, thus eliminating the need for a purification step.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What are your recommendations when working with long amplicons using Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Good lab practices are important for long fragment amplification. These include using high-quality templates (pure, fresh, and intact) and fresh primer solutions. Reducing primer concentration to 0.2 µM may also improve the results.

Can I use Platinum SuperFi DNA Polymerase cycling protocol and primer annealing temperature with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Yes, Platinum SuperFi II DNA Polymerase works at both universal 60 degrees C annealing temperature and at annealing temperatures calculated with a Tm calculator.

Can I perform TA cloning with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Platinum SuperFi II DNA Polymerase produces blunt-ended PCR products that can be cloned directly into blunt-ended cloning vectors. TA cloning is also possible if 3' dA-overhangs are added after PCR. We recommend purifying the PCR products of Platinum SuperFi DNA Polymerase before adding the overhangs. The procedure for adding 3' dA-overhangs (TA cloning) includes the following steps:
- Purify the PCR product (e.g., with a PCR purification kit or phenol extraction/DNA precipitation). Before adding the overhangs, PCR product must be purified, as the strong proofreading activity of any remaining Platinum SuperFi DNA Polymerase will degrade the added 3' dA-overhangs.
- Perform 3' dA addition with a Taq DNA polymerase.
Reaction components:
Purified PCR product
0.2 mM dATP
1x Taq Buffer
1 U Taq DNA Polymerase
Incubate the reaction for 20 min at 72 degrees C.
- Proceed to TA cloning. For optimal ligation efficiency, we recommend using fresh PCR products, since 3' dA-overhangs can be lost during storage

Citations & References (14)

Citations & References
Abstract
A PCR amplicon-based SARS-CoV-2 replicon for antiviral evaluation.
Authors:Kotaki T, Xie X, Shi PY, Kameoka M
Journal:Sci Rep
PubMed ID:33500537
'The development of specific antiviral compounds to SARS-CoV-2 is an urgent task. One of the obstacles for the antiviral development is the requirement of biocontainment because infectious SARS-CoV-2 must be handled in a biosafety level-3 laboratory. Replicon, a non-infectious self-replicative viral RNA, could be a safe and effective tool for ... More
Engineering SARS-CoV-2 using a reverse genetic system.
Authors:Xie X, Lokugamage KG, Zhang X, Vu MN, Muruato AE, Menachery VD, Shi PY
Journal:Nat Protoc
PubMed ID:33514944
'Reverse genetic systems are a critical tool for studying viruses and identifying countermeasures. In response to the ongoing COVID-19 pandemic, we recently developed an infectious complementary DNA (cDNA) clone for severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). The reverse genetic system can be used to rapidly engineer viruses with desired ... More
The analysis of GSTA1 promoter genetic and functional diversity of human populations.
Authors:Mlakar V, Curtis PH, Armengol M, Ythier V, Dupanloup I, Hassine KB, Lesne L, Murr R, Mlakar SJ, Nava T, Ansari M
Journal:Sci Rep
PubMed ID:33658540
'GSTA1 encodes a member of a family of enzymes that function to add glutathione to target electrophilic compounds, including carcinogens, therapeutic drugs, environmental toxins, and products of oxidative stress. GSTA1 has several functional SNPs within its promoter region that are responsible for a change in its expression by altering promoter ... More
Epigallocatechin-3-gallate Alleviates Vanadium-Induced Reduction of Antioxidant Capacity via Keap1-Nrf2-sMaf Pathway in the Liver, Kidney, and Ovary of Laying Hens.
Authors:Ma Y, Shi Y, Wu Q, Ma W
Journal:Biol Trace Elem Res
PubMed ID:33405082
'This study evaluated the effect of epigallocatechin-3-gallate (EGCG) alleviating the reduction of antioxidant capacity induced by dietary vanadium (V) in the liver, kidney, and ovary of laying hens. Furthermore, Kelch-like ECH-associated protein 1(Keap1)-nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2)-small Maf proteins (sMaf) pathway was explored to reveal the molecular mechanism. ... More
Human Ubiquitin-Specific Peptidase 18 Is Regulated by microRNAs
Authors:Rubino E, Cruciani M, Tchitchek N, Le Tortorec A, Rolland AD, Veli Ö, Vallet L, Gaggi G, Michel F, Dejucq-Rainsford N, Pellegrini S
Journal:Front Genet
PubMed ID:33633774
'Ubiquitin-specific peptidase 18 (USP18) acts as gatekeeper of type I interferon (IFN) responses by binding to the IFN receptor subunit IFNAR2 and preventing activation of the downstream JAK/STAT pathway. In any given cell type, the level of USP18 is a key determinant of the output of IFN-stimulated transcripts. How the ... More