Kit de inmovilización AminoLink™

El kit de inmovilización AminoLink contiene la resina de acoplamiento AminoLink y reactivos asociados suficientes para realizar 5 inmovilizaciones de proteínas, con una producción esperada de 2 a 20 mg de proteína por columna.La resina de acoplamiento AminoLink es agarosa granulada al 4 % entrecruzada que se ha activado con grupos de aldehídos para permitir la inmovilización covalente de anticuerpos y otras proteínas a través de aminas primarias.

Características de la resina de acoplamiento AminoLink:

•Resina de acoplamiento AminoLink: agarosa granulada al 4 % entrecruzada activada con aldehídos
• Ideal para anticuerpos y otras proteínas: inmoviliza moléculas mediante aminas primarias (-NH2)
•Condiciones de acoplamiento flexibles: acoplamiento eficaz (>85 %) en una amplia gama de condiciones de pH (4-10) y tampón (PBS u otro tampón sin amina, con o sin disolvente orgánico)
•Inmovilización estable y permanente: la reacción de acoplamiento da como resultado una unión de amina secundaria estable y resistente a fugas entre la resina y el ligando
•Mejor que la inmovilización con agarosa activada por CNBr: la unión es más estable y sin carga, lo que resulta en una unión menos inespecífica en los procedimientos de purificación por afinidad
•Versátil y reutilizable: la resina de afinidad preparada se adapta a la columna y las técnicas de afinidad por lotes y es reutilizable para aplicaciones típicas basadas en interacciones de unión de proteínas

Las proteínas y otras moléculas con aminas primarias se pueden enlazar (inmovilizar) covalentemente a la resina AminoLink para crear columnas de cromatografía y utilizarlas en purificación por afinidad.Los grupos de aldehídos forman uniones estables de aminas secundarias con aminas primarias, como las existentes en la cadena lateral de residuos de lisina (K) que, por lo general, son abundantes y directamente accesibles en las proteínas.Una vez inmovilizada la proteína, la resina de afinidad preparada se puede utilizar en una variedad de métodos de purificación por afinidad de columnas y a granel donde intervengan interacciones de unión con la proteína inmovilizada.La resina y el vinculante son estables en la mayoría de condiciones de unión y elución de uso frecuente en cromatografía, y permiten utilizar la resina preparada en varios ciclos de procedimientos de purificación por afinidad.

La reacción de inmovilización de resina AminoLink comprende la formación espontánea de uniones base de Schiff entre aldehídos y aminas y su estabilización posterior por incubación mediante un reductante suave.Toda la reacción de acoplamiento, llamada aminación reductiva, se produce en de 4 a 6 horas en tampones sencillos de no amina, por ejemplo, PBS.La eficacia de acoplamiento con anticuerpos y proteínas típicas es generalmente superior al 85 %, lo que resulta en 1 a 20 mg de proteína inmovilizada por mililitro de resina.

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