Control negativo n.° 1 para mimetizadores de miARN mirVana™
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Control negativo n.° 1 para mimetizadores de miARN mirVana™

Los mimetizadores de miARN son pequeñas moléculas de ARN bicatenario modificadas químicamente diseñadas para unirse e imitar específicamente las moléculasMás información
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Los mimetizadores de miARN son pequeñas moléculas de ARN bicatenario modificadas químicamente diseñadas para unirse e imitar específicamente las moléculas de miARN endógenas y permitir el análisis funcional del miARN mediante la regulación al alza de la actividad del miARN.

Ahora hemos lanzado la segunda generación de mimetizadores miARN, los mimetizadores de miARN mirVana™ que:
• Presentan un efecto máximo y uniforme in vitro en concentraciones bajas
• No son tóxicos
• Ofrecen una excelente especificidad gracias a la exclusiva modificación de la cadena pasajera
• Se dirigen al contenido de Sanger más actualizado
• Se pueden utilizar in vitro e in vivo, y le ofrecen uniformidad a lo largo de todo el proyecto de investigación

Los controles positivos y negativos también están disponibles para su uso junto con mimetizadores de miARN mirVana™ en experimentos de regulación al alza de miARN.

Control negativo n.° 1 para mimetizadores de miARN mirVana™
El control negativo n.° 1 para mimetizador de miARN mirVana™ está diseñado para usarse como control negativo para experimentos con mimetizadores de miARN mirVana™. Para transfectar el control negativo, utilice la misma metodología que emplea para el control positivo (como el control positivo miR-1) y para los mimetizadores de miARN mirVana™ experimentales. Utilice la expresión de los genes diana de las muestras transfectadas con el control negativo como base para evaluar el efecto del mimetizador de miARN de control y experimental en la expresión de los genes diana.

El control negativo n.° 1 para mimetizadores de miARN mirVana™ es una molécula mimetizadora de miARN de secuencia aleatoria que se ha sometido a numerosas pruebas con líneas celulares y tejidos humanos y se ha validado para no producir efectos identificables en la función conocida del miARN.

Controles y mimetizadores de primera generación
Nuestros mimetizadores (y controles) de primera generación de miARN, precursores de miARN Ambion™ Pre-miR™, tienen menor especificidad y potencia, además de una especificidad de cadena más baja en comparación con los nuevos mimetizadores de miARN mirVana™. Estos mimetizadores de primera generación se recomiendan para completar los estudios in vitro de miARN en curso. Para nuevos estudios o estudios in vivo, recomendamos nuestros nuevos mimetizadores de miARN mirVana™ y sus correspondientes controles.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Análisis de ARN sin codificación y Mirna
Etiqueta o tinteno conjugado
Línea de productosmirVana
Tipo de productomiARN Mimic
Método de purificaciónPurificado
Cantidad20 nmol
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de controlControl negativo
RNAi TypemiARN Mimic
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar a -20°C o inferior. No almacenar en un congelador sin escarcha.

Preguntas frecuentes

How can I quantify endogenous miRNA inactivation by mirVana inhibitors?

Using TaqMan miRNA assays, you can measure the level of miRNA of interest. If the miRNA is bound to the synthetic anti-miRs and/or mirVana inhibitors transfected, the duplex should not be detected, indicating efficient miRNA inactivation. Please note, this only works when total RNA sample isolated is not heat denatured when RT primer is added, as heat denaturation will result in complex dissociation and subsequent detection of microRNA by TaqMan miRNA assay even when cells have been transfected properly. Please see the protocol for the TaqMan MicroRNA Cells-to-CT kit (Cat. No. 4391848) for more details.

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How do you introduce mirVana miRNA mimics or inhibitors into cells?

Mimics and inhibitors can be transfected or electroporated into cells using parameters similar to those used for siRNA.

Using mirVana miRNA Mimics- For the following applications, use a cell line that expresses relatively low levels of the mature miRNA of interest.
- Cell density at the time of transfection. In general, 30-70% confluency is recommended.
- Transfection method (traditional or reverse transfection).
- Length of exposure of cells to transfection agent-RNA oligonucleotides complexes.
For many miRNA mimics, maximal activity is achieved after 24 hours, but biological assays may be performed 24-72 hours posttransfection. If you maintain your transfected cells longer than 24 hours, we suggest replacing the existing medium with fresh medium at 24 hours posttransfection, for greater viability of the cells.

Using mirVana miRNA Inhibitors to analyze endogenous miRNA function
For the following applications, use a cell line that expresses relatively high levels of the mature miRNA of interest.
General transfection starting points
mirVana miRNA Mimics and Inhibitors typically work best when transfected at a final concentration of 3-30 nM. Optimization experiments might include a concentration range of 1-100 nM. To increase accuracy and reproducibility when preparing transfection complexes, prepare a dilution of your stock oligonucleotides, and pipet a higher volume of diluted stock.

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What is the turnaround time for your mirVana miRNA Mimic and Inhibitors?

The turnaround time varies depending on the level of purification and whether it is a custom order or not. Please see the approximate timetable below:

Standard purification (5 and 20 nmol), 4 business days
HPLC/in vivo ready (250 nmol), 15 business days
Custom mirVana Mimics and Inhibitors, 15 business days

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I would like to create a custom mirVana mimic and inhibitor. Can I do this?

Yes, please provide us with your unpublished miRNA sequence and we can synthesize a corresponding mirVana mimic or inhibitor by clicking on this link (www5.invitrogen.com/custom-genomic-products/tools/mirna/).

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Can I get the sequence for the mirVana Mimics and Inhibitors negative control?

Negative control sequences require a confidential disclosure agreement while target sequences require prior proof of purchase for release.

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