Kit de purificación BigDye XTerminator™

El kit de purificación XTerminator™ BigDye es un método rápido y sencillo de purificación para reacciones de secuenciación de ADN que elimina las sales y los terminadores BigDye™ no incorporados.Se acabaron las manchas de tinte.La limpieza se realiza en menos de 40 minutos y requiere menos de 10 minutos de trabajo.

•Elimine el trasvase de líquidos con una sola placa.
•Logre una eliminación completa de las manchas de colorante.
•Estabilice las muestras antes del análisis.
•Mejore el flujo de trabajo de secuenciación.
• Realice protocolos de forma manual o automatizada
• Obtenga resultados rápidos, fiables y reproducibles.

Proceso de purificación simple
Los métodos tradicionales de purificación, como la precipitación con etanol, requieren la adición de varios reactivos junto con los pasos de decantación y centrifugación.El kit de purificación XTerminator™ BigDye requiere la adición de tan solo dos reactivos que pueden añadirse de forma secuencial o mediante premezcla:

• Solución XTerminator™: elimina las sales libres y los terminadores de tinte no incorporados de la reacción posterior a la secuenciación.
• Solución SAM™: mejora el rendimiento de la solución XTerminator™ y estabiliza las reacciones posteriores a la purificación.

El protocolo es muy sencillo (consulte la figura 1):
1.Realice la secuenciación de ciclos con terminadores BigDye™.
2.Después de la secuenciación de ciclos, centrifugue brevemente la placa de reacción y, a continuación, pipetee el volumen correcto de solución SAM™ en cada pocillo de la placa.
3.Pipetee el volumen correcto de solución XTerminator™ en cada uno de los pocillos:
4.Mezcle brevemente el contenedor de la solución XTerminator™ con una mezcladora vorticial.
5.Mediante la punta de una pipeta de gran calibre (se recomiendan puntas de gran calibre), pipetee el volumen correcto de líquido en cada pocillo de la placa.
6.Cierre la placa mediante un sellado térmico o una película adhesiva transparente (n. º⁄de ref. 4306311).Mezcle durante 30 minutos con una mezcladora vorticial (se recomiendan mezcladoras vorticiales para microplacas de 96 pocillos y para microplacas de 384 pocillos) y centrifugue la placa de reacción brevemente.
7.Coloque la placa de reacción en el analizador de ADN Applied Biosystems.Seleccione el módulo y la placa de ejecución.

Excelente recuperación de fragmentos largos
No tendrá que sacrificar la longitud de la secuencia cuando utilice el kit de purificación BigDye XTerminator™.La figura 2 muestra los datos de la unidad de tecnología ADN del instituto Plant Biotechnology Institute (CNR-PBI) en Saskatoon (Canadá).La lectura de la base de Q20=1044 bp.

Recuperación de fragmentos cortos mejorada
Utilice el kit de purificación BigDye XTerminator™ para obtener datos de mayor calidad.La figura 3 muestra una comparación entre el kit de purificación XTerminator™ BigDye y la purificación basada en la precipitación con etanol realizada en la unidad de tecnología del ADN del instituto Plant Biotechnology Institute (CNR-PBI) en Saskatoon (Canadá).El kit de purificación XTerminator™ BigDye ofrece una recuperación de fragmentos cortos de categoría superior.La purificación del etanol produce datos de secuencia dañados por manchas de tinte.

Mayor estabilidad
Las placas de reacción selladas son estables durante 48 horas a temperatura ambiente o durante 10 días a 4 °C. Puede volver a ejecutar la misma muestra en caso de interrupción de la alimentación, fallo de equipo, etc. sin tener que repetir el experimento.Esto aumenta su flexibilidad al cargar una placa de reacción en un instrumento CE.

Módulos de ejecución disponibles
Applied Biosystems proporciona módulos de ejecución descargables para su uso con el kit de purificación BigDye XTerminator™ y el software de recopilación de datos.Estos módulos están concebidos para los analizadores 3100, 3100-Avant (con Data Collection v2.0 o superior), 3130⁄3130xl y 3730⁄3730xl.Los módulos de software para el kit de purificación BigDye XTerminator™ son compatibles con los sistemas operativos Windows™ 2000 y Windows™ XP y están disponibles en nuestra página de descarga de software:

Sistemas integrados Applied Biosystems para el análisis genético ›

Para uso exclusivo en investigación.No apto para uso en procedimientos diagnósticos.