Pierce™ Protein A/G Magnetic Agarose Beads

Los gránulos magnéticos de agarosa y proteína A/G Thermo Scientific™ Pierce™ proporcionan un método rápido y práctico para la purificación de inmunoglobulinas a partir de suero, sobrenadante de cultivo celular o ascitis. Para la purificación de anticuerpos, los gránulos se incuban con la muestra de anticuerpos y luego se separan magnéticamente del sobrenadante. El suero o la proteína de la célula huésped no específicamente ligados se pueden lavar antes de disociar el anticuerpo ligado con el tampón de elución. Los gránulos se eliminan manualmente de la solución mediante un soporte magnético o mediante automatización con un instrumento, como el procesador de partículas magnéticas Thermo Scientific™ KingFisher™ Flex. Los instrumentos automatizados son especialmente útiles para la purificación de mayor rendimiento y la detección de condiciones de purificación.

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Las partículas magnéticas de agarosa y proteína A/G contienen una proteína de fusión recombinante A/G de 50,5 kDa que se une covalentemente a una partícula de núcleo de agarosa con incrustación de magnetita. Estos gránulos no son simplemente una inmovilización mezclada de polipéptidos de proteína A y proteína G por separado, ni tampoco una mezcla de gránulos magnéticos de proteína A y gránulos magnéticos de proteína G. La proteína quimérica recombinante A/G combina cuatro dominios de unión a IgG de la proteína A y dos dominios de unión de la proteína G, lo que la convierte en una herramienta más genérica y práctica para purificar inmunoglobulinas.

Características de los gránulos magnéticos de agarosa y proteína A/G:
• Proteína A/G: proteína de fusión recombinante que tiene los dominios de unión de anticuerpos de las proteínas A y G, que permite la purificación de anticuerpos a partir de casi cualquier especie de mamífero.
• Alta capacidad : suficiente tanto para los procesos de purificación rutinarios como para los más exigentes.
• Baja capacidad de unión no específica: un protocolo de purificación con resultados optimizados da como resultado una purificación de IgG.
•Flexibilidad: comodidad de dominios de unión de IgG tanto de proteína A como de proteína G en un gránulo (bead).
• Compatibilidad: los gránulos son compatibles con aplicaciones manuales y automatizadas.
•Inerte y estable: el excepcional método de fabricación inmoviliza la proteína A/G por enlaces covalentes resistentes a la lixiviación.

Aunque los gránulos de agarosa superparamagnéticos y de alta calidad con magnetita incrustada están validados y optimizados para su uso con plataformas magnéticas de alto rendimiento, como los procesadores de partículas magnéticas KingFisher 96 y KingFisher Flex, también son ideales para conseguir un rendimiento superior en aplicaciones de purificación de sobremesa sencillas si se utiliza un soporte magnético adecuado.

La proteína A/G se une a todas las subclases de IgG humanas, lo que la convierte en la opción ideal para la purificación de anticuerpos IgG policlonales o monoclonales cuyas identidades de subclases no se han determinado. Además, se une a la IgA, la IgE, la IgM y (en menor medida) a la IgD. La proteína A/G se une bien a todos los subtipos de IgG de ratón, pero no se une a la IgA, a la IgM o a la albúmina sérica de este animal. Por ello, la proteína A/G es una herramienta excelente para la purificación y detección de los anticuerpos monoclonales del ratón a partir de subtipos de IgG, sin interferencia de la IgA, la IgM y la albúmina sérica murina. Es posible que los subtipos individuales de anticuerpos monoclonales de ratón tengan una mayor afinidad con la proteína A/G quimérica que con las proteínas A o G.