Megaplex™ RT Primers, Rodent Pool B v3.0

Diseñados para optimizar los flujos de trabajo experimentales, los cebadores Megaplex™ RT proporcionan una única solución de reacción al prepararMás información

Número de catálogo	Cantidad
4444292	50 reacciones

Número de catálogo 4444292

Precio (USD)

Cantidad:

50 reacciones

Diseñados para optimizar los flujos de trabajo experimentales, los cebadores Megaplex™ RT proporcionan una única solución de reacción al preparar el ADNc para el análisis de PCR en tiempo real en una tarjeta de microARN de matriz TaqMan®.Rodent Pool B v2.0 contiene RT primers para 306 y 135 microRNAs exclusivos para ratón y rata, respectivamente, además de 4 controles específicos de especies.Los objetivos de microARN representados en este grupo tienden a estar peor caracterizados, más ampliamente expresados y⁄o expresados en un nivel inferior en comparación con el grupo de roedores A. El grupo también se puede utilizar para preparar el ADNc para el análisis en tiempo real utilizando los ensayos individuales de microARN TaqMan®.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Características ecológicasEmbalaje sostenible

N.º de reacciones50 reacciones

CebadorCebadores RT

Línea de productosMegaplex, TaqMan

Tipo de productoPrimer RT

Cantidad50 reacciones

Condiciones de envíoTemperatura ambiente

EspecieRata, ratón

Suficiente para50 reacciones

Para utilizar con (aplicación)RT-PCR

GC-Rich PCR PerformanceBajo

Método de PCRRT-qPCR de 2 paso

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Almacenar a -20 °C.

Preguntas frecuentes

Can Ct's greater than a cut-off be considered valid results?

Yes they can. However, it is important to recognize the true linearity and detection limits of your assay: Ct values above the cut-off can indicate non-specific amplification, unless your NTC is a true- no-target control, and you have run a statistically significant number of replicates. Any results with Ct above the recommended cut-off need to be validated with individual assays on plates.

What is a good Ct cut-off for the TaqMan MicroRNA Array Cards and TaqMan Advanced miRNA Array Cards? In other words, beyond what Ct should I not trust the data?

The typical Ct cut-off on TaqMan Array Cards is 32, which is equivalent to Ct 35 on a plate (10 µl reaction). Previous studies show that if you use pre-amplification, a Ct cut-off of 29 or 30 can be used to reduce numbers of false positives (see Technical Note Optimized protocols for human or rodent microRNA profiling with precious samples). To ensure that you have selected a correct cut-off, you should run replicates of the same sample and use Ct cut-off before you see an increase in the Standard Deviation.

Why does the negative control well show amplification when doing microRNA analysis using Megaplex Primer Pools and TaqMan Array Cards?

Most likely the reagents or the cDNA template are contaminated. Please follow established PCR laboratory best practices.

Why do I have poor reproducibility across technical replicates when doing microRNA analysis using Megaplex Primer Pools and TaqMan Array Cards?

Most likely the reagents were not adequately mixed. Ensure that all samples and reagents are mixed well.

When doing microRNA analysis using Megaplex Primer Pools and TaqMan Array Cards, why are the Ct values for the endogenous controls highly variable across the sample set?

Highly variable values for endogenous controls is most likely due to biological variation. We recommend that you use an alternative endogenous control, such as a non-variable miRNA.

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