T7 RNA Polymerase

La ARN polimerasa T7 es una ARN polimerasa dependiente del ADN que tiene una alta especificidad para las secuencias promotoras de bacteriófagos T7. La enzima sintetiza grandes cantidades de ARN del ADN insertado en un vector de transcripción secuencia abajo de un promotor T7. Hay disponible un boletín técnico para ARN Polimerasa T7.

Aplicaciones: Síntesis de transcripciones de ARN etiquetadas y sin etiquetar (1).

Fuente: Purificada a partir de E. coli que expresa el gen de la ARN Polimerasa T7 en un plásmido.

Pruebas de rendimiento y calidad: Ensayos de exodesoxirribonucleasa 3´ y 5´, ribonucleasa y mellado de ADN; rendimiento en una reacción de
transcripción

Definición de unidad: Una unidad hidrológica 1 nmol de ribonucleótido en material precipitable en ácido en 1 hora a 37 °C usando un
vector de transcripción T7 como molde.

Condiciones de reacción de la unidad: 40 mM de Tris-HCl (pH 8.0), 25 mM de NaCl, 8 mM de MgCl₂, 2 mM de espermidina-(HCl)₃, 5 mM de DTT, 0,4 mM de ATP, 0,4 mM de CTP, 0,4 mM de GTP, 0,4 mM de UTP, 1 µCi [³H]GTP, 1 µg de Sph i-cut pT7L13 y enzima en 50 µl para 10 min a 37 °C.