eBioscience™ Streptavidin Super Bright 780 Conjugate

eBioscience Streptavidin Super Bright 780 es un conjugado de estreptavidina y fluorocromo para protocolos de tinción indirecta para detectar anticuerpos primarios biotinilados en citometría de flujo. Los colorantes Super Bright son fluoróforos a base de polímeros que se excitan con el láser violeta (405 nm) y emiten fluorescencia a la longitud de onda indicada en su nombre. Están optimizados para su uso en citometría de flujo y permiten el uso de canales adicionales con excitación violeta. Los colorantes Super Bright son totalmente compatibles con otras moléculas fluorescentes, tampones y fijadores de eBioscience, tinciones de viabilidad y reactivos de uso común.

Super Bright 780 es un colorante en tándem que puede excitarse con la línea láser violeta (405 nm) y emite a 780 nm. Recomendamos utilizar un filtro de paso de banda 780/60 o equivalente. Asegúrese de que su instrumento es capaz de detectar este fluorocromo.

Aplicaciones probadas
El conjugado Streptavidin Super Bright 780 se ha probado mediante análisis de citometría de flujo para detectar anticuerpos primarios biotinilados. La cantidad de este conjugado que teñirá una muestra celular en un volumen final de 100 μl es inferior o igual a 0,125 μg.El número de células debe determinarse empíricamente, pero puede oscilar entre 10⁵ y 10⁸ células por prueba. Se recomienda que la estreptavidina se valore cuidadosamente para obtener un rendimiento óptimo en el ensayo de interés.

Las muestras pueden almacenarse en el tampón de fijación de IC o en la solución fijación/lisis de 1 paso durante un máximo de tres días en la oscuridad a 4 °C con un impacto mínimo en el brillo y la eficiencia/compensación de FRET. El rendimiento específico del clon tras la fijación debe determinarse empíricamente.

Cuando se utilicen dos o más anticuerpos conjugados con colorantes Super Bright en un panel de tinción, se recomienda utilizar el tampón de tinción completo Super Bright para minimizar cualquier interacción de los polímeros no específica. Consulte la hoja de datos del tampón de tinción completo Super Bright para obtener más información.

En algunos experimentos, hemos observado que los valores de compensación de los anticuerpos conjugados con Super Bright 780 son mayores en el canal violeta 450/50 cuando se utilizan las microesferas UltraComp eBeads en comparación con las células teñidas con un solo color. En tales circunstancias, se recomienda establecer una compensación con células. También hemos observado esto en algunos experimentos que usan gránulos de compensación de anticuerpo total AbC.

Los colorantes de polímero Super Bright se venden bajo licencia de Becton, Dickinson and Company.